| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 引言 | 第9-19页 |
| 1.1 真核生物的转录因子研究现状 | 第10页 |
| 1.2 ERF转录因子的研究进展 | 第10-14页 |
| 1.2.1 ERF转录因子的结构功能 | 第10-12页 |
| 1.2.2 植物逆境应答中的ERF转录因子 | 第12-14页 |
| 1.3 转录组测序的意义及发展 | 第14页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 1.5 研究内容与技术路线 | 第15-19页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第15-17页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第17-19页 |
| 第2章 刚毛柽柳ThCRF1基因的生物信息学分析及表达模式研究 | 第19-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 溶液配制 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-26页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 2.2.2 刚毛柽柳的胁迫处理、生理及qRT-PCR分析 | 第21-26页 |
| 2.2.3 细胞分裂素6-BA处理刚毛柽柳 | 第26页 |
| 2.2.4 统计分析 | 第26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-32页 |
| 2.3.1 ThCRF1的生物信息学分析 | 第26-30页 |
| 2.3.2 ThCRF1基因的表达模式分析 | 第30-32页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第32-35页 |
| 第3章 ThCRF1蛋白的亚细胞定位,自激活活性及结合元件研究 | 第35-65页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-38页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第35页 |
| 3.1.2 菌株与载体 | 第35页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第35-36页 |
| 3.1.4 培养基的配制 | 第36-37页 |
| 3.1.5 药品配制 | 第37页 |
| 3.1.6 抗生素及溶液配制 | 第37-38页 |
| 3.1.7 引物合成 | 第38页 |
| 3.1.8 序列测序 | 第38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-53页 |
| 3.2.1 ThCRF1的亚细胞定位 | 第38-44页 |
| 3.2.2 利用酵母双杂交研究ThCRF1的转录自激活活性 | 第44-48页 |
| 3.2.3 利用酵母单杂交研究ThCRF1蛋白与相关顺式作用元件的互作 | 第48-53页 |
| 3.3 结果与分析 | 第53-62页 |
| 3.3.1 ThCRF1蛋白的亚细胞定位 | 第53-55页 |
| 3.3.2 ThCRF1蛋白的自激活活性检测 | 第55-58页 |
| 3.3.3 ThCRF1结合顺式作用元件的研究 | 第58-62页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第62-65页 |
| 第4章 瞬时转化刚毛柽柳的耐盐功能分析 | 第65-89页 |
| 4.1 实验材料 | 第65-68页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第65页 |
| 4.1.2 菌株与载体 | 第65页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第65-66页 |
| 4.1.4 培养基及溶液配制 | 第66-68页 |
| 4.1.5 引物合成 | 第68页 |
| 4.2 实验方法 | 第68-77页 |
| 4.2.1 农杆菌的活化与菌体准备 | 第68页 |
| 4.2.2 刚毛柽柳种子的消毒及幼苗培养 | 第68-69页 |
| 4.2.3 柽柳幼苗的瞬时转化 | 第69-70页 |
| 4.2.4 瞬时转化转基因柽柳中ThCRF1表达量的检测 | 第70-71页 |
| 4.2.5 转基因柽柳的生理生化染色 | 第71页 |
| 4.2.6 生理生化指标的测定 | 第71-76页 |
| 4.2.7 柽柳抗逆物质相关合成基因的定量分析 | 第76-77页 |
| 4.2.8 统计分析 | 第77页 |
| 4.3 结果与分析 | 第77-87页 |
| 4.3.1 ThCRF1基因在转基因刚毛柽柳中的表达情况 | 第77-78页 |
| 4.3.2 盐胁迫下转基因刚毛柽柳的生理生化染色 | 第78-79页 |
| 4.3.3 盐胁迫下转基因刚毛柽柳的生理生化分析 | 第79-84页 |
| 4.3.4 盐胁迫下转基因刚毛柽柳中抗逆相关合成基因的表达分析 | 第84-87页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第87-89页 |
| 第5章 ThCRF1转基因拟南芥的耐盐功能分析 | 第89-111页 |
| 5.1 实验材料 | 第89-90页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第89页 |
| 5.1.2 载体和菌株 | 第89页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第89-90页 |
| 5.2 实验方法 | 第90-99页 |
| 5.2.1 拟南芥的遗传转化和筛选 | 第90-94页 |
| 5.2.2 转基因拟南芥的根长及表型分析 | 第94-95页 |
| 5.2.3 盐处理下转基因拟南芥的抗逆功能鉴定 | 第95-97页 |
| 5.2.4 转基因拟南芥抗逆物质相关合成基因的定量 | 第97-99页 |
| 5.2.5 统计分析 | 第99页 |
| 5.3 结果与分析 | 第99-108页 |
| 5.3.1 转基因拟南芥的筛选和检测 | 第99-100页 |
| 5.3.2 转基因拟南芥的根长及表型分析 | 第100-102页 |
| 5.3.3 盐胁迫处理下转基因拟南芥的生理生化分析 | 第102-105页 |
| 5.3.4 转基因拟南芥抗逆相关合成基因的表达分析 | 第105-108页 |
| 5.4 讨论与小结 | 第108-111页 |
| 第6章 ThCRF1调控下游基因表达的研究 | 第111-135页 |
| 6.1 实验材料 | 第111-113页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第111页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第111-112页 |
| 6.1.3 溶液配制 | 第112-113页 |
| 6.2 实验方法 | 第113-119页 |
| 6.2.1 转录组测序 | 第113-116页 |
| 6.2.2 染色质免疫共沉淀(ChIPassay) | 第116-119页 |
| 6.3 结果与分析 | 第119-132页 |
| 6.3.1 转录组测序分析 | 第119-131页 |
| 6.3.2 免疫共沉淀分析结果 | 第131-132页 |
| 6.4 讨论与小结 | 第132-135页 |
| 第7章 结论与展望 | 第135-141页 |
| 7.1 结论 | 第135-138页 |
| 7.2 创新点 | 第138-139页 |
| 7.3 展望 | 第139-141页 |
| 参考文献 | 第141-151页 |
| 附录 | 第151-153页 |
| 在读期间发表论文清单 | 第153-155页 |
| 致谢 | 第155-157页 |
