| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 绪论 | 第13-23页 |
| 1.1 高果糖浆概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 高果糖浆的简介 | 第13页 |
| 1.1.2 高果糖浆的类别和国内外前景 | 第13-14页 |
| 1.1.3 高果糖浆的生产方法 | 第14-16页 |
| 1.2 葡萄糖异构酶概述 | 第16-20页 |
| 1.2.1 葡萄糖异构酶简述与来源 | 第16页 |
| 1.2.2 葡萄糖异构酶的性质 | 第16-17页 |
| 1.2.3 葡萄糖异构酶的应用 | 第17-18页 |
| 1.2.4 葡萄糖异构酶的分类、结构及其催化机制 | 第18-19页 |
| 1.2.5 葡萄糖异构酶的分子改造研究 | 第19-20页 |
| 1.3 本论文研究意义和主要内容 | 第20-23页 |
| 1.3.1 本论文研究意义 | 第20页 |
| 1.3.2 本论文研究内容 | 第20-23页 |
| 第二章 耐高温葡萄糖异构酶基因的筛选与酶学性质研究 | 第23-39页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 材料与方法 | 第23-28页 |
| 2.2.1 菌种及培养基 | 第23-24页 |
| 2.2.2 实验仪器及试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第25-28页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第28-37页 |
| 2.3.1 葡萄糖异构酶基因的挖掘和序列分析 | 第28-29页 |
| 2.3.2 葡萄糖异构酶密码子优化与合成 | 第29-31页 |
| 2.3.3 重组葡萄糖异构酶的异源表达和酶活力分析 | 第31-32页 |
| 2.3.4 ToGI和TsGI的分离纯化 | 第32-33页 |
| 2.3.5 金属离子对TsGI和ToGI活力的影响 | 第33-34页 |
| 2.3.6 温度对TsGI和ToGI活力的影响和热稳定性研究 | 第34-35页 |
| 2.3.7 pH对TsGI和ToGI活力和稳定性的影响 | 第35-36页 |
| 2.3.8 TsGI和ToGI的动力学参数 | 第36-37页 |
| 2.4 本章小结 | 第37-39页 |
| 第三章 耐高温葡萄糖异构酶重组菌发酵与转化条件优化 | 第39-51页 |
| 3.1 前言 | 第39页 |
| 3.2 材料与方法 | 第39-42页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第39页 |
| 3.2.2 仪器与设备 | 第39-40页 |
| 3.2.3 发酵产酶条件优化 | 第40页 |
| 3.2.4 转化条件的优化 | 第40-41页 |
| 3.2.5 葡萄糖异构酶酶活测定 | 第41页 |
| 3.2.6 HPLC分析D-果糖和D-葡萄糖含量 | 第41页 |
| 3.2.7 D-果糖产率的计算 | 第41页 |
| 3.2.8 统计分析 | 第41-42页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第42-49页 |
| 3.3.1 确定最佳诱导温度 | 第42页 |
| 3.3.2 确定最佳诱导剂用量 | 第42-43页 |
| 3.3.3 确定发酵培养基中Mn~(2+)的添加量 | 第43-44页 |
| 3.3.4 确定转化体系Mn~(2+)浓度 | 第44-45页 |
| 3.3.5 确定最佳转化温度 | 第45页 |
| 3.3.6 确定最佳转化pH | 第45-46页 |
| 3.3.7 确定最佳底物浓度 | 第46-47页 |
| 3.3.8 确定最佳催化剂量 | 第47-48页 |
| 3.3.9 小规模转化体系研究 | 第48-49页 |
| 3.4 本章小结 | 第49-51页 |
| 第四章 耐高温葡萄糖异构酶的分子改造 | 第51-61页 |
| 4.1 引言 | 第51页 |
| 4.2 材料与方法 | 第51-54页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第51-52页 |
| 4.2.2 仪器与设备 | 第52页 |
| 4.2.3 实验方法 | 第52-54页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第54-60页 |
| 4.3.1 分子建模 | 第54-55页 |
| 4.3.2 突变位点的选择 | 第55-57页 |
| 4.3.3 定点突变技术PCR扩增结果 | 第57页 |
| 4.3.4 突变体的发酵和酶活测定 | 第57-58页 |
| 4.3.5 分子对接和结果分析 | 第58-60页 |
| 4.4 本章小结 | 第60-61页 |
| 第五章 结论与展望 | 第61-63页 |
| 5.1 结论 | 第61-62页 |
| 5.2 展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文与专利情况 | 第73页 |
