| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩写词表 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-29页 |
| 1.1 百合及其衰老研究 | 第15-19页 |
| 1.1.1 百合概述 | 第15-16页 |
| 1.1.2 百合花的衰老与乙烯的关系 | 第16-17页 |
| 1.1.3 乙烯生物合成的途径 | 第17-18页 |
| 1.1.4 花卉中调控乙烯的主要方法 | 第18-19页 |
| 1.2 ACC 氧化酶研究进展 | 第19-23页 |
| 1.2.1 ACC 氧化酶的结构和功能 | 第19-20页 |
| 1.2.2 ACC 氧化酶基因克隆的研究进展 | 第20页 |
| 1.2.3 ACO 基因差异表达的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.2.4 ACO 基因在植物基因工程中的应用 | 第22-23页 |
| 1.3 百合愈伤组织再生途径及其遗传转化受体系统研究进展 | 第23-27页 |
| 1.3.1 愈伤组织诱导和培养的条件探索 | 第23-25页 |
| 1.3.2 百合花部愈伤组织再生途径的研究进展 | 第25-26页 |
| 1.3.3 百合植株的再生 | 第26-27页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第27-29页 |
| 第二章 麝香百合 ACC 氧化酶基因 LlACO1 克隆及序列分析 | 第29-66页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第29-31页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第29页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第29页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.1.4 试剂及试剂盒 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-48页 |
| 2.2.1 百合ACC 氧化酶基因片段的克隆 | 第31-37页 |
| 2.2.2 RACE 法克隆百合ACC 氧化酶基因LlACO1 CDS 全长 | 第37-40页 |
| 2.2.3 百合ACC 氧化酶基因LlACO1 基因组全长序列的克隆 | 第40-41页 |
| 2.2.4 LlACO1 基因的生物信息学分析 | 第41页 |
| 2.2.5 基因组Southern 杂交分析 | 第41-45页 |
| 2.2.6 LlACO1 组织特异性表达分析 | 第45-48页 |
| 2.3 结果与分析 | 第48-63页 |
| 2.3.1 麝香百合叶片总RNA 的提取 | 第48页 |
| 2.3.2 第一链cDNA 的合成及双链cDNA 的扩增 | 第48-49页 |
| 2.3.3 LlACO1 特异片段的克隆 | 第49-50页 |
| 2.3.4 LlACO1 CDS 全长的获得 | 第50-54页 |
| 2.3.5 LlACO1 推导蛋白的序列分析、结构预测和分子进化树分析 | 第54-59页 |
| 2.3.6 LlACO1 基因组序列的克隆 | 第59-61页 |
| 2.3.7 百合LlACO1 基因的Southern 分析 | 第61-62页 |
| 2.3.8 百合LlACO1 基因的组织表达分析 | 第62-63页 |
| 2.4 讨论 | 第63-65页 |
| 2.4.1 LlACO1 基因的克隆 | 第63-64页 |
| 2.4.2 LlACO1 的保守结构分析 | 第64页 |
| 2.4.3 LlACO1 的组织特异表达分析 | 第64-65页 |
| 2.5 本章小结 | 第65-66页 |
| 第三章 麝香百合愈伤组织遗传转化受体系统的建立 | 第66-77页 |
| 3.1 植物材料 | 第66页 |
| 3.2 实验方法 | 第66-68页 |
| 3.2.1 外植体的消毒 | 第66页 |
| 3.2.2 培养基与培养条件 | 第66-67页 |
| 3.2.3 愈伤组织诱导、增殖和分化 | 第67页 |
| 3.2.4 生根培养和移栽 | 第67-68页 |
| 3.2.5 抗生素敏感性试验 | 第68页 |
| 3.3 结果与分析 | 第68-73页 |
| 3.3.1 高频再生系统的建立 | 第68-72页 |
| 3.3.2 抗生素敏感性试验 | 第72-73页 |
| 3.4 讨论 | 第73-76页 |
| 3.4.1 百合花部器官外植体的消毒 | 第73-74页 |
| 3.4.2 外植体的生理状态对百合愈伤组织诱导和植株再生的影响 | 第74页 |
| 3.4.3 植物生长调节物质对百合花部组织愈伤组织诱导和植株再生的影响 | 第74-75页 |
| 3.4.4 再生苗玻璃化的原因及应对策略 | 第75-76页 |
| 3.5 本章小结 | 第76-77页 |
| 第四章 LlACO1 反义表达载体的构建及对百合的遗传转化的初步研究 | 第77-90页 |
| 4.1 实验材料 | 第77页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第77页 |
| 4.1.2 质粒及菌种 | 第77页 |
| 4.2 实验方法 | 第77-82页 |
| 4.2.1 LlACO1 植物反义表达载体的构建 | 第77-80页 |
| 4.2.2 植物表达载体转化农杆菌EHA105 | 第80-81页 |
| 4.2.3 农杆菌EHA105 介导的p1304－antiLlACO1 转化麝香百合 | 第81-82页 |
| 4.3 结果与分析 | 第82-87页 |
| 4.3.1 植物表达载体p1304－antiLlACO1 的构建 | 第82-84页 |
| 4.3.2 植物表达载体转化农杆菌EHA105 | 第84-85页 |
| 4.3.3 农杆菌EHA105 介导的p1304-antiLlACO1 转化麝香百合 | 第85-87页 |
| 4.4 讨论 | 第87-88页 |
| 4.4.1 LlACO1 反义载体的构建 | 第87-88页 |
| 4.4.2 gus 染色检测外源基因在愈伤组织细胞的初步转化 | 第88页 |
| 4.5 本章小结 | 第88-90页 |
| 第五章 结论与展望 | 第90-92页 |
| 5.1 研究结论 | 第90页 |
| 5.2 后续研究方向 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第99页 |
