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大豆磷效率相关基因GmACP1和GmPht1;1的克隆与功能研究

摘要第8-11页
ABSTRACT第11-14页
缩略词表第15-16页
第一章 文献综述第16-46页
    1 植物应对磷胁迫的适应性机制第17-26页
        1.1 根系形态结构的变化第18页
        1.2 根系分泌物的变化第18-20页
        1.3 代谢途径及生物膜结构的改变第20-22页
        1.4 缺磷对植物光合作用的影响第22-26页
    2 植物对磷胁迫的分子调控机制第26-36页
        2.1 植物对磷信号的感应第26页
        2.2 植物体内磷饥饿响应的分子机制第26-36页
    3 大豆耐低磷性研究进展第36-40页
        3.1 磷效率的概念第36-37页
        3.2 大豆耐低磷相关性状QTL定位第37-39页
        3.3 大豆耐低磷相关基因的分离和克隆第39-40页
    4 遗传基因组学的概念及其在植物中的应用第40-43页
        4.1 遗传基因组学的概念第41页
        4.2 基因的顺式和反式调控第41-42页
        4.3 遗传基因组学的应用第42-43页
    5 研究目的和意义第43-46页
研究报告(一)第46-84页
    第二章 GmACPl基因的克隆与表达分析第48-66页
        1 材料与方法第48-55页
            1.1 试验材料第48-49页
            1.2 材料处理第49页
            1.3 GmACP1基因的克隆第49页
            1.4 GmACP1基因的生物信息学分析第49-50页
            1.5 GmACP1基因的表达分析第50页
            1.6 GmACP1基因的原核表达第50-55页
        2 结果与分析第55-63页
            2.1 GmACP1的基因结构分析第55-56页
            2.2 GmACP1的氨基酸序列和系统发生树分析第56-59页
            2.3 GmACP1基因的表达分析第59-61页
            2.4 GmACP1基因的原核表达和酶活测定第61-63页
        3 讨论第63-66页
            3.1 GmACP1基因序列的保守性第63-64页
            3.2 GmACP1属于酸性磷酸酶第64-65页
            3.3 GmACP1基因的表达受磷饥饿诱导第65-66页
    第三章 GmACP1在转基因烟草中的功能分析第66-76页
        1 材料与方法第66-71页
            1.1 试验材料第66-67页
            1.2 植物表达载体的构建第67页
            1.3 转基因烟草植株的获得及阳性植株的鉴定第67-69页
            1.4 T1代转基因烟草植株的种植和水培处理第69页
            1.5 植株鲜重、干重和总磷含量的测定第69-70页
            1.6 植株有效磷含量的测定第70页
            1.7 植株酸性磷酸酶活性的测定第70-71页
        2 结果与分析第71-75页
            2.1 植物表达载体的构建第71页
            2.2 转基因烟草的阳性鉴定第71-72页
            2.3 GmACP1过量表达的转基因烟草的功能分析第72-75页
        3 讨论第75-76页
    第四章 GmACP1在转基因大豆毛状根中的功能研究第76-84页
        1 材料与方法第76-79页
            1.1 试验材料第76-77页
            1.2 材料处理第77页
            1.3 发根农杆菌感受态制备第77页
            1.4 质粒转化发根农杆菌第77-78页
            1.5 毛状根的诱导第78页
            1.6 转基因株系酸性磷酸酶活性测定第78-79页
            1.7 转基因大豆根的干重、磷含量和磷效率测定第79页
        2 结果与分析第79-81页
            2.1 发根农杆菌对大豆不定根的诱导第79页
            2.2 转基因大豆毛状根的检测第79-80页
            2.3 转基因大豆毛状根的酸性磷酸酶活性测定第80-81页
            2.4 转基因大豆毛状根的干重和磷含量测定第81页
        3 讨论第81-84页
研究报告(二)第84-112页
    第五章 GmPht1;1基因的表达特征与功能分析第86-106页
        1 材料与方法第87-91页
            1.1 试验材料第87页
            1.2 大豆Pht1家族基因的氨基酸序列分析第87-88页
            1.3 GmPht1;1基因的启动子克隆和顺式作用元件分析第88页
            1.4 实时荧光定量PCR第88页
            1.5 植物表达载体的构建第88-90页
            1.6 转基因烟草植株的获得及阳性植株的鉴定第90页
            1.7 T_1代转基因烟草植株的处理第90页
            1.8 转基因烟草植株鲜重、干重、总磷及有效磷含量的测定第90页
            1.9 转基因烟草植株光合参数的测定第90-91页
        2 结果与分析第91-101页
            2.1 GmPht1;1与家族其他成员的发生树分析第91-93页
            2.2 GmPht1;1的启动子克隆和序列分析第93页
            2.3 GmPht1;1基因的表达特征第93-96页
            2.4 植物表达载体的构建第96页
            2.5 转基因烟草的阳性鉴定第96-97页
            2.6 转基因植株的功能分析第97-101页
        3 讨论第101-106页
            3.1 GmPht1;1基因序列结构的保守性第101-102页
            3.2 GmPht1;1基因启动子区存在光响应和磷缺乏响应元件第102页
            3.3 GmPht1;1的表达受长期磷缺乏诱导,在植物体内Pi的转移过程中发挥作用第102-103页
            3.4 GmPht1;1基因的过量表达能提高转基因烟草植株的耐低磷能力第103-106页
    第六章 GmPht1;1基因的eQTL定位第106-112页
        1 材料与方法第106-108页
            1.1 试验材料第106-107页
            1.2 遗传图谱第107页
            1.3 试验设计第107页
            1.4 基因表达水平的测定第107页
            1.5 籽粒产量、光合速率及叶绿素a荧光参数测定第107页
            1.6 统计分析与eQTL定位方法第107-108页
        2 结果与分析第108-110页
            2.1 GmPht1;1基因表达量与籽粒产量、光合速率及叶绿素荧光参数的相关分析第108页
            2.2 GmPht1:1基因的eQTL分析第108-110页
        3 讨论第110-112页
            3.1 GmPht1;1基因的表达水平可能调节大豆植株的籽粒产量第110页
            3.2 GmPht1:1基因的表达水平由顺式eQTL和反式eQTL共同调控第110-111页
            3.3 GmPht1:1基因的eQTL在农作物育种上的应用第111-112页
全文结论第112-114页
本研究创新之处第114-116页
参考文献第116-140页
附录第140-150页
攻读博士期间发表及待发表的论文第150-152页
致谢第152页

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