| 附件 | 第3-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-20页 |
| 1.1 病原学特征 | 第13页 |
| 1.2 生活史 | 第13-14页 |
| 1.3 传播媒介 | 第14页 |
| 1.4 裂殖体感染细胞的体外培养及生物学特性 | 第14-15页 |
| 1.5 环形泰勒虫转化宿主细胞信号通路的研究进展 | 第15-19页 |
| 1.5.1 ISG化通路 | 第16页 |
| 1.5.2 NF-κB信号通路 | 第16-17页 |
| 1.5.3 TGF-β/smad信号通路 | 第17页 |
| 1.5.4 Rb/E2F信号通路 | 第17-18页 |
| 1.5.5 JNK、PI-3K及转录因子c-Myc等参与的信号通路调控 | 第18页 |
| 1.5.6 环形泰勒虫蛋白参与的细胞调控 | 第18-19页 |
| 1.6 研究内容和方法 | 第19-20页 |
| 第二章 环形泰勒虫TaSDP基因的原核表达及TaSDP蛋白多克隆抗体的制备 | 第20-29页 |
| 2.1 材料 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 环形泰勒虫TaSDP预测蛋白序列的生物信息学分析 | 第20页 |
| 2.2.2 环形泰勒虫裂殖体感染细胞的基因组DNA的提取，总RNA的提取，DNA酶处理及反转录 | 第20-21页 |
| 2.2.3 TaSDP基因引物设计与合成 | 第21页 |
| 2.2.4 TaSDP基因的PCR扩增及基因克隆 | 第21页 |
| 2.2.5 原核表达载体的构建 | 第21-22页 |
| 2.2.6 融合蛋白His-TaSDP的诱导表达与可溶性分析 | 第22页 |
| 2.2.7 重组蛋白的纯化 | 第22-23页 |
| 2.2.8 兔源抗体的制备、特异性及抗体效价的测定 | 第23页 |
| 2.3 结果 | 第23-28页 |
| 2.3.1 环形泰勒虫TaSDP预测蛋白序列的生物信息学分析 | 第23-24页 |
| 2.3.2 TaSDP基因的扩增、克隆及测序 | 第24-25页 |
| 2.3.3 融合蛋白的诱导表达、可溶性分析及纯化 | 第25-26页 |
| 2.3.4 多克隆抗体的鉴定及效价的测定 | 第26-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 第三章 TaSDP蛋白在环形泰勒虫感染细胞中的定位 | 第29-34页 |
| 3.1 材料 | 第29页 |
| 3.2 方法 | 第29-31页 |
| 3.2.1 TaSDP蛋白兔源多克隆抗体的纯化 | 第29-30页 |
| 3.2.2 牛外周血单个核细胞的分离 | 第30页 |
| 3.2.3 细胞爬片的制备 | 第30页 |
| 3.2.4 间接免疫荧光最佳工作条件的摸索 | 第30页 |
| 3.2.5 间接免疫荧光实验 | 第30-31页 |
| 3.2.6 TaSDP蛋白的细胞定位 | 第31页 |
| 3.3 结果 | 第31-32页 |
| 3.3.1 TaSDP蛋白兔源多克隆抗体的纯化 | 第31页 |
| 3.3.2 间接免疫荧光最佳工作条件的确定 | 第31页 |
| 3.3.3 激光共聚焦分析 | 第31-32页 |
| 3.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第四章 环形泰勒虫TaSDP蛋白对细胞内NF-κB转录活性的影响 | 第34-42页 |
| 4.1 材料 | 第35页 |
| 4.2 方法 | 第35-37页 |
| 4.2.1 重组质粒pCAGGS-TaSDP质粒的构建 | 第35页 |
| 4.2.2 质粒的大量提取（碱性抽提法） | 第35-36页 |
| 4.2.3 脂质体2000介导的质粒转染 | 第36页 |
| 4.2.4 TaSDP蛋白表达情况的检测 | 第36页 |
| 4.2.5 双荧光素酶活性检测 | 第36页 |
| 4.2.6 环形泰勒虫感染细胞电转染实验 | 第36-37页 |
| 4.3 结果 | 第37-41页 |
| 4.3.1 重组载体pCAGGS-TaSDP的鉴定 | 第37-38页 |
| 4.3.2 TaSDP蛋白在HEK293T细胞内表达的验证 | 第38页 |
| 4.3.3 双荧光素酶活性检测 | 第38-40页 |
| 4.3.4 电压对萤火虫荧光强度的影响 | 第40页 |
| 4.3.5 电转缓冲液的种类对荧光素荧光强度的影响 | 第40-41页 |
| 4.4 讨论 | 第41-42页 |
| 第五章 全文结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简历 | 第50页 |
