| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 植物激素生长素 | 第11-18页 |
| 1.1.1 生长素分布模型 | 第11-12页 |
| 1.1.2 生长素的极性运输 | 第12-14页 |
| 1.1.3 生长素信号途径 | 第14-18页 |
| 1.2 胞吐 | 第18-22页 |
| 1.2.1 胞吐拴系过程 | 第18页 |
| 1.2.2 胞吐复合体 | 第18-19页 |
| 1.2.3 植物胞吐复合体 | 第19-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-29页 |
| 2.1.1 拟南芥材料及生长条件 | 第22页 |
| 2.1.2 烟草材料及生长条件 | 第22页 |
| 2.1.3 菌株与质粒 | 第22页 |
| 2.1.4 各种酶及生化试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.5 各种缓冲液及培养基配方 | 第23-27页 |
| 2.1.5.1 菌株培养所用LB固体培养基(1L) | 第23页 |
| 2.1.5.2 植物培养所用培养基及营养液等配方 | 第23-25页 |
| 2.1.5.3 拟南芥侵染液配方(100mL) | 第25页 |
| 2.1.5.4 植物染色试剂配方 | 第25页 |
| 2.1.5.5 酵母双杂Y2H培养基及试剂 | 第25-27页 |
| 2.1.5.6 激素配方 | 第27页 |
| 2.1.6 引物设计 | 第27-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-39页 |
| 2.2.1 植物总DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.2 植物总RNA的提取、反转录及定量分析 | 第30-31页 |
| 2.2.2.1 植物总RNA的提取 | 第30页 |
| 2.2.2.2 植物总RNA的反转录 | 第30-31页 |
| 2.2.3 构建植物转基因表达载体的步骤 | 第31-35页 |
| 2.2.3.1 PCR扩增目的片段 | 第31-32页 |
| 2.2.3.2 目的片段和表达载体酶切及回收 | 第32-33页 |
| 2.2.3.3 连接反应 | 第33页 |
| 2.2.3.4 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第33页 |
| 2.2.3.5 热激法进行大肠杆菌的转化 | 第33-34页 |
| 2.2.3.6 菌落PCR | 第34页 |
| 2.2.3.7 酶切鉴定表达载体及测序 | 第34-35页 |
| 2.2.4 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的转化 | 第35页 |
| 2.2.5 Y2H酵母双杂交 | 第35-36页 |
| 2.2.5.1 Y2H酵母感受态的制备 | 第35-36页 |
| 2.2.5.2 质粒共转Y2H酵母感受态及结果观察 | 第36页 |
| 2.2.6 拟南芥的栽培与转化 | 第36-37页 |
| 2.2.6.1 拟南芥的栽培 | 第36-37页 |
| 2.2.6.2 拟南芥的转化 | 第37页 |
| 2.2.7 转基因拟南芥阳性植株的筛选 | 第37页 |
| 2.2.8 烟草的瞬时侵染 | 第37-38页 |
| 2.2.9 拟南芥BFA处理和洗脱实验 | 第38页 |
| 2.2.10 GUS染色 | 第38页 |
| 2.2.11 植物细胞壁PI染色 | 第38页 |
| 2.2.12 共聚焦显微镜观察和图像处理 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-53页 |
| 3.1 EXO70B1功能缺失突变体的获得及鉴定 | 第39-40页 |
| 3.2 exo70B1-3突变体的表型分析 | 第40-46页 |
| 3.2.1 突变体的根形态发生异常 | 第40-41页 |
| 3.2.2 突变体的根的向地性发生变化 | 第41-42页 |
| 3.2.3 突变体对外源生长素NAA的响应 | 第42-43页 |
| 3.2.4 突变体根部生长素水平发生异常 | 第43-44页 |
| 3.2.5 突变体影响生长素外运蛋白PIN2的循环 | 第44-46页 |
| 3.3 EXO70家族蛋白与Aux/IAA家族的互作探究 | 第46-53页 |
| 3.3.1 EXO70B1,EXO70B2可与Aux/IAA家族成员互作 | 第46-47页 |
| 3.3.2 EXO70B1,EXO70B2可与Aux/IAA家族成员的功能域IV互作 | 第47-50页 |
| 3.3.3 EXO70B1的N端与Aux/IAA家族成员互作 | 第50页 |
| 3.3.4 EXO70B1,EXO70B2与IAA5在幼苗中共定位 | 第50-51页 |
| 3.3.5 LUC荧光检测EXO70B1,EXO70B2与IAA18的互作关系 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
