| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| ·核酸酶与解离酶研究进展 | 第12-16页 |
| ·核酸酶与解离酶介绍 | 第12页 |
| ·解离酶的研究进展 | 第12-16页 |
| ·解离酶的结构和催化机制 | 第16-18页 |
| ·解离酶的作用特点及分类 | 第16-17页 |
| ·解离酶的晶体结构 | 第17-18页 |
| ·Rad2/XPG 蛋白家族的研究进展 | 第18-21页 |
| ·XPG/classⅠ功能 | 第18-19页 |
| ·FEN1/classⅡ功能 | 第19-20页 |
| ·EXO1/classⅢ功能 | 第20页 |
| ·SEND1/classⅣ功能 | 第20-21页 |
| ·人类 GEN1 的催化机制研究 | 第21-22页 |
| ·解离酶的多功能性及应用 | 第22-23页 |
| ·本论文的研究内容及意义 | 第23-25页 |
| 第二章 拟南芥 GEN1-like 基因的克隆 | 第25-34页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·宿主菌、克隆载体及分子生物学试剂 | 第25页 |
| ·主要培养基及试剂 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-27页 |
| ·拟南芥花期 RNA 的提取和 cDNA 第一链的合成 | 第25-26页 |
| ·AtGEN1-like 基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·AtGEN1 的组织特异性分析 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-32页 |
| ·AtGEN1-like 基因的扩增 | 第27-28页 |
| ·AtGEN1 的组织特异性分析 | 第28-29页 |
| ·AtGEN1 序列和结构域分析 | 第29-30页 |
| ·AtGEN1-like 与其他 Rad2/XPG 家族蛋白成员的聚类分析 | 第30-31页 |
| ·AtGEN1 的进化分析 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 AtGEN1-like 基因的原核表达、纯化及活性研究 | 第34-51页 |
| ·材料 | 第34-38页 |
| ·目的基因 | 第34页 |
| ·宿主菌、表达载体及分子生物学试剂 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-37页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-43页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第38-40页 |
| ·AtGEN1-like 基因的诱导表达及亲和纯化 | 第40页 |
| ·AtGEN1-His 的 Western bloting 鉴定 | 第40-41页 |
| ·AtGEN1-His 活性鉴定 | 第41-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-49页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第43-44页 |
| ·融合蛋白的表达纯化分析及 AtGEN1 的 Western bloting 分析 | 第44-45页 |
| ·AtGEN1-His 酶活性的检测 | 第45-49页 |
| ·AtGEN1-His 的离子依赖性 | 第45-46页 |
| ·AtGEN1-His 的最佳作用温度 | 第46页 |
| ·AtGEN1-His 对 5’-flap 结构的酶活力分析 | 第46-47页 |
| ·AtGEN1-His 对底物复制叉（RF）结构的酶活力分析 | 第47-48页 |
| ·AtGEN1-His 对双链 DNA（pUC19）结构拆分活性 | 第48页 |
| ·AtGEN1-His 对 X0、J3 结构的拆分活性 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 ΔcAtGEN1 的原核表达、纯化及活性研究 | 第51-56页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·目的基因 | 第51页 |
| ·宿主菌、表达载体及分子生物学试剂 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·ΔcAtGEN1 重组表达载体的构建与鉴定 | 第51-52页 |
| ·ΔcAtGEN1 诱导表达及亲和纯化 | 第52页 |
| ·ΔcAtGEN1 活性鉴定 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-55页 |
| ·ΔcAtGEN1 重组载体的鉴定 | 第52-53页 |
| ·ΔcAtGEN1 融合蛋白的表达纯化分析 | 第53-54页 |
| ·ΔcAtGEN1 融合蛋白的酶活力分析 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| 第五章 拟南芥 GEN1-like 基因 T-DNA 插入突变体的筛选 | 第56-60页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·主要试剂、仪器 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-57页 |
| ·突变体筛选相关的引物设计 | 第56-57页 |
| ·拟南芥 GEN1-like 基因纯合突变体的筛选 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| 第六章 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69页 |
