| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 符号说明 | 第13-15页 |
| 第一章 研究背景综述 | 第15-25页 |
| 1.1 生物冶金 | 第15-16页 |
| 1.1.1 生物冶金技术简介 | 第15-16页 |
| 1.1.2 生物冶金微生物简介 | 第16页 |
| 1.2 嗜酸性氧化亚铁硫杆菌简介 | 第16-17页 |
| 1.3 嗜酸性氧化亚铁硫杆菌的代谢 | 第17-23页 |
| 1.3.1 嗜酸性氧化亚铁硫杆菌亚铁氧化机制 | 第17页 |
| 1.3.2 硫代谢机制 | 第17-19页 |
| 1.3.3 氮代谢机制 | 第19-20页 |
| 1.3.4 二氧化碳固定机制 | 第20-21页 |
| 1.3.5 中心碳代谢机制 | 第21-23页 |
| 1.4 嗜酸性氧化亚铁硫杆菌分子生物学研究进展 | 第23页 |
| 1.5 本文的研究目的和研究内容 | 第23-25页 |
| 第二章 大肠杆菌高活性磷酸果糖激酶PFKA编码基因对嗜酸性氧化亚铁硫杆菌PFKB编码基因的替换 | 第25-57页 |
| 2.1 材料与方法 | 第26-39页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第26-27页 |
| 2.1.2 培养基和培养条件 | 第27-28页 |
| 2.1.3 实验所用引物 | 第28页 |
| 2.1.4 试剂与仪器 | 第28-29页 |
| 2.1.5 常用的反应体系 | 第29-30页 |
| 2.1.6 常规实验操作 | 第30-39页 |
| 2.2 实验结果与讨论 | 第39-54页 |
| 2.2.1 RK12A突变株的构建 | 第39-54页 |
| 2.3 本章小结 | 第54-57页 |
| 第三章 嗜酸性氧化亚铁硫杆菌磷酸转酮酶活性的测定和过表达研究 | 第57-75页 |
| 3.1 材料与方法 | 第58-62页 |
| 3.1.1 实验中用到的菌株与质粒 | 第58页 |
| 3.1.2 培养基和培养条件 | 第58-59页 |
| 3.1.3 实验所用引物 | 第59-60页 |
| 3.1.4 磷酸转酮酶酶活测定 | 第60-62页 |
| 3.2 实验结果与讨论 | 第62-73页 |
| 3.2.1 AFE_1667 和AFE_2053生物信息学分析 | 第62-63页 |
| 3.2.2 AFE_1667和AFE_2053在大肠杆菌中的表达和蛋白功能验证 | 第63-65页 |
| 3.2.3 AFE_1667和AFE_2053在A.ferrooxidans中的过表达 | 第65-73页 |
| 3.3 本章小结 | 第73-75页 |
| 第四章 嗜酸性氧化亚铁硫杆菌AFE_2024-2025 (pgd+zwf)基因的过表达研究 | 第75-85页 |
| 4.1 材料与方法 | 第75-76页 |
| 4.1.1 本章实验所用菌株与质粒 | 第75-76页 |
| 4.1.2 培养基及培养条件 | 第76页 |
| 4.1.3 实验所用引物 | 第76页 |
| 4.2 实验结果与讨论 | 第76-82页 |
| 4.2.1 重组质粒pET20b-2024-25的构建 | 第76-77页 |
| 4.2.2 重组质粒pJRD215-2024-25的构建 | 第77-78页 |
| 4.2.3 A.ferrooxidans(pJ RD215-2024-25)的构建 | 第78-79页 |
| 4.2.4 工程菌性质的研究 | 第79-82页 |
| 4.3 本章小结 | 第82-85页 |
| 第五章 蔗糖对A.ferrooxidans ATCC 23270生长的影响 | 第85-91页 |
| 5.1 材料与方法 | 第85-86页 |
| 5.1.1 本章实验所用菌株和质粒 | 第85页 |
| 5.1.2 试剂 | 第85页 |
| 5.1.3 本章实验所用引物 | 第85页 |
| 5.1.4 培养基和培养条件 | 第85-86页 |
| 5.2 实验结果与讨论 | 第86-89页 |
| 5.2.1 不同碳源对A.ferrooxidans生长的影响 | 第86页 |
| 5.2.2 蔗糖对A.ferrooxidans生长的影响 | 第86-89页 |
| 5.3 本章小结 | 第89-91页 |
| 第六章 不同起始密码子的gusA基因在A.ferrooxidans中的表达 | 第91-101页 |
| 6.1 材料与方法 | 第91-93页 |
| 6.1.1 实验用到的菌株和质粒 | 第91-92页 |
| 6.1.2 培养基和培养条件 | 第92页 |
| 6.1.3 本章实验所用引物 | 第92-93页 |
| 6.1.4 GusA酶活测定方法 | 第93页 |
| 6.2 实验结果与讨论 | 第93-99页 |
| 6.2.1 重组质粒pUC19-P_(tac)-gusA的构建 | 第93-94页 |
| 6.2.2 重组质粒pJRD215-P_(tac)-gusA的构建 | 第94-95页 |
| 6.2.3 不同起始密码子的gusA基因在大肠杆菌中的表达及酶活检测 | 第95-97页 |
| 6.2.4 工程菌A.ferrooxidans(pJRD215-P_(tac)-gusA)的构建 | 第97页 |
| 6.2.5 工程菌A.ferrooxidans(pJRD215-P_(tac)-gusA)的酶活测定 | 第97-99页 |
| 6.3 本章小结 | 第99-101页 |
| 全文总结与展望 | 第101-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-113页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第113页 |
