摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1.1 生物固氮 | 第12页 |
1.2 豆科植物—根瘤菌共生系统 | 第12-17页 |
1.2.1 根瘤的形成 | 第12-14页 |
1.2.2 根瘤的类型 | 第14-15页 |
1.2.3 豆科植物共生结瘤的分子基础 | 第15-17页 |
1.3 翻译控制肿瘤蛋白 | 第17页 |
1.4 蒺藜苜蓿与根瘤菌共生互作的研究现状 | 第17-18页 |
1.5 植物基因功能研究技术 | 第18页 |
1.6 研究的目的意义与技术路线 | 第18-20页 |
1.6.1 目的与意义 | 第18-19页 |
1.6.2 技术路线 | 第19-20页 |
第二章 MTR_1g083380基因的亚细胞定位 | 第20-27页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 实验材料、试剂和仪器 | 第20页 |
2.2.1 实验材料 | 第20页 |
2.2.2 实验试剂 | 第20页 |
2.2.3 实验仪器 | 第20页 |
2.3 实验方法 | 第20-24页 |
2.3.1 亚细胞定位载体的构建 | 第20-22页 |
2.3.2 基因枪转化洋葱表皮细胞 | 第22-24页 |
2.4 结果与分析 | 第24-26页 |
2.4.1 亚细胞定位载体的构建 | 第24-25页 |
2.4.2 MTR_1g083380亚细胞定位结果与分析 | 第25-26页 |
2.5 讨论 | 第26-27页 |
第三章 MTR_1g083380基因的RNA沉默和过表达 | 第27-59页 |
3.1 引言 | 第27页 |
3.2 实验材料、试剂和仪器 | 第27页 |
3.2.1 实验材料 | 第27页 |
3.2.2 试剂与配方 | 第27页 |
3.2.3 实验仪器 | 第27页 |
3.3 实验方法 | 第27-35页 |
3.3.1 RNAi载体的构建 | 第27-29页 |
3.3.2 过量表达载体的构建 | 第29-30页 |
3.3.3 重组质粒电转化发根农杆菌K599 | 第30页 |
3.3.4 蒺藜苜蓿的转化体系 | 第30-31页 |
3.3.5 实验结果鉴定 | 第31-32页 |
3.3.6 MTR_1g083380基因表达分析 | 第32-33页 |
3.3.7 蒺藜苜蓿根瘤石蜡切片的制作及观察 | 第33-35页 |
3.3.8 根瘤透射电镜样品的制作及观察 | 第35页 |
3.4 结果与分析 | 第35-57页 |
3.4.1 目的基因的扩增结果 | 第35-36页 |
3.4.2 RNAi载体的构建 | 第36-37页 |
3.4.3 过量表达载体的构建 | 第37-38页 |
3.4.4 转化苗植株的表型观察 | 第38-41页 |
3.4.5 干扰及过表达效率检测 | 第41-44页 |
3.4.6 转化苗植株表型和根瘤的形态 | 第44-52页 |
3.4.7 根瘤显微结构观察 | 第52-57页 |
3.5 讨论 | 第57-59页 |
第四章 MTR_1g083380启动子融合载体的构建 | 第59-64页 |
4.1 引言 | 第59页 |
4.2 实验材料、仪器 | 第59页 |
4.2.1 实验材料 | 第59页 |
4.2.2 试剂与配方 | 第59页 |
4.2.3 实验仪器 | 第59页 |
4.3 实验方法 | 第59-61页 |
4.3.1 MTR_1g083380启动子::GUS融合载体的构建 | 第59-61页 |
4.3.2 重组质粒电转化发根农杆菌K599 | 第61页 |
4.3.3 蒺藜苜蓿的转化体系 | 第61页 |
4.3.4 实验结果鉴定 | 第61页 |
4.4 结果与分析 | 第61-62页 |
4.4.1 启动子目的片段的扩增结果 | 第61-62页 |
4.4.2 启动子载体的构建 | 第62页 |
4.4.3 启动子表达分析 | 第62页 |
4.5 讨论 | 第62-64页 |
第五章 结论与展望 | 第64-66页 |
5.1 结论 | 第64-65页 |
5.2 展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
附录 1 | 第73-75页 |
附录 2 | 第75-77页 |
附录 3 | 第77-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
作者简介 | 第82页 |