中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
引言 | 第9-13页 |
材料和方法 | 第13-22页 |
2.1 实验材料 | 第13-14页 |
2.1.1 标本及细胞系 | 第13页 |
2.1.2 主要试剂与材料 | 第13页 |
2.1.3 主要仪器与设备 | 第13-14页 |
2.1.4 主要抗体 | 第14页 |
2.2 实验方法 | 第14-22页 |
2.2.1 细胞培养 | 第14页 |
2.2.2 建立pAPC~(NK)细胞系 | 第14-18页 |
2.2.2.1 mbIL21质粒构建 | 第14-18页 |
2.2.2.2 慢病毒包装 | 第18页 |
2.2.2.3 慢病毒转染pAPC细胞 | 第18页 |
2.2.3 慢病毒浓缩 | 第18-19页 |
2.2.4 慢病毒滴度测定 | 第19页 |
2.2.5 分离并制备淋巴细胞单细胞悬液 | 第19-20页 |
2.2.6 NK细胞体外激活 | 第20页 |
2.2.7 表型分析(流式分析) | 第20页 |
2.2.8 慢病毒感染T/NK细胞 | 第20-21页 |
2.2.9 细胞杀伤试验 | 第21页 |
2.2.10 统计学分析 | 第21-22页 |
结果 | 第22-34页 |
3.1 IL21/p CDH-CMV-MCS-EF1-Cop GFP分子构建 | 第22-24页 |
3.2 IL21/p CDH-CMV-MCS-EF1-Cop GFP慢病毒包装 | 第24页 |
3.3 IL21/p CDH-CMV-MCS-EF1-Cop GFP慢病毒感染pAPC细胞 | 第24-25页 |
3.4 不同浓度IL2对NK细胞扩增表型的影响 | 第25-26页 |
3.5 不同浓度IL2对NK细胞扩增倍数的影响 | 第26页 |
3.6 不同样本NK细胞体外扩增效率 | 第26-27页 |
3.7 NK细胞对肿瘤细胞的杀伤效果 | 第27-28页 |
3.8 CAR-T/CAR-NK技术建立 | 第28-34页 |
3.8.1 HER2-CAR-pCDH重组质粒的构建 | 第28-30页 |
3.8.2 HER2-CAR慢病毒的包装和测定 | 第30-31页 |
3.8.3 HER2-CAR-T技术体系的建立 | 第31-33页 |
3.8.4 HER2-CAR-NK技术体系的建立 | 第33-34页 |
讨论 | 第34-37页 |
参考文献 | 第37-43页 |
综述 | 第43-57页 |
参考文献 | 第50-57页 |
硕士期间科研成果 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-60页 |