| 中文摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩写词表 | 第12-13页 |
| 综述: 猪瘟病原学、诊断学及疫苗研究进展 | 第13-36页 |
| 1 引言 | 第13页 |
| 2 猪瘟病毒概述 | 第13-19页 |
| 2.1 病原学研究 | 第13-14页 |
| 2.2 基因组结构 | 第14页 |
| 2.3 主要结构蛋白及功能 | 第14-15页 |
| 2.4 非结构蛋白及功能 | 第15-16页 |
| 2.5 发病机理 | 第16页 |
| 2.6 流行病学 | 第16-17页 |
| 2.7 诊断 | 第17-18页 |
| 2.8 单克隆抗体在猪瘟检测中的应用 | 第18页 |
| 2.9 防治 | 第18-19页 |
| 3 猪瘟疫苗 | 第19-27页 |
| 参考文献 | 第27-36页 |
| 第一章 猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区的原核表达 | 第36-54页 |
| 1. 材料 | 第37页 |
| 1.1 病毒、载体 | 第37页 |
| 1.2 分子生物学试剂 | 第37页 |
| 1.3 主要试验仪器 | 第37页 |
| 2 方法 | 第37-44页 |
| 2.1 pET28a-CSFV-E2原核表达载体的构建 | 第37-41页 |
| 2.2 重组pET28a-CSFV-E2蛋白的诱导表达 | 第41页 |
| 2.3 重组pET28a-CSFV-E2蛋白的纯化 | 第41-42页 |
| 2.4 E2蛋白的Western-blot检测 | 第42-43页 |
| 2.5 蛋白含量检测 | 第43-44页 |
| 3 结果 | 第44-51页 |
| 3.1 E2'基因的PCR扩增 | 第44页 |
| 3.2 pMD18-CSFV-E2'克隆载体的构建及鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3 pET28a-CSFV-E2'原核表达载体的构建及鉴定 | 第45-46页 |
| 3.4 E2'基因密码子优化 | 第46-47页 |
| 3.5 pET28a-CSFV-E2原核表达质粒的构建及鉴定 | 第47-48页 |
| 3.6 IPTG诱导表达条件确定 | 第48-49页 |
| 3.7 纯化E2蛋白的SDS-PAGE检测 | 第49-50页 |
| 3.8 E2蛋白的Western-blot检测 | 第50-51页 |
| 3.9 E2蛋白浓度测定 | 第51页 |
| 讨论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 第二章 猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体的制备与IFA检测方法建立 | 第54-73页 |
| 1 材料 | 第55页 |
| 1.1 细胞、病毒、实验材料及实验动物 | 第55页 |
| 1.2 分子生物学试剂 | 第55页 |
| 1.3 耗材 | 第55页 |
| 1.4 主要试验仪器 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-62页 |
| 2.1 猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体的制备 | 第55-60页 |
| 2.2 猪瘟病毒IFA检测方法的建立 | 第60-62页 |
| 3 结果 | 第62-70页 |
| 3.1 细胞的融合 | 第62页 |
| 3.2 融合细胞上清的IFA筛选 | 第62-63页 |
| 3.3 单克隆细胞上清的IFA鉴定 | 第63-64页 |
| 3.4 腹水单抗的特性鉴定 | 第64-66页 |
| 3.5 IFA的建立 | 第66-69页 |
| 3.6 IFA检测方法与兔体效力检验方法的比较 | 第69-70页 |
| 3.7 IFA检测不同企业猪瘟传代细胞源活疫苗抗原含量 | 第70页 |
| 讨论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-73页 |
| 第三章 猪瘟病毒E2蛋白亚单位疫苗的初步研制 | 第73-86页 |
| 1 材料 | 第73页 |
| 2. 方法 | 第73-76页 |
| 2.1 E2蛋白的制备与纯化 | 第74页 |
| 2.2 E2蛋白亚单位疫苗的制备 | 第74页 |
| 2.3 疫苗的检测 | 第74-76页 |
| 3. 结果 | 第76-83页 |
| 3.1 E2蛋白的制备 | 第76页 |
| 3.2 疫苗的检测 | 第76-77页 |
| 3.3 安全检验 | 第77-78页 |
| 3.4 免疫后血清ELISA抗体检测 | 第78-79页 |
| 3.5 仔猪攻毒后观察 | 第79-80页 |
| 3.6 试验猪攻毒后体温变化 | 第80页 |
| 3.7 病理解剖 | 第80-82页 |
| 3.8 试验猪组织病毒载量检测 | 第82-83页 |
| 3.9 试验猪剖杀前体重变化 | 第83页 |
| 讨论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-86页 |
| 全文小结 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 附录 | 第88-92页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第92-93页 |
