摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
缩略词表 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-46页 |
1 植物应对磷胁迫的适应性机制 | 第17-26页 |
1.1 根系形态结构的变化 | 第18页 |
1.2 根系分泌物的变化 | 第18-20页 |
1.3 代谢途径及生物膜结构的改变 | 第20-22页 |
1.4 缺磷对植物光合作用的影响 | 第22-26页 |
2 植物对磷胁迫的分子调控机制 | 第26-36页 |
2.1 植物对磷信号的感应 | 第26页 |
2.2 植物体内磷饥饿响应的分子机制 | 第26-36页 |
3 大豆耐低磷性研究进展 | 第36-40页 |
3.1 磷效率的概念 | 第36-37页 |
3.2 大豆耐低磷相关性状QTL定位 | 第37-39页 |
3.3 大豆耐低磷相关基因的分离和克隆 | 第39-40页 |
4 遗传基因组学的概念及其在植物中的应用 | 第40-43页 |
4.1 遗传基因组学的概念 | 第41页 |
4.2 基因的顺式和反式调控 | 第41-42页 |
4.3 遗传基因组学的应用 | 第42-43页 |
5 研究目的和意义 | 第43-46页 |
研究报告(一) | 第46-84页 |
第二章 GmACPl基因的克隆与表达分析 | 第48-66页 |
1 材料与方法 | 第48-55页 |
1.1 试验材料 | 第48-49页 |
1.2 材料处理 | 第49页 |
1.3 GmACP1基因的克隆 | 第49页 |
1.4 GmACP1基因的生物信息学分析 | 第49-50页 |
1.5 GmACP1基因的表达分析 | 第50页 |
1.6 GmACP1基因的原核表达 | 第50-55页 |
2 结果与分析 | 第55-63页 |
2.1 GmACP1的基因结构分析 | 第55-56页 |
2.2 GmACP1的氨基酸序列和系统发生树分析 | 第56-59页 |
2.3 GmACP1基因的表达分析 | 第59-61页 |
2.4 GmACP1基因的原核表达和酶活测定 | 第61-63页 |
3 讨论 | 第63-66页 |
3.1 GmACP1基因序列的保守性 | 第63-64页 |
3.2 GmACP1属于酸性磷酸酶 | 第64-65页 |
3.3 GmACP1基因的表达受磷饥饿诱导 | 第65-66页 |
第三章 GmACP1在转基因烟草中的功能分析 | 第66-76页 |
1 材料与方法 | 第66-71页 |
1.1 试验材料 | 第66-67页 |
1.2 植物表达载体的构建 | 第67页 |
1.3 转基因烟草植株的获得及阳性植株的鉴定 | 第67-69页 |
1.4 T1代转基因烟草植株的种植和水培处理 | 第69页 |
1.5 植株鲜重、干重和总磷含量的测定 | 第69-70页 |
1.6 植株有效磷含量的测定 | 第70页 |
1.7 植株酸性磷酸酶活性的测定 | 第70-71页 |
2 结果与分析 | 第71-75页 |
2.1 植物表达载体的构建 | 第71页 |
2.2 转基因烟草的阳性鉴定 | 第71-72页 |
2.3 GmACP1过量表达的转基因烟草的功能分析 | 第72-75页 |
3 讨论 | 第75-76页 |
第四章 GmACP1在转基因大豆毛状根中的功能研究 | 第76-84页 |
1 材料与方法 | 第76-79页 |
1.1 试验材料 | 第76-77页 |
1.2 材料处理 | 第77页 |
1.3 发根农杆菌感受态制备 | 第77页 |
1.4 质粒转化发根农杆菌 | 第77-78页 |
1.5 毛状根的诱导 | 第78页 |
1.6 转基因株系酸性磷酸酶活性测定 | 第78-79页 |
1.7 转基因大豆根的干重、磷含量和磷效率测定 | 第79页 |
2 结果与分析 | 第79-81页 |
2.1 发根农杆菌对大豆不定根的诱导 | 第79页 |
2.2 转基因大豆毛状根的检测 | 第79-80页 |
2.3 转基因大豆毛状根的酸性磷酸酶活性测定 | 第80-81页 |
2.4 转基因大豆毛状根的干重和磷含量测定 | 第81页 |
3 讨论 | 第81-84页 |
研究报告(二) | 第84-112页 |
第五章 GmPht1;1基因的表达特征与功能分析 | 第86-106页 |
1 材料与方法 | 第87-91页 |
1.1 试验材料 | 第87页 |
1.2 大豆Pht1家族基因的氨基酸序列分析 | 第87-88页 |
1.3 GmPht1;1基因的启动子克隆和顺式作用元件分析 | 第88页 |
1.4 实时荧光定量PCR | 第88页 |
1.5 植物表达载体的构建 | 第88-90页 |
1.6 转基因烟草植株的获得及阳性植株的鉴定 | 第90页 |
1.7 T_1代转基因烟草植株的处理 | 第90页 |
1.8 转基因烟草植株鲜重、干重、总磷及有效磷含量的测定 | 第90页 |
1.9 转基因烟草植株光合参数的测定 | 第90-91页 |
2 结果与分析 | 第91-101页 |
2.1 GmPht1;1与家族其他成员的发生树分析 | 第91-93页 |
2.2 GmPht1;1的启动子克隆和序列分析 | 第93页 |
2.3 GmPht1;1基因的表达特征 | 第93-96页 |
2.4 植物表达载体的构建 | 第96页 |
2.5 转基因烟草的阳性鉴定 | 第96-97页 |
2.6 转基因植株的功能分析 | 第97-101页 |
3 讨论 | 第101-106页 |
3.1 GmPht1;1基因序列结构的保守性 | 第101-102页 |
3.2 GmPht1;1基因启动子区存在光响应和磷缺乏响应元件 | 第102页 |
3.3 GmPht1;1的表达受长期磷缺乏诱导,在植物体内Pi的转移过程中发挥作用 | 第102-103页 |
3.4 GmPht1;1基因的过量表达能提高转基因烟草植株的耐低磷能力 | 第103-106页 |
第六章 GmPht1;1基因的eQTL定位 | 第106-112页 |
1 材料与方法 | 第106-108页 |
1.1 试验材料 | 第106-107页 |
1.2 遗传图谱 | 第107页 |
1.3 试验设计 | 第107页 |
1.4 基因表达水平的测定 | 第107页 |
1.5 籽粒产量、光合速率及叶绿素a荧光参数测定 | 第107页 |
1.6 统计分析与eQTL定位方法 | 第107-108页 |
2 结果与分析 | 第108-110页 |
2.1 GmPht1;1基因表达量与籽粒产量、光合速率及叶绿素荧光参数的相关分析 | 第108页 |
2.2 GmPht1:1基因的eQTL分析 | 第108-110页 |
3 讨论 | 第110-112页 |
3.1 GmPht1;1基因的表达水平可能调节大豆植株的籽粒产量 | 第110页 |
3.2 GmPht1:1基因的表达水平由顺式eQTL和反式eQTL共同调控 | 第110-111页 |
3.3 GmPht1:1基因的eQTL在农作物育种上的应用 | 第111-112页 |
全文结论 | 第112-114页 |
本研究创新之处 | 第114-116页 |
参考文献 | 第116-140页 |
附录 | 第140-150页 |
攻读博士期间发表及待发表的论文 | 第150-152页 |
致谢 | 第152页 |