| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 中英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-14页 |
| 第2章 材料与方法 | 第14-27页 |
| 2.1 材料 | 第14-17页 |
| 2.1.1 细胞 | 第14页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第14-16页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第16-17页 |
| 2.1.4 相关液体配制 | 第17页 |
| 2.1.5 慢病毒 | 第17页 |
| 2.2 方法 | 第17-26页 |
| 2.2.1 饲养层细胞培养处理 | 第17-18页 |
| 2.2.2 mESC-D3细胞培养 | 第18页 |
| 2.2.3 mESC-D3细胞传代 | 第18页 |
| 2.2.4 细胞冻存 | 第18页 |
| 2.2.5 细胞复苏 | 第18-19页 |
| 2.2.6 细胞计数 | 第19页 |
| 2.2.7 差速贴壁法分离小鼠胚胎干细胞与MEF细胞 | 第19页 |
| 2.2.8 慢病毒准备和mESC细胞慢病毒转导 | 第19页 |
| 2.2.9 细胞分组后HangingDrops定向分化 | 第19-22页 |
| 2.2.10 细胞缺氧复氧 | 第22页 |
| 2.2.11 观察细胞搏动频率变化 | 第22页 |
| 2.2.12 MTT法检测各组细胞的存活率 | 第22页 |
| 2.2.13 测定细胞内ATP含量 | 第22页 |
| 2.2.14 测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)变化 | 第22页 |
| 2.2.15 RNA提取和实时定量PCR测定mRNA表达水平 | 第22-25页 |
| 2.2.16 Westernblot测定 | 第25-26页 |
| 2.3 统计学分析 | 第26-27页 |
| 第3章 结果 | 第27-42页 |
| 3.1 细胞培养与分化 | 第27-31页 |
| 3.1.1 Mef细胞与mESC-D3细胞培养 | 第27页 |
| 3.1.2 病毒转染 | 第27-28页 |
| 3.1.3 Hangingdrops | 第28-29页 |
| 3.1.4 缺氧复氧后心肌细胞形态学改变 | 第29-31页 |
| 3.2 miR-322上调对干细胞分化的心肌细胞H/R损伤具有保护作用 | 第31-34页 |
| 3.2.1 细胞搏动频率、存活率的变化 | 第31页 |
| 3.2.2 对细胞氧化应激损伤的保护作用 | 第31-32页 |
| 3.2.3 qRT-PCR结果 | 第32-34页 |
| 3.2.4 westernblot结果 | 第34页 |
| 3.3 Celf1下调对干细胞分化的心肌细胞H/R损伤具有保护作用 | 第34-37页 |
| 3.3.1 细胞搏动频率、存活率的变化 | 第34-35页 |
| 3.3.2 对细胞氧化应激损伤的保护作用 | 第35页 |
| 3.3.3 qRT-PCR结果 | 第35-37页 |
| 3.3.4 westernblot结果 | 第37页 |
| 3.4 miR-322通过抑制Celf1表达来达到对干细胞分化的心肌细胞H/R损伤的保护作用 | 第37-42页 |
| 3.4.1 细胞搏动频率、存活率的变化 | 第37-38页 |
| 3.4.2 对细胞氧化应激损伤的保护作用 | 第38-39页 |
| 3.4.3 qPCR结果 | 第39-41页 |
| 3.4.4 westernblot结果 | 第41-42页 |
| 第4章 讨论 | 第42-46页 |
| 第5章 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 综述 | 第53-60页 |
| 参考文献 | 第58-60页 |
