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拟南芥PGABH和AspRS的表达分析及功能鉴定

符号说明第1-6页
目录第6-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-32页
   ·脱落酸研究进展概述第13-24页
     ·脱落酸的发现第13页
     ·植物体中脱落酸的作用第13-22页
       ·促进果实成熟第13-14页
       ·促进气孔关闭第14-16页
       ·促进种子休眠第16-18页
       ·提高植物抗干旱能力第18-19页
       ·提高植物的抗低温能力第19-20页
       ·提高植物对盐胁迫的抗性第20-21页
       ·提高植物的抗缺素能力第21-22页
     ·脱落酸受体研究进展第22-24页
   ·氨酰-tRNA 合成酶第24-30页
     ·氨酰-tRNA 合成酶的结构及分类第24-28页
     ·氨酰-tRNA 合成酶的功能第28-30页
       ·参与基因表达调控第28-29页
       ·调节rRNA 合成第29-30页
       ·RNA 剪切细胞因子第30页
       ·抑制细胞凋亡第30页
     ·天冬氨酰-tRNA 合成酶的研究进展第30页
   ·本研究的目的与意义第30-32页
2 材料与方法第32-46页
   ·实验材料第32-34页
     ·植物材料第32页
     ·菌株与质粒第32页
     ·酶与各种生化试剂第32页
     ·实验用的引物第32-34页
   ·实验方法第34-46页
     ·RNA 的提取第34-35页
       ·利用TRIzol 法提取RNA第34页
       ·利用通用植物总RNA 提取试剂盒(离心柱型)提取RNA第34-35页
     ·RNA 中基因组DNA 的去除第35页
     ·RNA 反转录第35页
     ·拟南芥基因组DNA 的提取(小量法)第35-36页
     ·拟南芥PGABH 和AspRS 序列的扩增第36页
     ·凝胶电泳中DNA 片段的回收第36-37页
     ·DNA 片段与克隆载体的连接第37页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第37-38页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第37-38页
       ·大肠杆菌细胞的转化第38页
     ·克隆载体的酶切鉴定第38页
     ·质粒DNA 的提取第38-39页
       ·碱法小量质粒DNA 的提取第38-39页
       ·碱法大量质粒DNA 的提取第39页
     ·表达载体的构建第39-40页
     ·植物表达载体的转化第40-41页
       ·根癌农杆菌LBA4404、GV3101 感受态细胞的制备第40页
       ·冻融法转化农杆菌第40-41页
     ·农杆菌的培养第41页
     ·农杆菌介导的拟南芥转化第41页
     ·农杆菌介导的洋葱表皮细胞转化第41-42页
     ·转基因拟南芥PCR 检测第42-43页
     ·PCR 鉴定突变体纯合植株第43页
     ·qRT-PCR第43-44页
       ·qRT-PCR 引物设计第43-44页
       ·qRT-PCR 反应条件第44页
     ·转基因拟南芥植株GUS 组织化学染色分析第44-45页
     ·叶绿素含量的测定第45-46页
3 结果与分析第46-60页
   ·PGABH 的启动子分析第46页
   ·PGABH 的表达分析第46-48页
   ·PGABH 在拟南芥中的功能鉴定第48-53页
     ·PGABH 缺失突变体pgabh-1 及互补突变体植株的获得第48-49页
     ·ABA 抑制pgabh-1 子叶初期生长第49-51页
     ·子叶生长初期ABA 处理使PGABH 表达下调第51页
     ·PGABH 影响拟南芥植株发育及开花时间第51-52页
     ·PGABH 对拟南芥中开花相关基因的调控第52-53页
   ·AtAspRS 的组织表达分析第53-54页
   ·AtAspRS 在拟南芥中的功能鉴定第54-57页
     ·AtAspRS 超表达植株的表型第54-56页
     ·AtAspRS 超表达植株中叶绿素含量测定第56-57页
   ·AtAspRS 超表达植株的表达谱分析第57-60页
4 讨论第60-62页
   ·PGABH 介导了ABA 调控子叶初期生长过程第60页
   ·PGABH 调控拟南芥开花时间第60-61页
   ·AspRS 在拟南芥中的功能探究第61-62页
5 结论第62-63页
6 参考文献第63-74页
7 附录第74-76页
8 致谢第76-77页
9 攻读学位期间发表论文情况第77页

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