摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
英文缩略表 | 第8-12页 |
1 引言 | 第12-20页 |
1.1 抗虫害转基因花生研究进展 | 第12-13页 |
1.1.1 地下害虫的危害与防治 | 第12页 |
1.1.2 抗虫害转基因花生的研究 | 第12-13页 |
1.2 高等植物启动子的研究 | 第13-17页 |
1.2.1 高等植物启动子的结构 | 第13-14页 |
1.2.2 高等植物启动子的分类 | 第14-15页 |
1.2.3 组织特异性启动子的研究进展 | 第15-16页 |
1.2.4 根特异性启动子的研究进展 | 第16-17页 |
1.3 启动子元件的研究 | 第17-18页 |
1.3.1 缺失分析 | 第17页 |
1.3.2 突变 | 第17页 |
1.3.3 调控元件与结合蛋白的互作分析 | 第17-18页 |
1.4 人工合成启动子的研究与应用 | 第18页 |
1.5 本研究的意义及主要内容 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-34页 |
2.1 实验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第20页 |
2.1.3 数据库与生物软件 | 第20-21页 |
2.1.4 试剂 | 第21页 |
2.1.5 培养基、抗生素与激素 | 第21-22页 |
2.2 研究方法 | 第22-34页 |
2.2.1 植物材料的准备 | 第22-23页 |
2.2.2 根特异表达候选EST的筛选 | 第23页 |
2.2.3 花生根、茎、叶RNA的提取和纯化 | 第23-24页 |
2.2.4 real-time PCR分析AhMtan、AhGAox、AhNDrp三个基因的表达特性 | 第24-25页 |
2.2.5 CTAB法提取花生基因组 | 第25-26页 |
2.2.6 根特异启动子的克隆 | 第26-27页 |
2.2.7 AhMtan基因全长的克隆 | 第27-28页 |
2.2.8 AhNDrp基因全长的克隆 | 第28-29页 |
2.2.9 AhMtan、AhGAox、AhNDrp三个基因上游启动子的生物信息学分析 | 第29页 |
2.2.10 根特异启动子植物表达载体的构建 | 第29-31页 |
2.2.11 植物表达载体转化农杆菌 | 第31页 |
2.2.12 烟草的遗传转化 | 第31-32页 |
2.2.13 GUS组织化学染色及显微观察 | 第32-34页 |
3 结果与分析 | 第34-56页 |
3.1 根特异候选contig的表达特性分析 | 第34-35页 |
3.2 根特异启动子的克隆 | 第35-36页 |
3.3 AhMtan根特异表达基因及启动子的生物信息学分析 | 第36-39页 |
3.3.1 AhMtan基因结构分析 | 第36-38页 |
3.3.2 AhMtan启动子的生物信息学分析 | 第38-39页 |
3.4 AhMtan根特异启动子植物表达载体的构建及转化农杆菌 | 第39-40页 |
3.5 AhMtan携带根特异启动子的农杆菌对烟草的遗传转化 | 第40-42页 |
3.6 AhGAox根特异表达基因及启动子的生物信息学分析 | 第42-43页 |
3.7 AhGAox根特异启动子植物表达载体的构建及转化农杆菌 | 第43-45页 |
3.8 AhGAox根部特异表达启动子在烟草中的功能验证 | 第45页 |
3.9 AhNDrp根特异表达基因及启动子的生物信息学分析 | 第45-47页 |
3.9.1 AhNDrp基因结构分析 | 第45-46页 |
3.9.2 AhNDrp启动子的生物信息学分析 | 第46-47页 |
3.10 AhNDrp根特异启动子植物表达载体的构建及转化农杆菌 | 第47-48页 |
3.11 AhNDrp根特异启动子对烟草的遗传转化 | 第48-49页 |
3.12 AhNDrp蛋白的生物信息学分析 | 第49-50页 |
3.12.1 AhNDrp蛋白的保守结构域分析及三维结构预测 | 第49-50页 |
3.12.2 AhNDrp蛋白同源性分析 | 第50页 |
3.13 AhNDrp基因在干旱和黄曲霉处理下的表达特性分析 | 第50-51页 |
3.14 AhNramp1根特异的启动子对烟草的遗传转化 | 第51-53页 |
3.14.1 载体构建 | 第51-52页 |
3.14.2 AhNramp1根特异启动子对烟草的遗传转化 | 第52-53页 |
3.15 SRSP根特异人工合成的启动子的功能分析 | 第53-56页 |
3.15.1 SRSP载体构建 | 第53-54页 |
3.15.2 SRSP人工合成启动子对烟草的遗传转化 | 第54-56页 |
4 讨论 | 第56-60页 |
4.1 通过酶切基因组克隆获得启动子 | 第56页 |
4.2 根特异启动子及下一步工作展望 | 第56-58页 |
4.3 花生NBS-LRR类基因的克隆及表达特性分析 | 第58-60页 |
全文结论 | 第60-62页 |
致谢 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
附录:攻读硕士期间发表的论文 | 第72页 |