| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 缩略词 | 第8-9页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 功能性糖简述 | 第9页 |
| 1.2 双果糖酐的简介 | 第9-11页 |
| 1.2.1 双果糖酐的种类 | 第9-10页 |
| 1.2.2 双果糖酐的来源 | 第10页 |
| 1.2.3 DFA I的理化和生理功能 | 第10-11页 |
| 1.3 DFA I的生物转化研究 | 第11-12页 |
| 1.3.1 菊糖的简介 | 第11页 |
| 1.3.2 菊糖果糖转移酶简介 | 第11-12页 |
| 1.4 IFTase (DFA I-forming)的国内外研究进展 | 第12-15页 |
| 1.4.1 产IFTase (DFA I-forming)菌株研究进展 | 第12-13页 |
| 1.4.2 IFTase (DFA I-forming)性质对比 | 第13页 |
| 1.4.3 IFTase结构解析研究 | 第13-15页 |
| 1.5 本课题立题依据意义 | 第15-16页 |
| 1.6 本课题研究的主要内容 | 第16-17页 |
| 2 实验材料与方法 | 第17-28页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 主要的实验试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 培养基与化学试剂的配制 | 第18-19页 |
| 2.2.1 培养基的配制 | 第18页 |
| 2.2.2 相关试剂的配制 | 第18-19页 |
| 2.3 试验方法 | 第19-28页 |
| 2.3.1 链霉菌的培养 | 第19-20页 |
| 2.3.2 产物的纯化与鉴定 | 第20-21页 |
| 2.3.3 基因克隆 | 第21页 |
| 2.3.4 E. coli感受态细胞制备 | 第21页 |
| 2.3.5 基因重组菌的构建 | 第21页 |
| 2.3.6 基因重组菌的保藏 | 第21-22页 |
| 2.3.7 质粒的抽提制备 | 第22页 |
| 2.3.8 质粒的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第22页 |
| 2.3.9 基因重组菌的诱导表达 | 第22页 |
| 2.3.10 重组酶的分离纯化 | 第22页 |
| 2.3.11 SDS-PAGE凝胶电泳检测 | 第22-23页 |
| 2.3.12 高效凝胶色谱法测相对分子质量 | 第23页 |
| 2.3.13 重组酶蛋白含量的测定 | 第23页 |
| 2.3.14 重组酶的酶反应产物的纯化与鉴定 | 第23页 |
| 2.3.15 重组酶的酶学性质研究 | 第23-24页 |
| 2.3.16 定点突变研究 | 第24-28页 |
| 3 结果与讨论 | 第28-49页 |
| 3.1 S. davawensis SK 39.001 的培养 | 第28页 |
| 3.2 菌体反应产物的纯化与鉴定 | 第28-30页 |
| 3.2.1 菌体反应产物的纯化 | 第28-29页 |
| 3.2.2 菌体反应产物的鉴定 | 第29-30页 |
| 3.3 SdIFTase的基因序列和氨基酸序列对比分析 | 第30-33页 |
| 3.4 重组酶SdIFTase的分离纯化 | 第33-34页 |
| 3.5 重组酶SdIFTase的产物鉴定 | 第34-35页 |
| 3.6 重组酶SdIFTase的酶学性质 | 第35-41页 |
| 3.6.1 pH对SdIFTase酶活的影响 | 第35-36页 |
| 3.6.2 温度对SdIFTase酶活的影响 | 第36页 |
| 3.6.3 金属离子对SdIFTase酶活的影响 | 第36-37页 |
| 3.6.4 SdIFTase的温度稳定性的研究 | 第37-38页 |
| 3.6.5 SdIFTase动力学参数的研究 | 第38页 |
| 3.6.6 SdIFTase最小底物的分析 | 第38-39页 |
| 3.6.7 SdIFTase催化菊糖生产DFA I反应进程的研究 | 第39-40页 |
| 3.6.8 不同来源的IFTase酶学性质的比较 | 第40-41页 |
| 3.7 突变体的研究 | 第41-49页 |
| 3.7.1 突变体定点突变的研究 | 第41-42页 |
| 3.7.2 突变体的分离纯化 | 第42-43页 |
| 3.7.3 突变体的NanoDSC研究 | 第43-45页 |
| 3.7.4 突变体的相对酶活研究 | 第45-46页 |
| 3.7.5 单点突变体的分析 | 第46-47页 |
| 3.7.6 多点突变体的分析 | 第47-49页 |
| 主要结论与展望 | 第49-51页 |
| 主要结论 | 第49页 |
| 展望 | 第49-51页 |
| 致谢 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第59页 |
