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MIR-15B-5P在内皮细胞中介导ICAM-1调控FAK表达的研究

摘要第7-8页
Abstract第8-9页
中英文缩略表(Abbreviation)第10-11页
1 前言第11-18页
    1.1 研究问题的由来第11-12页
    1.2 文献综述第12-17页
        1.2.1 ICAM-1 分子结构及其功能第12-14页
        1.2.2 FAK分子结构和生物学功能第14-15页
        1.2.3 miR-15b简介第15-16页
        1.2.4 PRRS简介第16-17页
    1.3 研究目的和意义第17-18页
2 材料和方法第18-41页
    2.1 试验材料第18-24页
        2.1.1 动物材料第18页
        2.1.2 细胞系第18-19页
        2.1.3 主要仪器和试剂第19-20页
        2.1.4 主要试剂第20-23页
        2.1.5 引物序列第23-24页
    2.2 试验方法第24-40页
        2.2.1 采样第24-25页
        2.2.2 攻毒试验第25-27页
        2.2.3 细胞转染试验第27-28页
        2.2.4 总RNA提取方法第28-29页
        2.2.5 电泳检测RNA第29-30页
        2.2.6 RNA的逆转录第30页
        2.2.7 总蛋白提取方法第30页
        2.2.8 总蛋白浓度的测定方法第30-31页
        2.2.9 聚合酶链式反应(PCR)第31-32页
        2.2.10 实时荧光定量PCR(Real time-qPCR)第32页
        2.2.11 PCR产物的电泳检测第32-33页
        2.2.12 免疫印迹试验(Western blot)第33-34页
        2.2.13 免疫印迹膜再生第34-35页
        2.2.14 载体构建第35-39页
        2.2.15 双荧光素酶实验第39-40页
    2.3 统计学方法第40-41页
3 结果与分析第41-51页
    3.1 炎症环境下FAK的表达变化第41-44页
        3.1.1 Poly(I:C)模拟病毒刺激小鼠脑微血管内皮细胞(b.End.3)第41-42页
        3.1.2 LPS模拟细菌刺激小鼠脑微血管内皮细胞(b.End.3)第42页
        3.1.3 小鼠腹腔注射LPS,检测肺组织中FAK的表达变化第42-43页
        3.1.4 感染PRRSV的猪肺组织中FAK的表达变化第43-44页
    3.2 ICAM-1 基因敲除对FAK表达的影响第44-47页
        3.2.1 ICAM-1 siRNA转染b.End.3 细胞,FAK的表达变化第45-46页
        3.2.2 ICAM-1 基因敲除小鼠肺组织中FAK的表达变化第46-47页
    3.3 ICAM-1 通过miR-15b-5p调控FAK表达的研究第47-51页
        3.3.1 ICAM-1 敲除小鼠肺组织以及转染ICAM-1 siRNA的b.End.3 细胞中miR-15b-5p的表达第47-48页
        3.3.2 FAK 3’UTR双荧光素酶报告载体的构建第48-49页
        3.3.3 miR-15b-5p靶向FAK 3’UTR区的双荧光素酶实验验证第49-50页
        3.3.4 分别转染miR-15b-5p inhibitor和mimics至b.End.3 细胞,检测FAK表达变化第50-51页
4 讨论第51-55页
    4.1 炎症环境下FAK的表达变化第51-52页
    4.2 ICAM-1 基因敲除对FAK表达的影响第52-53页
    4.3 ICAM-1 通过miR-15b-5p调控FAK表达的研究第53-55页
        4.3.1 敲除ICAM-1 促进miR-15b-5p的表达第53页
        4.3.2 过表达miR-15b-5p抑制FAK的表达第53-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-65页
致谢第65-66页

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