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荔枝落果过程中IAA和ABA相关基因表达及其定量检测初探

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩略词对照表第6-12页
1 前言第12-22页
    1.1 植物内源激素与器官脱落第12-13页
    1.2 生长素信号转导基因第13-16页
        1.2.1 生长素原初反应基因第13-15页
        1.2.2 生长素响应因子ARF(Auxin response factor)第15页
        1.2.3 生长素抑制蛋白ARP(Auxin-repressed protein)第15-16页
        1.2.4 生长素外排运输载体PIN(Auxin efflux carrier component)第16页
    1.3 脱落酸生物合成基因第16-17页
    1.4 植物内源激素定量检测的发展第17-21页
        1.4.1 内源激素的提取第17-18页
        1.4.2 样品的纯化第18页
        1.4.3 样品的浓缩与复溶第18页
        1.4.4 检测方法第18-19页
        1.4.5 果树内源激素定量检测的研究第19-21页
    1.5 研究目的与意义第21-22页
2 材料与方法第22-33页
    2.1 实验试剂和设备第22-24页
        2.1.1 实验试剂及来源第22页
        2.1.2 实验设备及来源第22-24页
    2.2 荔枝落果过程中IAA、ABA相关基因的荧光定量表达分析第24-27页
        2.2.1 供试材料及处理第24页
        2.2.2 荧光定量RNA的提取、检测与模板的合成第24-25页
            2.2.2.1 荔枝离区RNA的提取第24-25页
            2.2.2.2 RNA浓度的测定第25页
            2.2.2.3 RNA质量的检验第25页
            2.2.2.4 RNA反转录合成c DNA第一条链第25页
        2.2.3 内参基因的选定第25-26页
        2.2.4 IAA、ABA相关基因的筛选第26页
        2.2.5 荧光定量的引物设计与检测第26页
            2.2.5.1 引物设计第26页
            2.2.5.2 熔解曲线分析第26页
        2.2.6 q RT-PCR分析第26-27页
    2.3 IAA信号转导和ABA生物合成蛋白家族系统进化树的构建第27页
    2.4 GC-MS定量检测IAA和ABA含量初探第27-33页
        2.4.1 供试材料及处理第27页
        2.4.2 前处理方法初探第27-31页
            2.4.2.1 标准品的前处理第28页
            2.4.2.2 样品的前处理第28-31页
        2.4.3 气相色谱与质谱条件第31-32页
        2.4.4 内源激素含量的计算方法第32页
        2.4.5 加标回收率的计算方法第32-33页
    2.5 统计分析第33页
3 结果与分析第33-60页
    3.1 不同处理对‘妃子笑’荔枝幼果脱落的影响第33-34页
    3.2 筛选的IAA和ABA相关基因的荧光定量表达第34-46页
        3.2.1 荔枝离区RNA的质量检验第34-35页
        3.2.2 荧光定量引物的设计和优化第35-40页
        3.2.3 筛选基因的荧光定量表达分析第40-46页
            3.2.3.1 IAA相关基因的表达第40-44页
            3.2.3.2 ABA相关基因的表达第44-46页
    3.3 IAA信号转导和ABA生物合成蛋白家族系统进化分析第46-55页
        3.3.1 IAA信号转导蛋白CDS序列聚类分析第46-52页
        3.3.2 ABA生物合成蛋白CDS序列聚类分析第52-55页
    3.4 GC-MS检测方法初探第55-60页
        3.4.1 标准样品全谱图第55-56页
        3.4.2 标准曲线第56-57页
        3.4.3 三种前处理方法检测结果比较第57-58页
        3.4.4 前处理过程中不同步骤添加标样对检测结果的影响第58-60页
4 讨论第60-67页
    4.1 饥饿胁迫和植物生长调节剂与果实脱落第60-61页
    4.2 荔枝落果过程中IAA和ABA相关基因的表达第61-65页
        4.2.1 生长素信号转导与果实脱落第61-64页
        4.2.2 脱落酸生物合成与果实脱落第64-65页
    4.3 植物内源激素的GC-MS定量检测初探第65-67页
5 结论第67-68页
致谢第68-69页
参考文献第69-81页

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