| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 1 文献综述 | 第8-13页 |
| 1.1 CIB蛋白的研究概述 | 第8-12页 |
| 1.1.1 CIB蛋白的发现与分类 | 第8页 |
| 1.1.2 CIB蛋白的结构 | 第8-11页 |
| 1.1.3 CIB蛋白的生物学功能研究 | 第11-12页 |
| 1.2 CIB蛋白的研究展望 | 第12-13页 |
| 2 引言 | 第13-15页 |
| 2.1 研究的目的和意义 | 第13页 |
| 2.2 研究内容 | 第13-14页 |
| 2.2.1 柳蚕CIB基因序列的测定 | 第13页 |
| 2.2.2 柳蚕CIB基因的原核表达、蛋白纯化 | 第13页 |
| 2.2.3 柳蚕CIB基因的表达模式分析 | 第13-14页 |
| 2.3 技术路线 | 第14-15页 |
| 3 材料与方法 | 第15-28页 |
| 3.1 实验材料 | 第15页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第15-18页 |
| 3.2.1 实验过程中主要用到的仪器 | 第15页 |
| 3.2.2 实验主要试剂 | 第15-16页 |
| 3.2.3 常用溶液的配置 | 第16-18页 |
| 3.3 试验方法 | 第18-28页 |
| 3.3.1 柳蚕的饲养 | 第18-19页 |
| 3.3.2 柳蚕的解剖及组织的收集 | 第19页 |
| 3.3.3 柳蚕总RNA的提取 | 第19页 |
| 3.3.4 提取的总RNA的质量检测 | 第19页 |
| 3.3.5 第一链cDNA的合成 | 第19-20页 |
| 3.3.6 柳蚕CIB基因的PCR扩增 | 第20-21页 |
| 3.3.7 PCR扩增后目的产物的纯化 | 第21页 |
| 3.3.8 目的片段的连接和转化 | 第21页 |
| 3.3.9 柳蚕CIB基因序列的拼接与分析 | 第21页 |
| 3.3.10 柳蚕CIB全长ORF的原核表达 | 第21-23页 |
| 3.3.11 Western blotting分析 | 第23-24页 |
| 3.3.12 重组蛋白的大量诱导及纯化 | 第24页 |
| 3.3.13 多克隆抗体制备 | 第24-26页 |
| 3.3.14 柳蚕CIB基因在各组织中的表达分析 | 第26-27页 |
| 3.3.15 柳蚕CIB基因的RNAi以及相关基因的表达分析 | 第27-28页 |
| 4 实验结果 | 第28-40页 |
| 4.1 柳蚕的饲育和观察结果 | 第28页 |
| 4.2 柳蚕总RNA的检测 | 第28-29页 |
| 4.3 柳蚕CIB基因序列的测定与分析 | 第29-30页 |
| 4.4 柳蚕CIB与其他物种CIB的同源性分析 | 第30-31页 |
| 4.5 柳蚕CIB蛋白生物信息学分析 | 第31-32页 |
| 4.5.1 亲疏水性预测 | 第31-32页 |
| 4.5.2 柳蚕CIB蛋白结构域预测 | 第32页 |
| 4.6 柳蚕CIB原核表达载体的构建 | 第32-34页 |
| 4.6.1 柳蚕CIB基因全长ORF的扩增 | 第32-33页 |
| 4.6.2 双酶切鉴定 | 第33-34页 |
| 4.7 重组蛋白的原核表达及纯化 | 第34-36页 |
| 4.7.1 不同浓度的IPTG诱导下的原核表达 | 第34-35页 |
| 4.7.2 Western blotting检测 | 第35-36页 |
| 4.7.3 重组蛋白的纯化 | 第36页 |
| 4.8 柳蚕CIB表达模式分析 | 第36-40页 |
| 4.8.1 柳蚕CIB在各组织中表达情况 | 第36-37页 |
| 4.8.2 RNA干扰对柳蚕CIB相关基因的的影响 | 第37-40页 |
| 5 讨论 | 第40-41页 |
| 5.1 柳蚕CIB序列的分析 | 第40页 |
| 5.2 柳蚕CIB基因的原核表达及纯化 | 第40页 |
| 5.3 柳蚕CIB的组织分布讨论以及RNAi实验 | 第40-41页 |
| 6 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 个人简介 | 第47页 |
| 在研期间发表的论文 | 第47页 |
