摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩写与全称 | 第8-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
1.1 研究背景 | 第12-23页 |
1.1.1 拟南芥简介 | 第12页 |
1.1.2 绿色荧光蛋白的概述 | 第12-13页 |
1.1.3 微管骨架及微管成核相关的微管结合蛋白简述 | 第13-15页 |
1.1.4 微管结合蛋白GCP4定位及功能综述 | 第15-22页 |
1.1.5 UV-B对植物微管及微管结合蛋白的影响 | 第22-23页 |
1.2 本研究的目的与意义 | 第23页 |
1.3 研究内容 | 第23-24页 |
2 UV-B辐射下拟南芥TUB-GFP与MBD-GFP中微管动态变化的比较 | 第24-30页 |
2.1 材料 | 第24页 |
2.1.1 实验材料 | 第24页 |
2.1.2 实验主要试剂 | 第24页 |
2.1.3 实验主要仪器与设备 | 第24页 |
2.1.4 常用溶液配制 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-25页 |
2.2.1 拟南芥的种植 | 第24页 |
2.2.2 UV-B辐射处理 | 第24-25页 |
2.2.3 拟南芥植株株高和根长的测定 | 第25页 |
2.2.4 图像观察及数据处理 | 第25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-29页 |
2.3.1 在UV-B辐射下,TUB-GFP拟南芥幼苗与MBD-GFP拟南芥幼苗形态上的结果对比 | 第25-26页 |
2.3.2 在UV-B辐射下,TUB-GFP拟南芥幼苗与MBD-GFP拟南芥幼苗的株高与根长的结果对比 | 第26-28页 |
2.3.3 体内观察UV-B辐射后TUB-GFP拟南芥幼苗和MBD-GFP拟南芥幼苗微管的变化 | 第28-29页 |
2.4 讨论 | 第29-30页 |
3 pSuper1300-GCP4-GFP表达载体的构建 | 第30-54页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第30-31页 |
3.1.1 实验材料 | 第30页 |
3.1.2 实验主要试剂 | 第30页 |
3.1.3 实验主要仪器与设备 | 第30页 |
3.1.4 常用溶液配置 | 第30-31页 |
3.2 实验方法 | 第31-41页 |
3.2.1 设计拟南芥叶片中GCP4基因的引物 | 第31页 |
3.2.2 拟南芥的种植 | 第31页 |
3.2.3 拟南芥叶片总RNA的提取及检测 | 第31-33页 |
3.2.4 目的基因GCP4的扩增 | 第33-35页 |
3.2.5 克隆载体pUC19-GCP4的构建 | 第35-38页 |
3.2.6 表达载体pSuper1300-GCP4-GFP的构建 | 第38-40页 |
3.2.7 重组质粒转化农杆菌GV3101 | 第40页 |
3.2.8 浸花法转化拟南芥植株 | 第40-41页 |
3.2.9 筛选阳性转基因植株 | 第41页 |
3.2.10 重组质粒pSuper1300-GCP4-GFP的亚细胞定位 | 第41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-51页 |
3.3.1 拟南芥叶片中总RNA完整性检验 | 第43页 |
3.3.2 拟南芥叶片总RNA纯度的检验 | 第43页 |
3.3.3 AtGCP4基因RT-PCR扩增产物结果 | 第43-44页 |
3.3.4 pUC19-GCP4重组质粒验证 | 第44-45页 |
3.3.5 pUC19-GCP4质粒测序结果比对 | 第45-47页 |
3.3.6 pSuper1300-GCP4-GFP重组质粒验证 | 第47-48页 |
3.3.7 重组质粒转化农杆菌的验证 | 第48-49页 |
3.3.8 筛选阳性转基因植株 | 第49-50页 |
3.3.9 重组质粒pSuper1300-GCP4-GFP的亚细胞定位 | 第50-51页 |
3.4 讨论 | 第51-54页 |
3.4.1 筛选阳性转基因植株结果分析 | 第51页 |
3.4.2 重组质粒pSuper1300-GCP4-GFP的亚细胞定位结果分析 | 第51页 |
3.4.3 GCP4与“分束分裂”现象可能存在的关系 | 第51-54页 |
4 结论 | 第54-56页 |
致谢 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
附录:攻读硕士学位期间发表的论文 | 第66页 |