摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一部分 稻瘟菌效应蛋白MONLE1的功能分析 | 第9-51页 |
第一章 绪论 | 第9-22页 |
1.1 稻瘟菌及其致病机理 | 第9-11页 |
1.1.1 稻瘟菌及生活史 | 第9-10页 |
1.1.2 稻瘟菌致病机理 | 第10-11页 |
1.2 植物病原菌效应蛋白研究进展 | 第11-20页 |
1.2.1 植物病原细菌效应蛋白 | 第12-13页 |
1.2.2 植物病原卵菌效应蛋白 | 第13-14页 |
1.2.3 植物病原真菌效应蛋白 | 第14-20页 |
1.3 研究目的、意义与技术路线 | 第20-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-38页 |
2.1 试验材料、试剂与仪器 | 第22-27页 |
2.1.1 植物材料与菌株 | 第22页 |
2.1.2 载体材料 | 第22页 |
2.1.3 试剂、仪器与培养基 | 第22-27页 |
2.2 试验方法 | 第27-38页 |
2.2.1 MoNLE1信号肽分泌试验 | 第27-28页 |
2.2.2 酵母YTK12感受态的制备及转化 | 第28页 |
2.2.3 农杆菌介导的烟草细胞瞬时表达 | 第28-29页 |
2.2.4 水稻原生质体的制备及转化 | 第29-31页 |
2.2.5 MoNLE1转基因植株的Western blot鉴定 | 第31-32页 |
2.2.6 MoNLE1超表达载体的构建与稻瘟菌打孔接种试验 | 第32-33页 |
2.2.7 MoNLE1超表达植株中PTI相关基因的表达检测 | 第33-34页 |
2.2.8 MoNLE1超表达植株ROS检测 | 第34-35页 |
2.2.9 MoNLE1在水稻中互作蛋白的筛选 | 第35-36页 |
2.2.10 GST、MBP重组蛋白在原核细菌表达和纯化 | 第36-38页 |
第三章 结果与分析 | 第38-49页 |
3.1 MoNLE1信号肽分泌功能的验证 | 第38-40页 |
3.2 MoNLE1核定位信号突变的亚细胞定位分析 | 第40-42页 |
3.3 MoNLE1转化水稻以及稻瘟菌接种表型分析 | 第42-44页 |
3.4 MoNLE1能抑制PTI反应 | 第44-46页 |
3.5 MoNLE1在水稻中互作蛋白的筛选及验证 | 第46-49页 |
第四章 总结与讨论 | 第49-51页 |
4.1 总结 | 第49-50页 |
4.2 展望 | 第50-51页 |
第二部分 水稻泛素化蛋白质组学研究 | 第51-78页 |
第一章 绪论 | 第51-62页 |
1.1 植物泛素化系统 | 第51-57页 |
1.1.1 泛素化蛋白酶体系统 | 第53-55页 |
1.1.2 蛋白泛素化在植物中的作用 | 第55-57页 |
1.2 蛋白质组学研究方法 | 第57-59页 |
1.2.1 基于双向凝胶电泳的蛋白质组学研究 | 第57-58页 |
1.2.2 基于质谱的蛋白质组学研究 | 第58页 |
1.2.3 蛋白质组学中的生物信息学分析 | 第58-59页 |
1.3 植物泛素化蛋白质组学研究进展 | 第59-61页 |
1.4 研究目的、意义与技术路线 | 第61-62页 |
第二章 材料与方法 | 第62-66页 |
2.1 试验材料、试剂、仪器与缓冲液 | 第62-63页 |
2.1.1 植物材料 | 第62页 |
2.1.2 试剂与仪器 | 第62页 |
2.1.3 本试验用到的主要缓冲液 | 第62-63页 |
2.2 试验方法 | 第63-66页 |
2.2.1 水稻总蛋白的提取消化与纯化 | 第63页 |
2.2.2 K-GG抗体与beads的偶联 | 第63-64页 |
2.2.3 IAP(抗体与肽段的结合) | 第64页 |
2.2.4 泛素化修饰肽段的浓缩与纯化 | 第64-65页 |
2.2.5 LC-MS/MS质谱鉴定 | 第65页 |
2.2.6 生物信息学分析 | 第65-66页 |
第三章 结果与分析 | 第66-76页 |
3.1 水稻泛素化修饰蛋白质组的鉴定 | 第66页 |
3.2 水稻泛素化修饰蛋白组的GO分析 | 第66-67页 |
3.3 MOTIF分析 | 第67-69页 |
3.4 泛素化修饰蛋白的互作网络 | 第69-71页 |
3.5 代谢通路富集分析 | 第71-76页 |
第四章 总结与讨论 | 第76-78页 |
4.1 总结 | 第76-77页 |
4.2 展望 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
作者简介 | 第97页 |