| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第11-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-32页 |
| 1.1 帕金森病的发病机制 | 第15-23页 |
| 1.1.1 PD的临床与病理特征 | 第15页 |
| 1.1.2 PD的病因学 | 第15-19页 |
| 1.1.3 PD的动物模型 | 第19-23页 |
| 1.2 α-synuclein的结构与聚集 | 第23-26页 |
| 1.2.1 α-synuclein的生理功能 | 第24页 |
| 1.2.2 α-synuclein的结构 | 第24-25页 |
| 1.2.3 α-synuclein的聚集过程 | 第25页 |
| 1.2.4 α-synuclein聚集与PD的关系 | 第25-26页 |
| 1.3 儿茶酚四氢异喹啉类神经毒素的代谢与毒性机制 | 第26-29页 |
| 1.3.1 CTIQs的体内合成过程 | 第26-27页 |
| 1.3.2 CTIQs在脑内的分布 | 第27页 |
| 1.3.3 CTIQs的毒性机制 | 第27-28页 |
| 1.3.4 CTIQs对 α-synuclein聚集的影响 | 第28-29页 |
| 1.4 课题研究思路与实验设计 | 第29-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-62页 |
| 2.1 常用试剂与仪器 | 第32-35页 |
| 2.1.1 常用试剂与耗材 | 第32-34页 |
| 2.1.2 常用仪器 | 第34-35页 |
| 2.2 rAAV的小量制备与纯化 | 第35-47页 |
| 2.2.1 穿梭质粒的构建 | 第35-37页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第37页 |
| 2.2.3 rAAV包装转染方式研究 | 第37-39页 |
| 2.2.4 rAAV纯化方式的研究 | 第39-42页 |
| 2.2.5 rAAV性质的表征与滴度的测定 | 第42-47页 |
| 2.3 基于rAAV过表达 α-synuclein建立大鼠PD模型的方法 | 第47-52页 |
| 2.3.1 动物饲养 | 第47页 |
| 2.3.2 大鼠脑立体定位手术 | 第47-49页 |
| 2.3.3 阿扑吗啡诱导大鼠转圈实验 | 第49页 |
| 2.3.4 免疫组化实验 | 第49-51页 |
| 2.3.5 免疫荧光实验 | 第51-52页 |
| 2.4 内源性神经毒素NMSal诱导大鼠PD模型实验方法 | 第52-62页 |
| 2.4.1 NMSal的纯化与鉴定 | 第52-54页 |
| 2.4.2 动物的饲养与分组 | 第54-55页 |
| 2.4.3 免疫组化与免疫荧光实验 | 第55页 |
| 2.4.4 TUNEL法检测黑质区细胞凋亡 | 第55-56页 |
| 2.4.5 LC-MS/MS测定鼠脑内DA及其代谢产物含量 | 第56-58页 |
| 2.4.6 鼠脑蛋白的分组分提取 | 第58页 |
| 2.4.7 免疫印迹（Western Blot） | 第58-60页 |
| 2.4.8 蛋白酶K消化法检测不溶性颗粒实验 | 第60页 |
| 2.4.9 ELISA法测定脑内MDA与ROS含量 | 第60-61页 |
| 2.4.10 蛋白浓度的测定 | 第61页 |
| 2.4.11 数据统计 | 第61-62页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第62-113页 |
| 3.1 rAAV的小量制备与纯化 | 第62-71页 |
| 3.1.1 穿梭质粒的构建 | 第62-63页 |
| 3.1.2 rAAV包装转染方式的选择 | 第63-65页 |
| 3.1.3 rAAV纯化过程中细胞裂解方式的选择 | 第65-66页 |
| 3.1.4 肝素柱纯化rAAV条件的优化结果 | 第66-69页 |
| 3.1.5 rAAV感染细胞的用量与时间进程优化结果 | 第69-70页 |
| 3.1.6 rAAV-α-synuclein感染HEK293细胞的检测结果 | 第70-71页 |
| 3.1.7 小结 | 第71页 |
| 3.2 基于rAAV脑内过表达 α-synuclein建立大鼠PD模型 | 第71-79页 |
| 3.2.1 行为学检测结果 | 第71-73页 |
| 3.2.2 大鼠PD模型脑内 α-synuclein的表达 | 第73-75页 |
| 3.2.3 大鼠PD模型中多巴胺能神经元的丧失 | 第75-77页 |
| 3.2.4 rAAV特异性感染黑质区多巴胺能神经元 | 第77-78页 |
| 3.2.5 小结 | 第78-79页 |
| 3.3 NMSal诱导大鼠PD模型后引发神经毒性的增加 | 第79-95页 |
| 3.3.1 纯化后NMSal经HPLC-MS/MS分析性质的结果 | 第79-80页 |
| 3.3.2 NMSal诱导大鼠PD模型后对其行为学的影响 | 第80-81页 |
| 3.3.3 NMSal诱导大鼠PD模型后多巴胺能神经元死亡增加 | 第81-84页 |
| 3.3.4 NMSal诱导大鼠PD模型后黑质区细胞凋亡增多 | 第84-87页 |
| 3.3.5 NMSal促进大鼠PD模型纹状体区氧化应激的发生 | 第87-89页 |
| 3.3.6 NMSal诱导大鼠PD模型后降低纹状体区DA含量 | 第89-93页 |
| 3.3.7 NMSal促进大鼠PD模型内源性神经毒素的生成 | 第93-94页 |
| 3.3.8 小结 | 第94-95页 |
| 3.4 NMSal促进大鼠PD模型 α-synuclein聚集并形成类LBs颗粒 | 第95-113页 |
| 3.4.1 NMSal促进大鼠PD模型纹状体区 α-synuclein的表达与聚集 | 第95-101页 |
| 3.4.2 NMSal促进大鼠PD模型 α-synuclein的磷酸化 | 第101-104页 |
| 3.4.3 NMSal促进大鼠PD模型纹状体区 α-synuclein的泛素化 | 第104-107页 |
| 3.4.4 NMSal影响 α-synuclein的降解途径 | 第107-112页 |
| 3.4.5 小结 | 第112-113页 |
| 结论 | 第113-116页 |
| 参考文献 | 第116-129页 |
| 附录 | 第129-131页 |
| 攻读学位期间发表论文与研究成果清单 | 第131-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
