| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| 1.1 农杆菌介导的遗传转化 | 第10页 |
| 1.2 农杆菌毒力蛋白的功能 | 第10-12页 |
| 1.3 拟南芥中与农杆菌侵染有关的蛋白 | 第12-13页 |
| 1.3.1 AtVIP1参与农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第12-13页 |
| 1.3.2 拟南芥核输入蛋白AtIMPa | 第13页 |
| 1.4 bZIP转录因子的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.4.1 bZIP转录因子结构特征 | 第13页 |
| 1.4.2 拟南芥中bZIP转录因子研究进展 | 第13-14页 |
| 1.4.3 水稻中bZIP转录因子研究进展 | 第14-16页 |
| 1.5 CRISPR/Cas9基因敲除技术 | 第16-19页 |
| 1.5.1 CRISPR/Cas9载体的组成 | 第17-18页 |
| 1.5.2 多个靶位点编辑策略 | 第18页 |
| 1.5.3 分析靶位点的突变 | 第18-19页 |
| 1.5.4 影响编辑效率的因素 | 第19页 |
| 1.5.5 CRISPR/Cas9在植物中的应用 | 第19页 |
| 1.6 限制性内切酶的研究 | 第19-21页 |
| 1.6.1 限制性内切酶的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.6.2 限制性内切酶的组成与分类 | 第20-21页 |
| 1.7 研究目的 | 第21-23页 |
| 1.7.1 水稻OsbZIP81基因的研究目的 | 第21页 |
| 1.7.2 归位内切酶I-SceI的研究目的 | 第21-23页 |
| 第二章 水稻OsbZIP81转基因材料的构建及其与OsIMPa4相互作用的初步探究 | 第23-49页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料 | 第23页 |
| 2.3 实验仪器与试剂 | 第23-24页 |
| 2.4 实验方法 | 第24-39页 |
| 2.4.1 水稻cDNA模板的获取 | 第24-25页 |
| 2.4.2 水稻中的OsbZIP81超表达载体的构建 | 第25-29页 |
| 2.4.3 CRISPR/Cas9载体构建 | 第29-31页 |
| 2.4.4 根癌农杆菌EHA105介导的水稻遗传转化 | 第31-32页 |
| 2.4.5 转基因植株的检测 | 第32-36页 |
| 2.4.6 验证OsbZIP81与OsIMPa4的相互作用 | 第36-39页 |
| 2.5 结果与分析 | 第39-47页 |
| 2.5.1 OsbZIP81基因的生物信息学分析 | 第39-41页 |
| 2.5.2 超表达载体的鉴定 | 第41-42页 |
| 2.5.3 CRISPR/Cas9载体的鉴定 | 第42-43页 |
| 2.5.4 水稻转基因植株的鉴定 | 第43-45页 |
| 2.5.5 OsbZIP81与OsIMPa4相互作用的验证结果 | 第45-47页 |
| 2.6 讨论 | 第47-49页 |
| 2.6.1 OsbZIP81转基因材料的获得 | 第47-48页 |
| 2.6.2 OsbZIP81与OsIMPa4的互作 | 第48-49页 |
| 第三章 限制性内切酶I-SceI的制备 | 第49-55页 |
| 3.1 前言 | 第49页 |
| 3.2 实验材料 | 第49页 |
| 3.3 实验仪器与试剂 | 第49-50页 |
| 3.4 实验方法 | 第50-51页 |
| 3.4.1 限制性内切酶I-SceI基因的克隆 | 第50页 |
| 3.4.2 诱导表达蛋白GST-I-SceI | 第50页 |
| 3.4.3 纯化蛋白 | 第50-51页 |
| 3.4.4 酶活检测 | 第51页 |
| 3.5 结果与分析 | 第51-53页 |
| 3.5.1 表达载体及菌株的检测 | 第51-52页 |
| 3.5.2 GST-I-SceI蛋白诱导表达的结果 | 第52-53页 |
| 3.5.3 GST-I-SceI酶活检测 | 第53页 |
| 3.6 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录A 引物信息 | 第63-64页 |
| 附录B 实验所用的载体图 | 第64-67页 |
| 附录C 部分实验胶图 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
