| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第10-20页 |
| 1.1 白藜芦醇 | 第10-11页 |
| 1.2 白藜芦醇的药用价值 | 第11-13页 |
| 1.2.1 抗癌 | 第11-12页 |
| 1.2.2 延缓衰老,延长寿命 | 第12页 |
| 1.2.3 防治心血管疾病 | 第12-13页 |
| 1.3 白藜芦醇的制取 | 第13-15页 |
| 1.3.1 植物提取法 | 第13页 |
| 1.3.2 植物提取法 | 第13-14页 |
| 1.3.3 生物方法 | 第14-15页 |
| 1.4 白藜芦醇的生物合成 | 第15-17页 |
| 1.4.1 4-香豆酸:CoA连接酶(4CL)研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4.2 芪合酶(STS)的研究进展 | 第17页 |
| 1.5 提高细胞内丙二酰CoA含量的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.6 大肠杆菌表达系统的概况 | 第18-19页 |
| 1.7 基因融合表达的概况 | 第19页 |
| 1.8 本论文的研究意义及目的 | 第19-20页 |
| 第2章 基因4cl、sts的克隆与表达研究 | 第20-36页 |
| 2.1 前言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.2.2 菌株与质粒 | 第20-21页 |
| 2.2.3 酶、试剂盒和药品 | 第21页 |
| 2.2.4 主要实验器材 | 第21-22页 |
| 2.2.5 培养基和试剂配制 | 第22-23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-28页 |
| 2.3.1 植物组织总RNA的提取 | 第23页 |
| 2.3.2 RNA的反转录 | 第23-24页 |
| 2.3.3 基因4cl和sts的克隆 | 第24-25页 |
| 2.3.4 重组质粒pET22b-4cl和pET28a-sts的构建 | 第25-26页 |
| 2.3.5 重组质粒pET22b-4cl及pET28a-sts的验证 | 第26-27页 |
| 2.3.6 重组质粒pET22b-4cl及pET28a-sts的表达 | 第27-28页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第28-34页 |
| 2.4.1 基因4cl、sts的克隆 | 第28-30页 |
| 2.4.2 重组质粒pET22b-4cl及pET28a-sts的构建及验证 | 第30-33页 |
| 2.4.3 pET22b-4cl及pET28a-sts在大肠杆菌BL21中的表达 | 第33-34页 |
| 2.5 本章小结 | 第34-36页 |
| 第3章 基因4cl、sts的共表达与融合表达生产白藜芦醇 | 第36-62页 |
| 3.1 前言 | 第36-37页 |
| 3.2 实验材料 | 第37-38页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第37页 |
| 3.2.2 酶、试剂盒和药品 | 第37页 |
| 3.2.3 主要实验器材 | 第37-38页 |
| 3.3 实验方法 | 第38-41页 |
| 3.3.1 DNA片段的首尾连接成环 | 第38-39页 |
| 3.3.2 生产白藜芦醇工程菌的发酵实验 | 第39页 |
| 3.3.3 高效液相色谱(HPLC)测定白藜芦醇 | 第39-41页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第41-61页 |
| 3.4.1 基因4cl、sts共表达体系的构建及表达 | 第41-46页 |
| 3.4.2 融合表达体系pETduet-sts::4cl的构建及表达 | 第46-49页 |
| 3.4.3 融合表达体系pETduet-4cl::sts的构建及表达 | 第49-56页 |
| 3.4.4 共表达体系发酵生产白藜芦醇的HPLC分析 | 第56-58页 |
| 3.4.5 融合表达体系发酵生产白藜芦醇的HPLC分析 | 第58-60页 |
| 3.4.6 共表达体系与融合表达体系生产白藜芦醇能力的比较 | 第60-61页 |
| 3.5 本章小结 | 第61-62页 |
| 第4章 基因aae的克隆与表达及最终产白藜芦醇工程菌的构建 | 第62-76页 |
| 4.1 前言 | 第62页 |
| 4.2 实验材料 | 第62-64页 |
| 4.2.1 植物材料 | 第62页 |
| 4.2.2 菌株和质粒 | 第62页 |
| 4.2.3 酶、试剂盒和药品 | 第62-63页 |
| 4.2.4 主要实验器材 | 第63页 |
| 4.2.5 培养基和试剂配制 | 第63-64页 |
| 4.3 实验方法 | 第64-65页 |
| 4.3.1 植物基因组的提取 | 第64页 |
| 4.3.2 拟南芥种子的萌发实验 | 第64-65页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第65-74页 |
| 4.4.1 拟南芥中aae基因的克隆与表达 | 第65-72页 |
| 4.4.2 BL21-pETduet-sts::4cl-aae发酵生产白藜芦醇HPLC分析 | 第72-73页 |
| 4.4.3 基因aae的表达对白藜芦醇产量的影响 | 第73-74页 |
| 4.5 本章小结 | 第74-76页 |
| 第5章 总结与展望 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 附件 | 第83页 |
