| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-35页 |
| 1.1 昆虫嗅觉系统 | 第14-26页 |
| 1.1.1 昆虫嗅觉系统简介 | 第14-16页 |
| 1.1.2 气味结合蛋白 | 第16-22页 |
| 1.1.3 化学感受蛋白 | 第22-24页 |
| 1.1.4 气味受体 | 第24-25页 |
| 1.1.5 感觉神经元膜蛋白 | 第25-26页 |
| 1.1.6 气味降解酶 | 第26页 |
| 1.2 气味分子的来源与性质 | 第26-29页 |
| 1.2.1 寄主植物挥发物 | 第26-28页 |
| 1.2.2 昆虫信息素 | 第28-29页 |
| 1.3 气味结合蛋白的研究方法 | 第29-33页 |
| 1.3.1 气味结合蛋白结构和功能的研究 | 第30-31页 |
| 1.3.2 分子模拟在气味结合蛋白研究中的应用 | 第31-33页 |
| 1.4 研究设想 | 第33-35页 |
| 第二章 苹果蠹蛾CpomPBP2功能及其与气味分子的结合模式分析 | 第35-72页 |
| 2.1 实验材料及仪器 | 第36-37页 |
| 2.1.1 试虫 | 第36页 |
| 2.1.2 试剂 | 第36页 |
| 2.1.3 主要缓冲液的配制 | 第36页 |
| 2.1.4 菌株及载体 | 第36页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第36-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-53页 |
| 2.2.1 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第37-38页 |
| 2.2.2 CpomPBP2基因进化树分析 | 第38-39页 |
| 2.2.3 反转录PCR（RT-PCR） | 第39-40页 |
| 2.2.4 CpomPBP2的蛋白质印记分析 | 第40页 |
| 2.2.5 表达菌株的构建 | 第40-43页 |
| 2.2.6 CpomPBP2的原核表达及纯化 | 第43-46页 |
| 2.2.7 CpomPBP2三维结构同源模建 | 第46页 |
| 2.2.8 CpomPBP2蛋白的内源荧光检测 | 第46页 |
| 2.2.9 分子对接 | 第46-47页 |
| 2.2.10 竞争结合实验 | 第47页 |
| 2.2.11 丙氨酸突变扫描 | 第47-53页 |
| 2.3 结果与分析 | 第53-69页 |
| 2.3.1 CpomPBP2序列分析及组织分布 | 第53-55页 |
| 2.3.2 表达菌株的构建 | 第55-56页 |
| 2.3.3 CpomPBP2的表达及纯化 | 第56-57页 |
| 2.3.4 CpomPBP2三维结构的构建 | 第57-60页 |
| 2.3.5 CpomPBP2内源荧光检测 | 第60-61页 |
| 2.3.6 基于分子对接的虚拟筛选 | 第61-64页 |
| 2.3.7 荧光竞争结合实验 | 第64-65页 |
| 2.3.8 CpomPBP2 C-端功能分析 | 第65-66页 |
| 2.3.9 结合模式和结合自由能的分析 | 第66-68页 |
| 2.3.10 丙氨酸突变扫描 | 第68-69页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第69-72页 |
| 2.4.1 小结 | 第69-70页 |
| 2.4.2 讨论 | 第70-72页 |
| 第三章 苹果蠹蛾CpomPBP1的克隆表达及功能分析 | 第72-97页 |
| 3.1 实验材料及仪器 | 第72-74页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第72页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第72页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第72-74页 |
| 3.2 实验方法 | 第74-82页 |
| 3.2.1 CpomPBP1基因保守区的扩增 | 第74页 |
| 3.2.2 CpomPBP1的RACE（Rapid Amplification of cDNA Ends）扩增 | 第74-77页 |
| 3.2.3 CpomPBP1基因的内含子 | 第77-78页 |
| 3.2.4 CpomPBP1序列分析 | 第78页 |
| 3.2.5 CpomPBP1的反转录PCR（RT-PCR） | 第78-79页 |
| 3.2.6 CpomPBP1的蛋白质印记分析 | 第79页 |
| 3.2.7 CpomPBP1的免疫荧光检测 | 第79页 |
| 3.2.8 CpomPBP1蛋白表达载体的构建 | 第79页 |
| 3.2.9 CpomPBP1的原核表达及纯化 | 第79页 |
| 3.2.10 CpomPBP1内源荧光检测 | 第79页 |
| 3.2.11 荧光竞争结合实验 | 第79-80页 |
| 3.2.12 CpomPBP1的C-端功能分析 | 第80-81页 |
| 3.2.13 数据分析 | 第81-82页 |
| 3.3 结果与分析 | 第82-94页 |
| 3.3.1 CpomPBP1的序列分析 | 第82-85页 |
| 3.3.2 CpomPBP1的组织分布 | 第85-88页 |
| 3.3.3 蛋白的原核表达及纯化 | 第88页 |
| 3.3.4 CpomPBP1的内源荧光特征 | 第88-92页 |
| 3.3.5 荧光竞争结合实验 | 第92-94页 |
| 3.3.6 CpomPBP1 C-端功能分析 | 第94页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第94-97页 |
| 3.4.1 小结 | 第94页 |
| 3.4.2 讨论 | 第94-97页 |
| 第四章 CpomPBP1与Codlemone作用的关键氨基酸位点研究 | 第97-113页 |
| 4.1 实验材料和仪器 | 第97-98页 |
| 4.1.1 实验材料和试剂 | 第97页 |
| 4.1.2 菌株和载体 | 第97页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第97-98页 |
| 4.2 实验方法 | 第98-102页 |
| 4.2.1 CpomPBP1结构模建与CpomPBP1/Codlemone复合物构建 | 第98页 |
| 4.2.2 CpomPBP1/Codlemone复合物分子动力学稳定性分析 | 第98页 |
| 4.2.3 结合自由能计算及单个氨基酸能量分解 | 第98页 |
| 4.2.4 CpomPBP1的丙氨酸突变扫描 | 第98页 |
| 4.2.5 定点突变 | 第98-101页 |
| 4.2.6 蛋白的原核表达和纯化 | 第101页 |
| 4.2.7 竞争结合实验 | 第101页 |
| 4.2.8 数据分析 | 第101-102页 |
| 4.3 结果与分析 | 第102-110页 |
| 4.3.1 CpomPBP1结构模建与CpomPBP1/Codlemone复合物构建 | 第102-104页 |
| 4.3.2 CpomPBP1/Codlemone复合物分子动力学稳定性分析 | 第104-105页 |
| 4.3.3 结合自由能计算及能量分解 | 第105-107页 |
| 4.3.4 基于丙氨酸突变扫描与生物学定点突变验证关键氨基酸位点 | 第107-110页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第110-113页 |
| 4.4.1 小结 | 第110-111页 |
| 4.4.2 讨论 | 第111-113页 |
| 第五章 总结 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-129页 |
| 缩略词 | 第129-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 作者简介 | 第131页 |
