摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
缩略语表 | 第6-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-17页 |
1. Cathepsin概述 | 第9-15页 |
1.1 Cathepsin的分类与性质 | 第9-10页 |
1.2 Cathepsin的合成途径与激活 | 第10-11页 |
1.3 Cathepsin的分子结构 | 第11-13页 |
1.4 Cathepsin的功能 | 第13-15页 |
2. 本研究的目的和意义 | 第15-17页 |
第二章 cpCathL和cpCathB基因的克隆、表达及特征分析 | 第17-59页 |
1. 材料和方法 | 第17-30页 |
1.1 材料 | 第17-18页 |
1.2 主要仪器 | 第18页 |
1.3 主要试剂及菌株 | 第18-19页 |
1.4 实验方法 | 第19-30页 |
1.4.1 肝胰腺总RNA的提取 | 第19页 |
1.4.2 SMART cDNA的合成 | 第19-20页 |
1.4.3 感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
1.4.4 cpCathL和cpCathB cDNA全长的克隆 | 第21-23页 |
1.4.5 cpCathL基因组的扩增 | 第23页 |
1.4.6 序列鉴定与分析 | 第23-25页 |
1.4.7 Real time PCR检测cpCathL和cpCathB的组织分布 | 第25-26页 |
1.4.8 Real time PCR检测嗜水气单胞菌刺激对cpCathL和cpCathB表达的影响 | 第26页 |
1.4.9 cpCathL和cpCathB基因的原核表达 | 第26-29页 |
1.4.10 重组蛋白的纯化和多克隆抗体的制备 | 第29页 |
1.4.11 ELISA测定重组cpCathL和cpCathB抗血清的效价 | 第29-30页 |
2 结果 | 第30-55页 |
2.1 褶纹冠蚌肝胰腺中总RNA得纯度 | 第30-31页 |
2.2 cpCathL和cpCathB基因cDNA序列全长 | 第31页 |
2.3 cpCathL和cpCathB基因的cDNA全长分析及序列鉴定 | 第31-35页 |
2.4 cpCathL和cpCathB基因的同源性分析 | 第35-39页 |
2.5 基于推导的cpCathL和cpCathB氨基酸序列建立的进化树分析 | 第39-41页 |
2.6 cpCathL的基因组结构 | 第41-47页 |
2.7 cpCathL和cpCathB的组织分布 | 第47页 |
2.8 嗜水汽单胞菌刺激后cpCathL和cpCathB在血细胞、肝胰腺、鳃中的表达 | 第47-51页 |
2.9 cpCathL和cpCathB基因cDNA的原核表达 | 第51-54页 |
2.10 ELISA测定重组cpCath L和cpCath B抗血清的效价 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-59页 |
结论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第70页 |