| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 0 前言 | 第24-58页 |
| 0.1 阪崎肠杆菌的富集及检测研究进展 | 第24-29页 |
| 0.1.1 阪崎肠杆菌污染现状 | 第24页 |
| 0.1.2 阪崎肠杆菌的抗性 | 第24-25页 |
| 0.1.3 食品中阪崎肠杆菌的检测技术 | 第25-29页 |
| 0.1.3.1 传统检测方法 | 第25页 |
| 0.1.3.2 分离培养基的改进 | 第25页 |
| 0.1.3.3 分子生物学检测方法 | 第25-27页 |
| 0.1.3.3.1 单重PCR技术 | 第25页 |
| 0.1.3.3.2多重PCR技术 | 第25-26页 |
| 0.1.3.3.3 实时荧光定量PCR技术 | 第26页 |
| 0.1.3.3.4 环介导等温扩增技术 | 第26-27页 |
| 0.1.3.4 免疫学检测方法 | 第27-29页 |
| 0.1.3.4.1 酶联免疫酶联免疫吸附试验 | 第27页 |
| 0.1.3.4.2 乳胶凝集实验 | 第27-28页 |
| 0.1.3.4.3 免疫胶体金技术 | 第28页 |
| 0.1.3.4.4 免疫磁性微球富集技术(Immunomagnetic beads technology,IMB) | 第28页 |
| 0.1.3.4.5 免疫荧光技术 | 第28-29页 |
| 0.1.3.4.6 免疫印迹技术 | 第29页 |
| 0.1.3.4.7 免疫检测技术的改进 | 第29页 |
| 0.2 磁性微球的制备 | 第29-32页 |
| 0.2.1 磁性微球简介 | 第29-30页 |
| 0.2.2 磁性微球的制备方法 | 第30-31页 |
| 0.2.2.1 包埋法 | 第30页 |
| 0.2.2.2 悬浮聚合法 | 第30页 |
| 0.2.2.3 分散聚合法 | 第30页 |
| 0.2.2.4 乳液聚合法 | 第30页 |
| 0.2.2.5 反相乳液聚合法 | 第30页 |
| 0.2.2.6 化学转化法 | 第30-31页 |
| 0.2.3 磁性微球的表面改性 | 第31-32页 |
| 0.2.3.1 单体共聚反应 | 第31页 |
| 0.2.3.2 表面改性处理 | 第31-32页 |
| 0.2.3.3 功能单体壳聚糖简介 | 第32页 |
| 0.3 免疫荧光探针的制备 | 第32-37页 |
| 0.3.1 量子点的制备及应用 | 第32-34页 |
| 0.3.1.1 量子点简介 | 第32-33页 |
| 0.3.1.2 量子点的合成方法 | 第33-34页 |
| 0.3.1.2.1 量子点的有机相合成 | 第33页 |
| 0.3.1.2.2 量子点的水相合成 | 第33-34页 |
| 0.3.1.2.3 水相量子点的包壳合成 | 第34页 |
| 0.3.2 免疫荧光技术 | 第34-35页 |
| 0.3.2.1 免疫荧光技术原理 | 第34页 |
| 0.3.2.2 荧光染料 | 第34-35页 |
| 0.3.2.2.1 有机小分子染料 | 第34-35页 |
| 0.3.2.2.2 稀土配合物 | 第35页 |
| 0.3.2.2.3 半导体量子点 | 第35页 |
| 0.3.3 荧光染料与生物分子的偶联 | 第35-37页 |
| 0.3.3.1 有机小分子染料与生物分子的偶联 | 第35-36页 |
| 0.3.3.2 稀土配合物与生物分子的偶联 | 第36页 |
| 0.3.3.3 量子点与生物分子的偶联 | 第36-37页 |
| 0.4 免疫抗血清的制备 | 第37-38页 |
| 0.4.1 抗体概述 | 第37-38页 |
| 0.4.2 多克隆抗体的制备 | 第38页 |
| 0.5 立题依据 | 第38-39页 |
| 0.6 研究内容及研究意义 | 第39-43页 |
| 0.6.1 研究内容及技术路线 | 第39-42页 |
| 0.6.1.1 研究内容 | 第39-42页 |
| 0.6.1.2 技术路线 | 第42页 |
| 0.6.2 研究意义 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-58页 |
| 1 阪崎肠杆菌多克隆抗体的制备 | 第58-74页 |
| 1.1 试剂与仪器 | 第58-60页 |
| 1.1.1 试剂 | 第58-60页 |
