| 符号说明 | 第1-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-31页 |
| ·蛋白质的折叠 | 第11-21页 |
| ·蛋白质折叠的概述 | 第11-12页 |
| ·蛋白质的体外折叠 | 第12-13页 |
| ·蛋白质去折叠的研究 | 第13-14页 |
| ·蛋白质的再折叠研究 | 第14-20页 |
| ·蛋白质折叠过程与二硫键的形成 | 第20-21页 |
| ·蛋白质折叠的辅助因子 | 第21-28页 |
| ·分子伴侣 | 第21-22页 |
| ·折叠酶 | 第22-23页 |
| ·二硫键异构酶及其生物学性质 | 第23-24页 |
| ·Dsb 家族蛋白与DsbC | 第24-28页 |
| ·植酸酶的概述 | 第28-30页 |
| ·植酸酶的结构 | 第28-29页 |
| ·植酸酶分子中的二硫键 | 第29-30页 |
| ·本研究的目的意义 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-47页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·菌株与质粒 | 第31页 |
| ·主要工具酶及试剂 | 第31页 |
| ·主要实验仪器 | 第31页 |
| ·主要试剂的配制 | 第31-34页 |
| ·碱裂解法提质粒的相关溶液 | 第31-32页 |
| ·植酸酶活性及蛋白含量测定过程中相关溶液的配制 | 第32-33页 |
| ·SDS- PAGE 缓冲液的配制 | 第33页 |
| ·蛋白提纯过程中相关溶液的配制 | 第33-34页 |
| ·亲和层析中相关溶液的配制 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-47页 |
| ·dsbC 基因的扩增、克隆及序列测定 | 第34-39页 |
| ·DsbC 的原核表达 | 第39-43页 |
| ·原核表达DsbC 的纯化 | 第43-45页 |
| ·植酸酶的分离纯化及酶活性测定 | 第45-46页 |
| ·植酸酶的去折叠和再折叠实验 | 第46-47页 |
| 3 结果和分析 | 第47-62页 |
| ·dsbC 基因的扩增、克隆及序列测定 | 第47-48页 |
| ·dsbC 基因的PCR 扩增 | 第47页 |
| ·dsbC 基因扩增产物的克隆及序列分析 | 第47-48页 |
| ·DsbC 蛋白的原核表达及纯化 | 第48-52页 |
| ·dsbC 基因原核表达载体的构建和鉴定 | 第48-49页 |
| ·DsbC 蛋白的表达及溶解性分析 | 第49-51页 |
| ·DsbC 包涵体的纯化、复性及修饰 | 第51-52页 |
| ·植酸酶的变性 | 第52-53页 |
| ·DsbC 蛋白对植酸酶复性的帮助作用 | 第53-55页 |
| ·DsbC 对尿变性植酸酶再折叠的作用 | 第54-55页 |
| ·DsbC 对还原尿变性植酸酶再折叠的作用 | 第55页 |
| ·DsbC 蛋白的异构酶功能与分子伴侣功能 | 第55-58页 |
| ·DsbC 蛋白与一些折叠因子在植酸酶再折叠过程中的作用 | 第58-62页 |
| ·(m)DsbC 和GSSG/GSH 在植酸酶再折叠过程中的作用 | 第58-60页 |
| ·DsbC 和几种Osmolytes 在植酸酶再折叠过程中的作用 | 第60-62页 |
| 4 讨论 | 第62-66页 |
| ·DsbC 的原核表达和纯化 | 第62-63页 |
| ·DsbC 蛋白对植酸酶复性的帮助作用 | 第63-64页 |
| ·DsbC 蛋白与折叠辅因子在植酸酶再折叠过程中的作用 | 第64-66页 |
| 5. 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第81页 |
