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稻瘟菌效应蛋白MoNLE1的功能分析和水稻泛素化蛋白质组学研究

摘要第5-6页
Abstract第6页
第一部分 稻瘟菌效应蛋白MONLE1的功能分析第9-51页
    第一章 绪论第9-22页
        1.1 稻瘟菌及其致病机理第9-11页
            1.1.1 稻瘟菌及生活史第9-10页
            1.1.2 稻瘟菌致病机理第10-11页
        1.2 植物病原菌效应蛋白研究进展第11-20页
            1.2.1 植物病原细菌效应蛋白第12-13页
            1.2.2 植物病原卵菌效应蛋白第13-14页
            1.2.3 植物病原真菌效应蛋白第14-20页
        1.3 研究目的、意义与技术路线第20-22页
    第二章 材料与方法第22-38页
        2.1 试验材料、试剂与仪器第22-27页
            2.1.1 植物材料与菌株第22页
            2.1.2 载体材料第22页
            2.1.3 试剂、仪器与培养基第22-27页
        2.2 试验方法第27-38页
            2.2.1 MoNLE1信号肽分泌试验第27-28页
            2.2.2 酵母YTK12感受态的制备及转化第28页
            2.2.3 农杆菌介导的烟草细胞瞬时表达第28-29页
            2.2.4 水稻原生质体的制备及转化第29-31页
            2.2.5 MoNLE1转基因植株的Western blot鉴定第31-32页
            2.2.6 MoNLE1超表达载体的构建与稻瘟菌打孔接种试验第32-33页
            2.2.7 MoNLE1超表达植株中PTI相关基因的表达检测第33-34页
            2.2.8 MoNLE1超表达植株ROS检测第34-35页
            2.2.9 MoNLE1在水稻中互作蛋白的筛选第35-36页
            2.2.10 GST、MBP重组蛋白在原核细菌表达和纯化第36-38页
    第三章 结果与分析第38-49页
        3.1 MoNLE1信号肽分泌功能的验证第38-40页
        3.2 MoNLE1核定位信号突变的亚细胞定位分析第40-42页
        3.3 MoNLE1转化水稻以及稻瘟菌接种表型分析第42-44页
        3.4 MoNLE1能抑制PTI反应第44-46页
        3.5 MoNLE1在水稻中互作蛋白的筛选及验证第46-49页
    第四章 总结与讨论第49-51页
        4.1 总结第49-50页
        4.2 展望第50-51页
第二部分 水稻泛素化蛋白质组学研究第51-78页
    第一章 绪论第51-62页
        1.1 植物泛素化系统第51-57页
            1.1.1 泛素化蛋白酶体系统第53-55页
            1.1.2 蛋白泛素化在植物中的作用第55-57页
        1.2 蛋白质组学研究方法第57-59页
            1.2.1 基于双向凝胶电泳的蛋白质组学研究第57-58页
            1.2.2 基于质谱的蛋白质组学研究第58页
            1.2.3 蛋白质组学中的生物信息学分析第58-59页
        1.3 植物泛素化蛋白质组学研究进展第59-61页
        1.4 研究目的、意义与技术路线第61-62页
    第二章 材料与方法第62-66页
        2.1 试验材料、试剂、仪器与缓冲液第62-63页
            2.1.1 植物材料第62页
            2.1.2 试剂与仪器第62页
            2.1.3 本试验用到的主要缓冲液第62-63页
        2.2 试验方法第63-66页
            2.2.1 水稻总蛋白的提取消化与纯化第63页
            2.2.2 K-GG抗体与beads的偶联第63-64页
            2.2.3 IAP(抗体与肽段的结合)第64页
            2.2.4 泛素化修饰肽段的浓缩与纯化第64-65页
            2.2.5 LC-MS/MS质谱鉴定第65页
            2.2.6 生物信息学分析第65-66页
    第三章 结果与分析第66-76页
        3.1 水稻泛素化修饰蛋白质组的鉴定第66页
        3.2 水稻泛素化修饰蛋白组的GO分析第66-67页
        3.3 MOTIF分析第67-69页
        3.4 泛素化修饰蛋白的互作网络第69-71页
        3.5 代谢通路富集分析第71-76页
    第四章 总结与讨论第76-78页
        4.1 总结第76-77页
        4.2 展望第77-78页
参考文献第78-96页
致谢第96-97页
作者简介第97页

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