符号说明 | 第4-10页 |
中文摘要 | 第10-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 前言 | 第13-31页 |
1.1 活性氧 | 第13-22页 |
1.1.1 活性氧的产生机制 | 第13-17页 |
1.1.1.1 活性氧在叶绿体中的产生机制 | 第13-14页 |
1.1.1.2 活性氧在线粒体中的产生机制 | 第14-15页 |
1.1.1.3 质膜NADPH氧化酶产生活性氧的机制 | 第15-16页 |
1.1.1.4 细胞壁中活性氧的产生机制 | 第16-17页 |
1.1.2 活性氧的清除机制 | 第17-20页 |
1.1.3 活性氧调控的生理过程 | 第20-22页 |
1.1.3.1 活性氧对生物分子的氧化损伤 | 第20-21页 |
1.1.3.2 活性氧与细胞死亡 | 第21页 |
1.1.3.3 活性氧调控气孔运动 | 第21页 |
1.1.3.4 活性氧对植物生长发育的调控 | 第21-22页 |
1.2 非生物胁迫与活性氧的产生 | 第22-23页 |
1.2.1 干旱条件下活性氧的产生 | 第22页 |
1.2.2 高盐条件下活性氧的产生 | 第22-23页 |
1.2.3 低温条件下活性氧的产生 | 第23页 |
1.2.4 UV-B射线条件下活性氧的产生 | 第23页 |
1.3 类黄酮 | 第23-27页 |
1.3.1 类黄酮的生物合成及调控 | 第23-24页 |
1.3.2 类黄酮的转运 | 第24-26页 |
1.3.3 类黄酮的生物学功能 | 第26-27页 |
1.3.4 类黄酮与胁迫的关系 | 第27页 |
1.4 盐胁迫 | 第27-28页 |
1.5 ABA | 第28-30页 |
1.6 本实验的目的意义 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-43页 |
2.1 实验材料 | 第31-33页 |
2.1.1 植物材料 | 第31页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第31页 |
2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第31页 |
2.1.4 引物 | 第31-33页 |
2.2 实验方法 | 第33-43页 |
2.2.1 植物基因组的提取与纯化 | 第33-34页 |
2.2.1.1 植物基因组的提取 | 第33页 |
2.2.1.2 植物基因组的纯化 | 第33-34页 |
2.2.2 载体构建 | 第34-36页 |
2.2.2.1 PCR扩增 | 第34页 |
2.2.2.2 连接反应 | 第34-35页 |
2.2.2.3 酶切和回收 | 第35页 |
2.2.2.4 超表达TT6表达载体的构建 | 第35-36页 |
2.2.2.5 TT6启动子表达载体的构建 | 第36页 |
2.2.2.6 TT6-GFP表达载体的构建 | 第36页 |
2.2.3 突变体纯合植株PCR鉴定 | 第36页 |
2.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第36-37页 |
2.2.4.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
2.2.4.2 大肠杆菌的转化 | 第37页 |
2.2.5 大肠杆菌中质粒的提取 | 第37-38页 |
2.2.6 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第38-39页 |
2.2.6.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第38页 |
2.2.6.2 冻融法转化农杆菌细胞 | 第38-39页 |
2.2.7 拟南芥转化及转基因植株的鉴定 | 第39页 |
2.2.7.1 拟南芥转化 | 第39页 |
2.2.7.2 转基因植株鉴定 | 第39页 |
2.2.8 RNA提取、纯化与反转录 | 第39-40页 |
2.2.8.1 TRIzol法提取RNA | 第39-40页 |
2.2.8.2 RNA中基因组DNA的去除 | 第40页 |
2.2.8.3 反转录 | 第40页 |
2.2.9 半定量RT-PCR | 第40-41页 |
2.2.10 GUS组织化学染色 | 第41页 |
2.2.11 氧化胁迫处理 | 第41页 |
2.2.12 HPLC | 第41-43页 |
3 结果与分析 | 第43-55页 |
3.1 拟南芥氧化胁迫抗性突变体的筛选 | 第43-44页 |
3.2 突变基因的图位克隆 | 第44-45页 |
3.3 拟南芥TT6基因的组织表达模式及蛋白亚细胞定位 | 第45-47页 |
3.4 突变体tt6-5对于非生物胁迫响应的研究 | 第47-55页 |
3.4.1 突变体对于氧化胁迫的响应 | 第47-48页 |
3.4.2 突变体对于盐胁迫的响应 | 第48-49页 |
3.4.3 突变体对于ABA的响应 | 第49-50页 |
3.4.4 TT6超表达和互补植株表型分析 | 第50-52页 |
3.4.5 TT6响应氧化胁迫机理分析 | 第52-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-70页 |
致谢 | 第70页 |