摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 前言 | 第12-25页 |
1.1 中华卵索线虫研究进展 | 第12-15页 |
1.1.1 中华卵索线虫生物学特征 | 第12-13页 |
1.1.2 中华卵索线虫生理生化研究 | 第13-14页 |
1.1.3 中华卵索线虫分子生物学研究 | 第14-15页 |
1.2 DEAD-box解旋酶家族研究进展 | 第15-22页 |
1.2.1 DEAD-box解旋酶 | 第16-17页 |
1.2.2 DEAD-box蛋白的生化活性 | 第17-18页 |
1.2.3 DEAD-box蛋白在细胞代谢中的功能 | 第18-20页 |
1.2.4 C.elegans等DEAD-box的研究 | 第20-22页 |
1.3 pMAL~(TM)原核表达系统 | 第22-24页 |
1.4 本研究立题的目的和意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-35页 |
2.1 实验材料 | 第25-27页 |
2.1.1 材料来源及饲养 | 第25页 |
2.1.2 工具酶、菌株与载体 | 第25页 |
2.1.3 主要试剂与溶液 | 第25-26页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第26-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-35页 |
2.2.1 中华卵索线虫RNA的提取和检测 | 第27-28页 |
2.2.2 Osla-1基因片段的克隆 | 第28-29页 |
2.2.3 克隆载体的构建 | 第29-30页 |
2.2.4 质粒的提取 | 第30-31页 |
2.2.5 重组表达载体pMAL-c2X-Oslaf-1的构建 | 第31页 |
2.2.6 融合蛋白的诱导表达及Western blot鉴定 | 第31-33页 |
2.2.7 融合蛋白的纯化 | 第33页 |
2.2.8 抗OSLAF-1多抗血清的制备及特异性检测 | 第33-34页 |
2.2.9 Western blot检测中华卵索线虫中的OSLAF-1蛋白 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-43页 |
3.1 OSLAF-1蛋白结构、特性的预测 | 第35页 |
3.2 Oslaf-1基因的原核表达、抗体制备及Western blot检测 | 第35-43页 |
3.2.1 中华卵索线虫RNA的提取和检测 | 第35页 |
3.2.2 Osla-1基因片段的克隆 | 第35-36页 |
3.2.3 重组表达载体pMAL-c2X-Oslaf-1的构建 | 第36-37页 |
3.2.4 融合蛋白的诱导表达及Western blot鉴定 | 第37-39页 |
3.2.5 融合蛋白的纯化 | 第39-40页 |
3.2.6 抗OSLAF-1多抗血清的制备及特异性检测 | 第40-41页 |
3.2.7 OSLAF-1蛋白在中华卵索线虫不同组织部位中的表达分析 | 第41页 |
3.2.8 OSLAF-1蛋白在寄生后期雌幼虫中的表达分析 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
4.1 Oslaf-1基因的原核表达及其多克隆抗体的制备与检测 | 第43-44页 |
4.2 OSLAF-1蛋白在中华卵索线虫不同组织部位中的表达分析 | 第44页 |
4.3 OSLAF-1蛋白在寄生后期雌幼虫中的表达分析 | 第44-45页 |
4.4 小结与展望 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第55-56页 |
致谢 | 第56页 |