| 1.1.2 仪器 | 第60页 |
| 1.2 方法与步骤 | 第60-64页 |
| 1.2.1 抗原制备 | 第60页 |
| 1.2.2 抗血清制备 | 第60-61页 |
| 1.2.3 抗血清的纯化 | 第61页 |
| 1.2.4 抗血清效价的测定 | 第61-62页 |
| 1.2.4.1 玻片凝集法 | 第61-62页 |
| 1.2.4.2 间接ELISA法 | 第62页 |
| 1.2.5 纯化后多抗浓度测定 | 第62-63页 |
| 1.2.6 纯化后多克隆抗体的纯度分析 | 第63页 |
| 1.2.7 Western-blotting检测 | 第63页 |
| 1.2.8 MSMALDI-TOF/TOF-MS分析 | 第63-64页 |
| 1.2.9 IFAT检测 | 第64页 |
| 1.3 结果与讨论 | 第64-71页 |
| 1.3.1 阪崎肠杆菌多克隆抗体的纯化结果 | 第64-66页 |
| 1.3.2 纯化后多克隆抗体的效价 | 第66-67页 |
| 1.3.3 多克隆抗体浓度的测定结果 | 第67页 |
| 1.3.4 多克隆抗体的West-blotting分析结果 | 第67-69页 |
| 1.3.5 MSMALDI-TOF/TOF-MS鉴定结果 | 第69-70页 |
| 1.3.6 多克隆抗体的IFAT检测结果 | 第70-71页 |
| 1.4 本章小结 | 第71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 2 磁性壳聚糖微球的制备及表征 | 第74-85页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第74-75页 |
| 2.1.1 试剂 | 第74页 |
| 2.1.2 仪器 | 第74-75页 |
| 2.2 方法与步骤 | 第75-77页 |
| 2.2.1 水基磁流体的制备 | 第75页 |
| 2.2.2 磁性壳聚糖微球的制备 | 第75-76页 |
| 2.2.3 水基磁流体和磁性壳聚糖微球的基本性质 | 第76-77页 |
| 2.2.3.1 水基磁性流体的绝对质量与磁响应性 | 第76页 |
| 2.2.3.2 Fe_3O_4纳米粒子的磁滞回曲线 | 第76页 |
| 2.2.3.3 磁性壳聚糖微球的磁性响应性与磁滞回曲线 | 第76页 |
| 2.2.3.4 磁性壳聚糖微球的SEM分析 | 第76页 |
| 2.2.3.5 XRD分析 | 第76页 |
| 2.2.3.6 FTIR分析 | 第76页 |
| 2.2.3.7 DSC分析 | 第76-77页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第77-83页 |
| 2.3.1 水基磁性流体的绝对质量与磁响应性 | 第77页 |
| 2.3.2 Fe_3O_4纳米粒子的磁滞回曲线 | 第77-78页 |
| 2.3.3 磁性壳聚糖微球的磁性响应性与磁滞回曲线 | 第78-79页 |
| 2.3.4 磁性壳聚糖微球的SEM分析结果 | 第79页 |
| 2.3.5 XRD分析结果 | 第79-80页 |
| 2.3.6 FTIR分析结果 | 第80-81页 |
| 2.3.7 DSC分析结果 | 第81-83页 |
| 2.4 本章小结 | 第83页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| 3 磁性壳聚糖微球的表面羧基化及对阪崎肠杆菌的富集作用研究 | 第85-106页 |
| 3.1 试剂与仪器 | 第85-86页 |
| 3.1.1 试剂 | 第85-86页 |
| 3.1.2 仪器 | 第86页 |
| 3.2 方法与步骤 | 第86-91页 |
| 3.2.1 磁性壳聚糖微球的表面羧基化 | 第86-87页 |
| 3.2.2 表面羧基化磁性壳聚糖微球的表征 | 第87页 |
| 3.2.2.1 XRD分析 | 第87页 |
| 3.2.2.2 FTIR分析 | 第87页 |
| 3.2.2.3 DSC分析 | 第87页 |
| 3.2.3 羧基化磁性壳聚糖微球与阪崎肠杆菌多克隆抗体的偶联 | 第87-88页 |
| 3.2.3.1 偶联步骤 | 第87页 |
| 3.2.3.2 偶联时间对偶联效果的影响 | 第87页 |
| 3.2.3.3 微球用量对偶联效果的影响 | 第87-88页 |
