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中华卵索线虫Oslaf-1基因的原核表达及蛋白表达分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
1 前言第12-25页
    1.1 中华卵索线虫研究进展第12-15页
        1.1.1 中华卵索线虫生物学特征第12-13页
        1.1.2 中华卵索线虫生理生化研究第13-14页
        1.1.3 中华卵索线虫分子生物学研究第14-15页
    1.2 DEAD-box解旋酶家族研究进展第15-22页
        1.2.1 DEAD-box解旋酶第16-17页
        1.2.2 DEAD-box蛋白的生化活性第17-18页
        1.2.3 DEAD-box蛋白在细胞代谢中的功能第18-20页
        1.2.4 C.elegans等DEAD-box的研究第20-22页
    1.3 pMAL~(TM)原核表达系统第22-24页
    1.4 本研究立题的目的和意义第24-25页
2 材料与方法第25-35页
    2.1 实验材料第25-27页
        2.1.1 材料来源及饲养第25页
        2.1.2 工具酶、菌株与载体第25页
        2.1.3 主要试剂与溶液第25-26页
        2.1.4 主要仪器设备第26-27页
    2.2 实验方法第27-35页
        2.2.1 中华卵索线虫RNA的提取和检测第27-28页
        2.2.2 Osla-1基因片段的克隆第28-29页
        2.2.3 克隆载体的构建第29-30页
        2.2.4 质粒的提取第30-31页
        2.2.5 重组表达载体pMAL-c2X-Oslaf-1的构建第31页
        2.2.6 融合蛋白的诱导表达及Western blot鉴定第31-33页
        2.2.7 融合蛋白的纯化第33页
        2.2.8 抗OSLAF-1多抗血清的制备及特异性检测第33-34页
        2.2.9 Western blot检测中华卵索线虫中的OSLAF-1蛋白第34-35页
3 结果与分析第35-43页
    3.1 OSLAF-1蛋白结构、特性的预测第35页
    3.2 Oslaf-1基因的原核表达、抗体制备及Western blot检测第35-43页
        3.2.1 中华卵索线虫RNA的提取和检测第35页
        3.2.2 Osla-1基因片段的克隆第35-36页
        3.2.3 重组表达载体pMAL-c2X-Oslaf-1的构建第36-37页
        3.2.4 融合蛋白的诱导表达及Western blot鉴定第37-39页
        3.2.5 融合蛋白的纯化第39-40页
        3.2.6 抗OSLAF-1多抗血清的制备及特异性检测第40-41页
        3.2.7 OSLAF-1蛋白在中华卵索线虫不同组织部位中的表达分析第41页
        3.2.8 OSLAF-1蛋白在寄生后期雌幼虫中的表达分析第41-43页
4 讨论第43-47页
    4.1 Oslaf-1基因的原核表达及其多克隆抗体的制备与检测第43-44页
    4.2 OSLAF-1蛋白在中华卵索线虫不同组织部位中的表达分析第44页
    4.3 OSLAF-1蛋白在寄生后期雌幼虫中的表达分析第44-45页
    4.4 小结与展望第45-47页
参考文献第47-55页
攻读硕士学位期间论文发表情况第55-56页
致谢第56页

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