| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-27页 |
| 1.1 大肠杆菌的流行性及耐药现状 | 第13-15页 |
| 1.1.1 大肠杆菌的流行性 | 第13-14页 |
| 1.1.2 大肠杆菌的耐药现状 | 第14-15页 |
| 1.2 氟喹诺酮类药物研究现状 | 第15-16页 |
| 1.2.1 氟喹诺酮类药物的发展史 | 第15页 |
| 1.2.2 大肠杆菌对氟喹诺酮类耐药机制研究 | 第15-16页 |
| 1.3 氟喹诺酮类药物的耐药机制研究进展 | 第16-23页 |
| 1.3.1 靶基因突变 | 第17-18页 |
| 1.3.2 主动外排系统 | 第18-20页 |
| 1.3.3 膜通透性降低 | 第20页 |
| 1.3.4 质粒介导的氟喹诺酮类耐药 | 第20-23页 |
| 1.4 耐药细菌对抗菌药物敏感性恢复研究 | 第23-26页 |
| 1.4.1 耐药质粒消除 | 第23-24页 |
| 1.4.2 促进药物进入菌体 | 第24-25页 |
| 1.4.3 细菌的适合度代价 | 第25-26页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第26-27页 |
| 2 试验材料 | 第27-31页 |
| 2.1 菌株 | 第27-28页 |
| 2.2 质控菌株 | 第28页 |
| 2.3 试剂及仪器 | 第28-31页 |
| 2.3.1 培养基及配制 | 第28-29页 |
| 2.3.2 主要试剂及配置 | 第29页 |
| 2.3.3 试验药物及规格 | 第29-30页 |
| 2.3.4 主要仪器 | 第30-31页 |
| 3 试验方法 | 第31-43页 |
| 3.1 猪源大肠杆菌的分离与鉴定 | 第31页 |
| 3.2 大肠杆菌保种备用 | 第31-32页 |
| 3.3 喹诺酮类药物对猪源耐药大肠杆菌MIC的测定 | 第32-34页 |
| 3.3.1 抗菌药物储存液以及工作液的制备 | 第32-33页 |
| 3.3.2 细菌的活化和稀释 | 第33页 |
| 3.3.3 MIC值测定 | 第33页 |
| 3.3.4 结果判读 | 第33-34页 |
| 3.4 野生型耐药大肠杆菌的敏感性恢复研究 | 第34-35页 |
| 3.4.1 传代对耐药大肠杆菌敏感性恢复的影响 | 第34页 |
| 3.4.2 不同营养水平传代对耐药大肠杆菌敏感性恢复的影响 | 第34-35页 |
| 3.4.3 不同耐药/敏感菌混合比例传代对大肠杆菌敏感性恢复的影响 | 第35页 |
| 3.5 诱导耐药大肠杆菌敏感性恢复研究 | 第35-36页 |
| 3.5.1 敏感大肠杆菌的诱导耐药 | 第35页 |
| 3.5.2 耐药菌的敏感性恢复 | 第35-36页 |
| 3.5.3 敏感菌、诱导耐药菌和敏感性恢复细菌生长曲线的测定 | 第36页 |
| 3.6 氟喹诺酮类药物部分耐药基因的检测及分析 | 第36-40页 |
| 3.6.1 引物的选择 | 第36-37页 |
| 3.6.2 总DNA提取 | 第37-38页 |
| 3.6.3 PCR检测PMQR耐药基因 | 第38-40页 |
| 3.6.4 PCR产物测序及分析 | 第40页 |
| 3.6.5 GyrA和ParC耐药基因的测序分析 | 第40页 |
| 3.7 大肠杆菌GyrA和qnrB耐药基因的转移研究 | 第40-43页 |
| 3.7.1 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第40页 |
| 3.7.2 PCR检测质粒中GyrA和qnrB耐药基因 | 第40-41页 |
| 3.7.3 qnr B耐药基因的接合实验研究 | 第41-43页 |
| 4 结果与分析 | 第43-61页 |
| 4.1 普通传代前后大肠杆菌的MIC | 第43-47页 |
| 4.2 不同营养水平传代前后耐药大肠杆菌MIC | 第47-51页 |
| 4.3 不同的耐药/敏感菌混合比例下传代前后耐药大肠杆菌MIC | 第51-54页 |
| 4.4 诱导耐药大肠杆菌敏感性恢复实验结果 | 第54-57页 |
| 4.5 细菌生长曲线测定 | 第57页 |
| 4.6 PMQR和gyrA耐药基因检测结果 | 第57-61页 |
| 4.6.1 普通传代前后PMQR耐药基因检测 | 第57页 |
| 4.6.2 不同条件下传代培养前后PMQR耐药基因的检测 | 第57-59页 |
| 4.6.3 敏感菌、耐药菌和恢复敏感性细菌耐药基因的检测 | 第59-60页 |
| 4.6.4 耐药基因gyrA和parC的突变情况 | 第60-61页 |
| 4.6.5 耐药基因qnrB接合阳性菌株药敏试验结果 | 第61页 |
| 5 讨论 | 第61-65页 |
| 5.1 普通条件下传代培养对耐药大肠杆菌敏感性恢复的影响 | 第62页 |
| 5.2 营养条件对耐药大肠杆菌敏感性恢复的影响 | 第62-63页 |
| 5.3 敏感菌的竞争抑制对耐药大肠杆菌敏感性恢复的影响 | 第63-64页 |
| 5.4 诱导耐药大肠杆菌敏感性恢复情况 | 第64-65页 |
| 5.5 gyrA和qnrB耐药基因的连接转化 | 第65页 |
| 6 结论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-78页 |
| 附录Ⅰ | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