| 3.2.3.4 活化缓冲液pH对偶联效果的影响 | 第88页 |
| 3.2.3.5 微球对抗体饱和偶联量的测定 | 第88页 |
| 3.2.4 免疫磁性微球对阪崎肠杆菌的富集效果 | 第88-89页 |
| 3.2.4.1 测定步骤 | 第88-89页 |
| 3.2.4.2 免疫磁性微球用量对富集效果的影响 | 第89页 |
| 3.2.4.3 温度对富集效果的影响 | 第89页 |
| 3.2.4.4 时间对富集效果的影响 | 第89页 |
| 3.2.4.5 pH对富集效果的影响 | 第89页 |
| 3.2.5 SEM分析 | 第89页 |
| 3.2.6 灵敏度实验 | 第89-90页 |
| 3.2.7 特异性实验 | 第90页 |
| 3.2.8 免疫磁性壳聚糖微球的重复利用 | 第90-91页 |
| 3.2.8.1 洗脱时间对重复利用效果的影响 | 第90页 |
| 3.2.8.2 洗脱液pH对重复利用效果的影响 | 第90-91页 |
| 3.2.8.3 免疫磁性微球的重复利用效果 | 第91页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第91-103页 |
| 3.3.1 表面羧基化磁性壳聚糖微球的表征结果 | 第91-93页 |
| 3.3.1.1 XRD分析结果 | 第91页 |
| 3.3.1.2 FTIR分析结果 | 第91-92页 |
| 3.3.1.3 DSC分析结果 | 第92-93页 |
| 3.3.2 磁性壳聚糖微球与阪崎肠杆菌多克隆抗体的偶联 | 第93-95页 |
| 3.3.2.1 偶联时间对偶联效果的影响 | 第93页 |
| 3.3.2.2 微球用量对偶联效果的影响 | 第93-94页 |
| 3.3.2.3 活化缓冲液pH对偶联效果的影响 | 第94-95页 |
| 3.3.2.4 微球对抗体饱和偶联量 | 第95页 |
| 3.3.3 免疫磁性微球对阪崎肠杆菌的富集效果 | 第95-100页 |
| 3.3.3.1 免疫磁性微球用量对富集效果的影响 | 第95-96页 |
| 3.3.3.2 温度对富集效果的影响 | 第96页 |
| 3.3.3.3 时间对富集效果的影响 | 第96-97页 |
| 3.3.3.4 pH对富集效果的影响 | 第97-98页 |
| 3.3.3.5 磁性壳聚糖微球及捕获阪崎肠杆菌后的SEM分析结果 | 第98-99页 |
| 3.3.3.6 灵敏度实验结果 | 第99页 |
| 3.3.3.7 特异性实验结果 | 第99-100页 |
| 3.3.4 磁性壳聚糖微球的表面羧基化及与抗体的偶联机理 | 第100-101页 |
| 3.3.5 免疫磁性微球的重复利用 | 第101-103页 |
| 3.3.5.1 洗脱时间对重复利用的影响 | 第101页 |
| 3.3.5.2 洗脱液pH对重复利用的影响 | 第101-102页 |
| 3.3.5.3 免疫磁性微球的重复利用效果 | 第102-103页 |
| 3.4 本章小结 | 第103页 |
| 参考文献 | 第103-106页 |
| 4 磁性壳聚糖微球的表面氨基化及对阪崎肠杆菌的富集作用研究 | 第106-126页 |
| 4.1 试剂与仪器 | 第106-107页 |
| 4.1.1 试剂 | 第106-107页 |
| 4.1.2 仪器 | 第107页 |
| 4.2 方法与步骤 | 第107-111页 |
| 4.2.1 磁性壳聚糖微球的表面氨基化 | 第107页 |
| 4.2.2 表面氨基化磁性壳聚糖微球的表征 | 第107-108页 |
| 4.2.2.1 XRD分析 | 第107-108页 |
| 4.2.2.2 FTIR分析 | 第108页 |
| 4.2.2.3 DSC分析 | 第108页 |
| 4.2.3 表面氨基化磁性壳聚糖微球与阪崎肠杆菌多克隆抗体的偶联 | 第108-109页 |
| 4.2.3.1 偶联步骤 | 第108页 |
| 4.2.3.2 偶联时间对偶联效果的影响 | 第108页 |
| 4.2.3.3 微球用量对偶联效果的影响 | 第108页 |
| 4.2.3.4 偶联体系pH对偶联效果的影响 | 第108-109页 |
| 4.2.3.5 微球对抗体饱和偶联量的测定 | 第109页 |
| 4.2.4 免疫磁性壳聚糖微球对阪崎肠杆菌的富集效果 | 第109-111页 |
| 4.2.4.1 测定步骤 | 第109页 |
