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重组IBDV-VP2活载体乳酸菌疫苗菌株的构建和侵入能力检测

摘要第5-6页
Abstract第6页
英文缩略表第10-11页
引言第11-12页
第一章:文献综述第12-25页
    1.1 鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)概述第12-18页
        1.1.1 IBDV的病原学特征第12-13页
        1.1.2 IBDV的分子生物学特征第13-15页
        1.1.3 IBDV的防控第15页
        1.1.4 IBDV相关疫苗的研究第15-18页
    1.2 乳酸菌作为口服疫苗递呈载体概述第18-21页
        1.2.1 乳酸菌益生特性第19-20页
        1.2.2 乳酸乳球菌表达系统第20页
        1.2.3 乳酸菌免疫调节功能第20-21页
        1.2.4 乳酸菌作为活载体疫苗的研究进展第21页
    1.3 鼠伤寒沙门氏菌侵袭蛋白RCK蛋白概述第21-23页
    1.4 研究目的及意义第23-25页
第二章:鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白重组乳酸乳球菌L.Lactis-VP2的构建及表达第25-41页
    2.1 材料第25-26页
        2.1.1 质粒及菌株第25页
        2.1.2 主要试剂第25页
        2.1.3 主要仪器第25页
        2.1.4 主要溶剂及配制第25-26页
    2.2 方法第26-32页
        2.2.1 L.Lactis-VP2重组表达载体的构建第26-30页
        2.2.2 重组质粒的鉴定第30页
        2.2.3 重组乳酸菌VP2蛋白的表达及分析第30-32页
    2.3 结果与分析第32-39页
        2.3.1 目的片段PCR扩增结果第32-33页
        2.3.2 目的片段和pNZ8149载体质粒的酶切结果第33-34页
        2.3.3 重组质粒的鉴定结果第34-35页
        2.3.4 SDS-PAGE及Western blot检测重组VP2蛋白表达结果第35-36页
        2.3.5 重组VP2蛋白表达位置的检测结果第36页
        2.3.6 重组VP2蛋白表达含量的测定结果第36-37页
        2.3.7 重组VP2蛋白表达条件的优化结果第37-38页
        2.3.8 密码子优化前后表达效果的对比结果第38页
        2.3.9 重组VP2蛋白稳定性的测定结果第38-39页
    2.4 讨论第39-41页
第三章:鼠伤寒沙门氏菌RCK蛋白重组乳酸乳球菌L.Lactis-RCK的构建和表达及粘附细胞能力的检测第41-55页
    3.1 材料第41-42页
        3.1.1 细胞、质粒及菌株第41页
        3.1.2 主要试剂第41页
        3.1.3 主要仪器第41-42页
        3.1.4 主要溶剂及配制第42页
    3.2 方法第42-47页
        3.2.1 L.Lactis-RCK重组表达载体的构建第42-44页
        3.2.2 重组质粒的鉴定第44-45页
        3.2.3 重组乳酸菌RCK蛋白的表达及分析第45-46页
        3.2.4 重组RCK乳酸菌细胞粘附性实验第46-47页
    3.3 结果与分析第47-53页
        3.3.1 RCK蛋白基因片段PCR扩增结果第47页
        3.3.2 RCK蛋白基因和pNZ8149载体质粒的酶切结果第47-48页
        3.3.3 重组质粒的鉴定结果第48-49页
        3.3.4 SDS-PAGE及Western blot检测重组RCK蛋白表达结果第49-50页
        3.3.5 重组RCK蛋白表达位置的检测结果第50-51页
        3.3.6 重组RCK乳酸菌细胞粘附性和侵入第51-52页
        3.3.7 激光共聚焦显微镜观察重组RCK乳酸菌细胞粘附和侵入第52-53页
    3.4 讨论第53-55页
第四章: RCK蛋白和VP2蛋白融合表达重组L.Lactis-VP2-RCK乳酸乳球菌的构建和表达及粘附细胞能力的检测第55-69页
    4.1 材料第55-56页
        4.1.1 质粒及菌株第55页
        4.1.2 主要试剂第55页
        4.1.3 主要仪器第55-56页
    4.2 方法第56-60页
        4.2.1 L.Lactis-VP2-RCK重组表达载体的构建第56-58页
        4.2.2 重组质粒的鉴定第58页
        4.2.3 重组乳酸菌VP2-RCK融合蛋白的表达及分析第58-59页
        4.2.4 重组L.Lactis-VP2-RCK乳酸菌细胞粘附性实验第59-60页
    4.3 结果与分析第60-67页
        4.3.1 VP2片段PCR扩增结果第60-61页
        4.3.2 VP2片段和L.Lactis-RCK载体质粒的酶切结果第61-62页
        4.3.3 重组质粒的鉴定结果第62-63页
        4.3.4 SDS-PAGE及Western blot检测重组VP2-RCK融合蛋白表达结果第63-64页
        4.3.5 重组VP2-RCK融合蛋白表达位置的检测结果第64页
        4.3.6 重组VP2蛋白表达含量的测定结果第64页
        4.3.7 重组VP2-RCK蛋白稳定性的测定结果第64-65页
        4.3.8 重组RCK乳酸菌细胞粘附性和侵入第65页
        4.3.9 激光共聚焦显微镜观察重组VP2-RCK乳酸菌细胞粘附和侵入第65-67页
        4.3.10 扫描电子显微镜观察重组L.Lactis-VP2-RCK乳酸菌细胞粘附和侵入第67页
    4.4 讨论第67-69页
全文结论第69页
创新点第69-70页
参考文献第70-77页
致谢第77-78页
作者简历第78-79页
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表第79页

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