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野猪源PRRSV Shaanxi-2株分离鉴定、全基因测序及遗传进化分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
文献综述第13-26页
 第一章 猪繁殖与呼吸综合征及其病原的研究进展第13-26页
   ·PRRS 概述第13-16页
     ·PRRS 的历史第13-14页
     ·PRRS 的临床症状第14-15页
     ·PRRS 的诊断研究第15-16页
   ·PRRSV 病原学研究第16-20页
     ·PRRSV 的分类地位及类型第16-17页
     ·PRRSV 形态特征及基本特性第17页
     ·PRRSV 起源的推测第17-18页
     ·PRRSV 的分离培养第18页
     ·PRRSV 的致病机理第18-19页
     ·PRRSV 的流行病学研究第19-20页
   ·PRRSV 的分子生物学研究第20-26页
     ·PRRSV 的基因组结构第20-21页
     ·PRRSV 的分子遗传变异第21-26页
试验研究第26-54页
 第二章 野猪源PRRSV SHAANXI-2 株的分离与鉴定第26-36页
   ·试验材料第26-29页
     ·试验病料第26页
     ·细胞、单抗及高免血清第26页
     ·主要试剂第26-27页
     ·主要试验仪器第27页
     ·试验相关试剂的配制第27-29页
     ·引物设计第29页
   ·试验方法第29-32页
     ·病料的采集及处理第29页
     ·病毒RNA 的提取第29页
     ·RNA 的反转录第29-30页
     ·病毒DNA 的提取第30页
     ·PCR 反应第30页
     ·细胞的复苏与培养第30-31页
     ·病毒分离培养第31页
     ·病毒中和试验第31页
     ·间接免疫荧光检测第31页
     ·TCID_(50) 测定第31-32页
   ·结果第32-34页
     ·病料RT-PCR 检测结果第32页
     ·病毒分离结果第32-33页
     ·血清中和试验结果第33页
     ·RT-PCR 鉴定病毒增殖结果第33页
     ·间接免疫荧光检测结果第33页
     ·TCID_(50) 测定结果第33-34页
   ·讨论第34-35页
   ·小结第35-36页
 第三章 野猪源PRRSV SHAANXI-2 株全基因序列测定第36-46页
   ·试验材料第36-38页
     ·毒株、细胞及菌种第36页
     ·主要试剂第36-37页
     ·主要仪器第37页
     ·试验相关试剂的配制第37-38页
     ·引物设计第38页
     ·生物学软件第38页
   ·试验方法第38-43页
     ·病毒的增殖第38页
     ·病毒RNA 的提取及反转录第38页
     ·全基因扩增第38-39页
     ·PCR 产物的胶回收第39-40页
     ·胶回收产物与pMD-18T Vector 连接第40-41页
     ·感受态细胞的制备(CaC12 法)第41页
     ·连接产物的转化第41-42页
     ·菌液PCR 鉴定第42页
     ·重组质粒的提取第42页
     ·重组质粒酶切鉴定第42-43页
     ·阳性菌液的保存与送测第43页
     ·全基因序列拼接第43页
   ·试验结果第43-44页
     ·全基因各片段PCR 扩增结果第43-44页
     ·全基因序列拼接结果第44页
   ·讨论第44-45页
   ·小结第45-46页
 第四章 野猪源PRRSV SHAANXI-2 基因组分子遗传特征分析第46-54页
   ·材料第46页
     ·PRRSV 核苷酸序列第46页
     ·分子生物学分析软件第46页
   ·方法第46-47页
     ·序列比对分析第46页
     ·系统进化分析第46页
     ·毒力相关氨基酸的比对分析第46-47页
   ·结果第47-52页
     ·序列比对分析结果第47-51页
     ·全基因的系统进化分析第51-52页
   ·讨论第52-53页
   ·小结第53-54页
结论第54-55页
参考文献第55-63页
英文缩略词及中英文对照第63-65页
致谢第65-66页
作者简介第66页

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