| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略语表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-30页 |
| 1.1 研究现状 | 第15-29页 |
| 1.1.1 生长素的发现 | 第15-16页 |
| 1.1.2 生长素的合成，储存及分解 | 第16-19页 |
| 1.1.3 生长素极性运输及细胞内运输 | 第19-26页 |
| 1.1.3.1 生长素的极性运输过程 | 第19-24页 |
| 1.1.3.2 细胞内的生长素运输过程 | 第24-26页 |
| 1.1.4 生长素的生理效用 | 第26-29页 |
| 1.1.4.1 生长素在植物细胞伸长及细胞壁结构改变过程中的作用 | 第26-27页 |
| 1.1.4.2 生长素在侧部器官产生中的作用 | 第27-28页 |
| 1.1.4.3 生长素在植物衰老过程中的作用 | 第28-29页 |
| 1.2 研究目的与意义 | 第29-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-49页 |
| 2.1 材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 2.1.2 载体与菌株 | 第30-31页 |
| 2.2 方法 | 第31-49页 |
| 2.2.1 主要实验试剂及培养基 | 第31-33页 |
| 2.2.2 实验引物 | 第33-35页 |
| 2.2.3 OsCOLE1与OsCLIP的生物信息学分析 | 第35页 |
| 2.2.4 实验载体的构建 | 第35-38页 |
| 2.2.5 转基因水稻的构建及初步鉴定 | 第38-40页 |
| 2.2.5.1 农杆菌转化子的获得 | 第38页 |
| 2.2.5.2 农杆菌转化子转化水稻愈伤组织及转化苗的获得 | 第38-39页 |
| 2.2.5.3 转基因水稻的初步鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2.6 转基因水稻的田间种植与管理 | 第40页 |
| 2.2.7 转基因水稻目的基因表达水平检测 | 第40-41页 |
| 2.2.7.1 RNA提取 | 第40页 |
| 2.2.7.2 去除提取RNA中的基因组DN A | 第40页 |
| 2.2.7.3 RNA反转录生成c DNA第一链 | 第40-41页 |
| 2.2.7.4 Real-time PCR检测目的基因的表达水平 | 第41页 |
| 2.2.8 转基因水稻苗期萘乙酸处理 | 第41页 |
| 2.2.9 转基因水稻灌浆期IAA含量测定 | 第41页 |
| 2.2.10 转基因水稻田间性状考察 | 第41-42页 |
| 2.2.11 转基因水稻组织切片 | 第42页 |
| 2.2.11.1 扫描电镜法观察转基因水稻节间细胞大小 | 第42页 |
| 2.2.11.2 转基因水稻节间组织切片及木质素染色 | 第42页 |
| 2.2.12 OsCOLE1与OsCLIP的亚细胞定位 | 第42-43页 |
| 2.2.13 OsCOLE1组织表达特异性检测 | 第43页 |
| 2.2.14 酵母双杂交文库筛选 | 第43-44页 |
| 2.2.14.1 酵母感受态制备 | 第43-44页 |
| 2.2.14.2 载体转化酵母及缺陷筛选 | 第44页 |
| 2.2.15 分裂泛素酵母双杂交 | 第44-45页 |
| 2.2.15.1 酵母感受态制备 | 第44页 |
| 2.2.15.2 载体转化酵母及缺陷筛选 | 第44-45页 |
| 2.2.15.3 分裂泛素酵母双杂交阳性菌落PCR鉴定 | 第45页 |
| 2.2.16 双分子荧光互补 | 第45页 |
| 2.2.17 酵母转化子3H-IAA运输实验 | 第45-47页 |
| 2.2.17.1 酵母转化子内水稻基因表达水平测定 | 第45-46页 |
| 2.2.17.2 酵母转化子的生长速率测定 | 第46页 |
| 2.2.17.3 酵母转化子的培养及3H-IAA运输实验 | 第46-47页 |
| 2.2.17.4 酵母转化子吸收3H-IAA的放射性强度测定 | 第47页 |
| 2.2.18 OsCOLE1转基因水稻中相关基因表达水平的检测 | 第47-48页 |
| 2.2.19 A4发根农杆菌介导OsCOLE1转化烟草 | 第48-49页 |
| 2.2.19.1 A4农杆菌感受态的制备及热激法质粒转化 | 第48页 |
| 2.2.19.2 农杆菌转化子转化烟草叶片及转化苗的获得 | 第48-49页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第49-90页 |
| 3.1 结果 | 第49-83页 |
| 3.1.1 OsCOLE1的RN Ai突变体的发现及OsCOLE1的生物信息学分析 | 第49-55页 |
| 3.1.2 OsCOLE1转基因材料的鉴定 | 第55-61页 |
| 3.1.3 CRISPR/cas9介导的OsCOLE1定点敲除突变体分析 | 第61-63页 |
| 3.1.4 OsCOLE1转基因植株苗期使用萘乙酸处理 | 第63-65页 |
| 3.1.5 转入OsCOLE1烟草的表型鉴定 | 第65页 |
| 3.1.6 OsCOLE1的亚细胞定位 | 第65-67页 |
| 3.1.7 OsCOLE1的组织表达特异性分析 | 第67-68页 |
| 3.1.8 OsCOLE1对水稻cDN A酵母双杂交文库的筛选 | 第68-69页 |
| 3.1.9 OsCLIP的生物信息学分析 | 第69-71页 |
| 3.1.10 OsCLIP的亚细胞定位 | 第71-72页 |
| 3.1.11 OsCOLE1与OsCLIP在两蛋白质的N末端存在相互作用 | 第72-77页 |
| 3.1.12 OsCOLE1与OsCLIP的体外3H-IAA运输实验 | 第77-79页 |
| 3.1.13 OsCOLE1转基因植株表型相关基因的表达水平分析 | 第79-82页 |
| 3.1.14 OsCOLE1与OsCLIP调控细胞内IAA运输过程的推测模型 | 第82-83页 |
| 3.2 讨论 | 第83-90页 |
| 3.2.1 细胞内生长素运输的机理及功能 | 第83-84页 |
| 3.2.2 OsCOLE1及其同源蛋白质的结构特点 | 第84-85页 |
| 3.2.3 OsCOLE1发挥生理功能的特异性 | 第85-86页 |
| 3.2.4 OsCLIP的结构特点 | 第86页 |
| 3.2.5 OsCOLE1与OsCLIP的相互作用模式 | 第86-87页 |
| 3.2.6 OsCOLE1功能与转基因材料突变表型的关系 | 第87-88页 |
| 3.2.7 OsCOLE1与OsCLIP介导的细胞内生长素运输过程的生理学意义 | 第88-90页 |
| 第四章 全文结论 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-105页 |
| 附录 | 第105-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 作者简介 | 第109页 |
