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拟南芥GCP4-GFP载体构建及UV-B辐射对微管动态的影响

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
缩写与全称第8-12页
1 前言第12-24页
    1.1 研究背景第12-23页
        1.1.1 拟南芥简介第12页
        1.1.2 绿色荧光蛋白的概述第12-13页
        1.1.3 微管骨架及微管成核相关的微管结合蛋白简述第13-15页
        1.1.4 微管结合蛋白GCP4定位及功能综述第15-22页
        1.1.5 UV-B对植物微管及微管结合蛋白的影响第22-23页
    1.2 本研究的目的与意义第23页
    1.3 研究内容第23-24页
2 UV-B辐射下拟南芥TUB-GFP与MBD-GFP中微管动态变化的比较第24-30页
    2.1 材料第24页
        2.1.1 实验材料第24页
        2.1.2 实验主要试剂第24页
        2.1.3 实验主要仪器与设备第24页
        2.1.4 常用溶液配制第24页
    2.2 实验方法第24-25页
        2.2.1 拟南芥的种植第24页
        2.2.2 UV-B辐射处理第24-25页
        2.2.3 拟南芥植株株高和根长的测定第25页
        2.2.4 图像观察及数据处理第25页
    2.3 结果与分析第25-29页
        2.3.1 在UV-B辐射下,TUB-GFP拟南芥幼苗与MBD-GFP拟南芥幼苗形态上的结果对比第25-26页
        2.3.2 在UV-B辐射下,TUB-GFP拟南芥幼苗与MBD-GFP拟南芥幼苗的株高与根长的结果对比第26-28页
        2.3.3 体内观察UV-B辐射后TUB-GFP拟南芥幼苗和MBD-GFP拟南芥幼苗微管的变化第28-29页
    2.4 讨论第29-30页
3 pSuper1300-GCP4-GFP表达载体的构建第30-54页
    3.1 实验材料与试剂第30-31页
        3.1.1 实验材料第30页
        3.1.2 实验主要试剂第30页
        3.1.3 实验主要仪器与设备第30页
        3.1.4 常用溶液配置第30-31页
    3.2 实验方法第31-41页
        3.2.1 设计拟南芥叶片中GCP4基因的引物第31页
        3.2.2 拟南芥的种植第31页
        3.2.3 拟南芥叶片总RNA的提取及检测第31-33页
        3.2.4 目的基因GCP4的扩增第33-35页
        3.2.5 克隆载体pUC19-GCP4的构建第35-38页
        3.2.6 表达载体pSuper1300-GCP4-GFP的构建第38-40页
        3.2.7 重组质粒转化农杆菌GV3101第40页
        3.2.8 浸花法转化拟南芥植株第40-41页
        3.2.9 筛选阳性转基因植株第41页
        3.2.10 重组质粒pSuper1300-GCP4-GFP的亚细胞定位第41页
    3.3 结果与分析第41-51页
        3.3.1 拟南芥叶片中总RNA完整性检验第43页
        3.3.2 拟南芥叶片总RNA纯度的检验第43页
        3.3.3 AtGCP4基因RT-PCR扩增产物结果第43-44页
        3.3.4 pUC19-GCP4重组质粒验证第44-45页
        3.3.5 pUC19-GCP4质粒测序结果比对第45-47页
        3.3.6 pSuper1300-GCP4-GFP重组质粒验证第47-48页
        3.3.7 重组质粒转化农杆菌的验证第48-49页
        3.3.8 筛选阳性转基因植株第49-50页
        3.3.9 重组质粒pSuper1300-GCP4-GFP的亚细胞定位第50-51页
    3.4 讨论第51-54页
        3.4.1 筛选阳性转基因植株结果分析第51页
        3.4.2 重组质粒pSuper1300-GCP4-GFP的亚细胞定位结果分析第51页
        3.4.3 GCP4与“分束分裂”现象可能存在的关系第51-54页
4 结论第54-56页
致谢第56-58页
参考文献第58-66页
附录:攻读硕士学位期间发表的论文第66页

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