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花生根特异启动子的克隆及功能分析

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
英文缩略表第8-12页
1 引言第12-20页
    1.1 抗虫害转基因花生研究进展第12-13页
        1.1.1 地下害虫的危害与防治第12页
        1.1.2 抗虫害转基因花生的研究第12-13页
    1.2 高等植物启动子的研究第13-17页
        1.2.1 高等植物启动子的结构第13-14页
        1.2.2 高等植物启动子的分类第14-15页
        1.2.3 组织特异性启动子的研究进展第15-16页
        1.2.4 根特异性启动子的研究进展第16-17页
    1.3 启动子元件的研究第17-18页
        1.3.1 缺失分析第17页
        1.3.2 突变第17页
        1.3.3 调控元件与结合蛋白的互作分析第17-18页
    1.4 人工合成启动子的研究与应用第18页
    1.5 本研究的意义及主要内容第18-20页
2 材料与方法第20-34页
    2.1 实验材料第20-22页
        2.1.1 植物材料第20页
        2.1.2 菌株与质粒第20页
        2.1.3 数据库与生物软件第20-21页
        2.1.4 试剂第21页
        2.1.5 培养基、抗生素与激素第21-22页
    2.2 研究方法第22-34页
        2.2.1 植物材料的准备第22-23页
        2.2.2 根特异表达候选EST的筛选第23页
        2.2.3 花生根、茎、叶RNA的提取和纯化第23-24页
        2.2.4 real-time PCR分析AhMtan、AhGAox、AhNDrp三个基因的表达特性第24-25页
        2.2.5 CTAB法提取花生基因组第25-26页
        2.2.6 根特异启动子的克隆第26-27页
        2.2.7 AhMtan基因全长的克隆第27-28页
        2.2.8 AhNDrp基因全长的克隆第28-29页
        2.2.9 AhMtan、AhGAox、AhNDrp三个基因上游启动子的生物信息学分析第29页
        2.2.10 根特异启动子植物表达载体的构建第29-31页
        2.2.11 植物表达载体转化农杆菌第31页
        2.2.12 烟草的遗传转化第31-32页
        2.2.13 GUS组织化学染色及显微观察第32-34页
3 结果与分析第34-56页
    3.1 根特异候选contig的表达特性分析第34-35页
    3.2 根特异启动子的克隆第35-36页
    3.3 AhMtan根特异表达基因及启动子的生物信息学分析第36-39页
        3.3.1 AhMtan基因结构分析第36-38页
        3.3.2 AhMtan启动子的生物信息学分析第38-39页
    3.4 AhMtan根特异启动子植物表达载体的构建及转化农杆菌第39-40页
    3.5 AhMtan携带根特异启动子的农杆菌对烟草的遗传转化第40-42页
    3.6 AhGAox根特异表达基因及启动子的生物信息学分析第42-43页
    3.7 AhGAox根特异启动子植物表达载体的构建及转化农杆菌第43-45页
    3.8 AhGAox根部特异表达启动子在烟草中的功能验证第45页
    3.9 AhNDrp根特异表达基因及启动子的生物信息学分析第45-47页
        3.9.1 AhNDrp基因结构分析第45-46页
        3.9.2 AhNDrp启动子的生物信息学分析第46-47页
    3.10 AhNDrp根特异启动子植物表达载体的构建及转化农杆菌第47-48页
    3.11 AhNDrp根特异启动子对烟草的遗传转化第48-49页
    3.12 AhNDrp蛋白的生物信息学分析第49-50页
        3.12.1 AhNDrp蛋白的保守结构域分析及三维结构预测第49-50页
        3.12.2 AhNDrp蛋白同源性分析第50页
    3.13 AhNDrp基因在干旱和黄曲霉处理下的表达特性分析第50-51页
    3.14 AhNramp1根特异的启动子对烟草的遗传转化第51-53页
        3.14.1 载体构建第51-52页
        3.14.2 AhNramp1根特异启动子对烟草的遗传转化第52-53页
    3.15 SRSP根特异人工合成的启动子的功能分析第53-56页
        3.15.1 SRSP载体构建第53-54页
        3.15.2 SRSP人工合成启动子对烟草的遗传转化第54-56页
4 讨论第56-60页
    4.1 通过酶切基因组克隆获得启动子第56页
    4.2 根特异启动子及下一步工作展望第56-58页
    4.3 花生NBS-LRR类基因的克隆及表达特性分析第58-60页
全文结论第60-62页
致谢第62-64页
参考文献第64-72页
附录:攻读硕士期间发表的论文第72页

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