| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 小麦赤霉病研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 小麦赤霉病概况 | 第11-12页 |
| 1.1.2 禾谷镰刀菌的生物学特性 | 第12-13页 |
| 1.1.3 禾谷镰刀菌致病基因的研究进展 | 第13页 |
| 1.1.4 小麦赤霉病防治措施 | 第13-14页 |
| 1.2 脂肪酸β-氧化与烯酰辅酶A水合酶 | 第14-19页 |
| 1.2.1 脂肪酸运输与β-氧化 | 第14-17页 |
| 1.2.2 过氧化物酶体β-氧化 | 第17页 |
| 1.2.3 烯脂酰CoA水合酶 | 第17-19页 |
| 1.2.4 真菌烯脂酰CoA水合酶研究现状 | 第19页 |
| 1.3 该项研究目的和意义 | 第19-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-28页 |
| 2.1.1 实验菌株和载体 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要溶液配制配方 | 第22-24页 |
| 2.1.3 培养基配制方法 | 第24-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-40页 |
| 2.2.1 禾谷镰刀菌FgEch1基因结构分析 | 第28页 |
| 2.2.2 禾谷镰刀菌的保存和培养 | 第28页 |
| 2.2.3 提取禾谷镰刀菌基因组DNA | 第28-29页 |
| 2.2.4 酵母和大肠杆菌质粒DNA提取方法 | 第29页 |
| 2.2.5 普通PCR扩增反应 | 第29-30页 |
| 2.2.6 PCR产物纯化和DNA琼脂糖凝胶胶回收 | 第30页 |
| 2.2.7 构建禾谷镰刀菌FgEch1基因敲除载体 | 第30-32页 |
| 2.2.8 原生质体制备和转化 | 第32-33页 |
| 2.2.9 PCR验证敲除转化子 | 第33页 |
| 2.2.10 Southernblot验证敲除转化子 | 第33-34页 |
| 2.2.11 禾谷镰刀菌FgEch1基因回复 | 第34-36页 |
| 2.2.11.1 构建FgEch1基因回复载体 | 第34-36页 |
| 2.2.11.2 获取FgEch1基因回复菌株 | 第36页 |
| 2.2.12 从生物学表型分析FgEch1基因敲除突变体 | 第36-40页 |
| 2.2.12.1 观察菌落形态与测量菌落生长速度 | 第36页 |
| 2.2.12.2 观察菌落的菌丝末端分支 | 第36-37页 |
| 2.2.12.3 测定菌落对脂肪酸利用情况 | 第37页 |
| 2.2.12.4 无性生殖测定 | 第37-38页 |
| 2.2.12.5 测定氧胁迫下的敏感性 | 第38页 |
| 2.2.12.6 测定有性生殖表型 | 第38-39页 |
| 2.2.12.7 FgEch1突变体的致病性测定 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-55页 |
| 3.1 禾谷镰刀菌FgEch1结构和进化树分析 | 第40-42页 |
| 3.1.1 禾谷镰刀菌FgEch1基因的获得 | 第40-42页 |
| 3.2 禾谷镰刀菌FgEch1基因的敲除 | 第42-45页 |
| 3.2.1 敲除载体构建过程 | 第42-43页 |
| 3.2.2 验证敲除突变体 | 第43-45页 |
| 3.2.2.1 PCR验证 | 第43-44页 |
| 3.2.2.2 Southenblot验证 | 第44-45页 |
| 3.3 获得禾谷镰刀菌FgEch1回复菌株 | 第45-46页 |
| 3.3.1 构建FgEch1基因回复载体和回复菌株转化 | 第45页 |
| 3.3.2 验证回复菌株?Ech1-C | 第45-46页 |
| 3.4 FgEch1基因敲除突变体的表型观察 | 第46-55页 |
| 3.4.1 FgEch1基因不影响菌落生长 | 第46-47页 |
| 3.4.2 FgEch1基因调控脂肪酸的利用 | 第47-49页 |
| 3.4.3 FgEch1基因影响孢子产量与孢子萌发 | 第49-51页 |
| 3.4.4 FgEch1基因不影响有性生殖 | 第51-52页 |
| 3.4.5 FgEch1基因调控致病性 | 第52-54页 |
| 3.4.6 FgEch1基因调控对H_2O_2胁迫敏感性 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-56页 |
| 5 总结与展望 | 第56-58页 |
| 5.1 实验总结 | 第56页 |
| 5.2 研究展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