| 4.2.4.2 免疫磁性壳聚糖微球用量对富集效果的影响 | 第109页 |
| 4.2.4.3 温度对富集效果的影响 | 第109-110页 |
| 4.2.4.4 时间对富集效果的影响 | 第110页 |
| 4.2.4.5 pH对富集效果的影响 | 第110页 |
| 4.2.4.6 免疫磁性微球对阪崎肠杆菌捕获的SEM分析 | 第110页 |
| 4.2.4.7 灵敏度实验 | 第110页 |
| 4.2.4.8 特异性实验 | 第110-111页 |
| 4.2.5 免疫磁性微球的重复利用 | 第111页 |
| 4.2.5.1 洗脱时间对重复利用的影响 | 第111页 |
| 4.2.5.2 洗脱液pH对重复利用的影响 | 第111页 |
| 4.2.5.3 免疫磁性微球的重复利用效果 | 第111页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第111-124页 |
| 4.3.1 表面氨基化磁性壳聚糖微球的表征结果 | 第111-113页 |
| 4.3.1.1 XRD分析结果 | 第111-112页 |
| 4.3.1.2 FTIR分析结果 | 第112-113页 |
| 4.3.1.3 DSC分析结果 | 第113页 |
| 4.3.2 磁性壳聚糖微球与阪崎肠杆菌多克隆抗体的偶联 | 第113-116页 |
| 4.3.2.1 偶联时间对偶联效果的影响 | 第113-114页 |
| 4.3.2.2 微球用量对偶联效果的影响 | 第114-115页 |
| 4.3.2.3 偶联体系pH对偶联效果的影响 | 第115页 |
| 4.3.2.4 微球对抗体的饱和偶联量 | 第115-116页 |
| 4.3.3 免疫磁性微球对阪崎肠杆菌的富集效果 | 第116-121页 |
| 4.3.3.1 微球用量对富集效果的影响 | 第116-117页 |
| 4.3.3.2 温度对富集效果的影响 | 第117页 |
| 4.3.3.3 时间对富集效果的影响 | 第117-118页 |
| 4.3.3.4 pH对富集效果的影响 | 第118-119页 |
| 4.3.3.5 磁性壳聚糖微球及捕获阪崎肠杆菌后的SEM分析结果 | 第119-120页 |
| 4.3.3.6 灵敏度实验结果 | 第120页 |
| 4.3.3.7 特异性实验结果 | 第120-121页 |
| 4.3.4 磁性壳聚糖微球的表面氨基化及与抗体的偶联机理 | 第121-122页 |
| 4.3.5 免疫磁性壳聚糖微球的重复利用 | 第122-124页 |
| 4.3.5.1 洗脱时间对重复利用的影响 | 第122-123页 |
| 4.3.5.2 洗脱液pH对重复利用的影响 | 第123页 |
| 4.3.5.3 免疫磁性微球的重复利用效果 | 第123-124页 |
| 4.4 本章小结 | 第124页 |
| 参考文献 | 第124-126页 |
| 5 超声波辅助盐水浴高效制备核壳结构CdTe/CdS量子点的研究 | 第126-144页 |
| 5.1 试剂与仪器 | 第127-128页 |
| 5.1.1 材料与试剂 | 第127页 |
| 5.1.2 仪器与设备 | 第127-128页 |
| 5.2 方法与步骤 | 第128页 |
| 5.2.1 超声波辅助盐水浴高效制备核壳结构CdTe/CdS量子点 | 第128页 |
| 5.2.2 CdTe/CdS量子点的表征 | 第128页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第128-139页 |
| 5.3.1 不同回流温度量子点的紫外-可见吸收光谱 | 第128-129页 |
| 5.3.2 不同回流温度量子点的PLQY | 第129-130页 |
| 5.3.3 不同回流时间量子点的紫外 | 第130页 |
| 5.3.4 量子点的激发光谱 | 第130-131页 |
| 5.3.5 量子点的荧光发射光谱 | 第131-132页 |
| 5.3.6 量子点的激发光谱与荧光发射光谱比较 | 第132页 |
| 5.3.7 量子点的荧光照片 | 第132-134页 |
| 5.3.8 量子点的TEM分析和激光粒度分析结果 | 第134-135页 |
| 5.3.9 量子点的XRD分析结果 | 第135-136页 |
| 5.3.10 量子点的FTIR分析结果 | 第136页 |
| 5.3.11 量子点的EDS分析结果 | 第136-138页 |
| 5.3.12 CdTe/CdS量子点的合成机理 | 第138-139页 |
| 5.3.13 CdTe/CdS量子点的荧光寿命与荧光稳定性 | 第139页 |
| 5.4 本章小结 | 第139-140页 |
| 参考文献 | 第140-144页 |
| 6 阪崎肠杆菌免疫荧光探针的制备及对阪崎肠杆菌的荧光标记 | 第144-158页 |
| 6.1 仪器与试剂 | 第144-145页 |
| 6.1.1 材料与试剂 | 第144-145页 |
| 6.1.2 仪器与设备 | 第145页 |
| 6.2 方法与步骤 | 第145-147页 |
| 6.2.1 免疫荧光探针的制备 | 第145-147页 |
| 6.2.1.1 制备步骤 | 第145页 |
| 6.2.1.2 CdTe/CdS量子点用量对免疫荧光探针荧光强度的影响 | 第145-146页 |
| 6.2.1.3 温度对免疫荧光探针荧光强度的影响 | 第146页 |
| 6.2.1.4 时间对免疫荧光探针荧光强度的影响 | 第146页 |
| 6.2.1.5 pH对免疫荧光探针荧光强度的影响 | 第146页 |
| 6.2.1.6 抗体用量对免疫荧光探针荧光强度的影响 | 第146-147页 |
| 6.2.2 免疫荧光探针的表征 | 第147页 |
| 6.2.3 免疫荧光探针对阪崎肠杆菌的荧光标记 | 第147页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第147-155页 |
| 6.3.1 免疫荧光探针的制备 | 第147-150页 |
| 6.3.1.1 CdTe/CdS量子点用量对免疫荧光探针荧光强度的影响 | 第147-148页 |
| 6.3.1.2 温度对免疫荧光探针荧光强度的影响 | 第148页 |
| 6.3.1.3 时间对免疫荧光探针荧光强度的影响 | 第148-149页 |
| 6.3.1.4 pH对免疫荧光探针荧光强度的影响 | 第149-150页 |
| 6.3.1.5 抗体用量对免疫荧光探针荧光强度的影响 | 第150页 |
| 6.3.2 免疫荧光探针的表征 | 第150-155页 |
| 6.3.2.1 紫外光谱分析结果 | 第150-151页 |
| 6.3.2.2 荧光光谱分析结果 | 第151-152页 |
| 6.3.2.3 荧光寿命 | 第152页 |
| 6.3.2.4 SDS-PAGE分析结果 | 第152-153页 |
| 6.3.2.5 FTIR分析结果 | 第153-155页 |
| 6.3.3 免疫荧光探针对阪崎肠杆菌的荧光标记结果 | 第155页 |
| 6.4 本章小结 | 第155-156页 |
| 参考文献 | 第156-158页 |
| 7 免疫磁性微球及免疫荧光探针对牛奶中阪崎肠杆菌的富集和检测 | 第158-168页 |
| 7.1 仪器与试剂 | 第159-160页 |
| 7.1.1 材料与试剂 | 第159页 |
| 7.1.2 仪器与设备 | 第159-160页 |
| 7.2 方法与步骤 | 第160-161页 |
| 7.2.1 检测步骤 | 第160页 |
| 7.2.2 最佳检测时间研究 | 第160页 |
| 7.2.3 特异性研究 | 第160页 |
| 7.2.4 检出限研究 | 第160-161页 |
| 7.2.5 精密度研究 | 第161页 |
| 7.2.6 稳定性研究 | 第161页 |
| 7.3 结果与讨论 | 第161-165页 |
| 7.3.1 最佳检测时间研究结果 | 第161-162页 |
| 7.3.1.1 富集时间对富集效果的影响 | 第161-162页 |
| 7.3.1.2 荧光标记时间对荧光强度的影响 | 第162页 |
| 7.3.2 特异性研究结果 | 第162-164页 |
| 7.3.3 检出限研究结果 | 第164页 |
| 7.3.4 精密度研究结果 | 第164-165页 |
| 7.3.5 稳定性研究结果 | 第165页 |
| 7.4 本章小结 | 第165-166页 |
| 参考文献 | 第166-168页 |
| 论文结论 | 第168-170页 |
| 论文创新点 | 第170-171页 |
| 研究展望 | 第171-172页 |
| 个人简介 | 第172-173页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第173-174页 |
| 致谢 | 第174页 |
