摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
英文缩写注解 | 第8-12页 |
1 前言 | 第12-18页 |
1.1 米糠活性成分 | 第12页 |
1.2 谷维素理化特性与生理功能 | 第12-14页 |
1.3 谷维素的抗炎生理作用及分子机理 | 第14-15页 |
1.4 核转录因子NFκB和AP-1调控机制 | 第15-16页 |
1.5 谷维素抗炎的潜在分子机理 | 第16-18页 |
2 材料与方法 | 第18-36页 |
2.1 实验材料 | 第18-21页 |
2.1.1 细胞株 | 第18页 |
2.1.2 实验试剂 | 第18-20页 |
2.1.3 实验器材 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-35页 |
2.2.1 主要试剂的配制 | 第21-23页 |
2.2.2 RAW264.7细胞的培养 | 第23页 |
2.2.3 MTS细胞活性实验 | 第23-25页 |
2.2.4 Hoechst33342荧光染色 | 第25页 |
2.2.5 RT-qPCR测定基因表达水平 | 第25-28页 |
2.2.6 Western blot检测总蛋白表达水平 | 第28-30页 |
2.2.7 Western blot检测AP-1和NFκB蛋白核移位 | 第30-31页 |
2.2.8 凝胶迁移实验EMSA检测AP-1和NFκB结合位点 | 第31-32页 |
2.2.9 报道基因检测AP-1和NFκB | 第32-35页 |
2.3 统计学分析 | 第35-36页 |
3 实验结果 | 第36-55页 |
3.1 谷维素对LPS诱导的RAW264.7细胞增殖的影响 | 第36-37页 |
3.2 谷维素对LPS诱导的RAW264.7细胞凋亡的影响 | 第37-38页 |
3.3 谷维素对LPS诱导的RAW264.7炎症基因表达的影响 | 第38-44页 |
3.3.1 RNA完整性检测 | 第38页 |
3.3.2 Real-time PCR检测炎症相关基因mRNA表达 | 第38-44页 |
3.4 谷维素对LPS诱导的RAW264.7蛋白表达水平的影响 | 第44-46页 |
3.5 谷维素对AP-1和NFκB核移位的影响 | 第46-50页 |
3.6 谷维素对AP-1和NFκB结合位点的影响 | 第50-51页 |
3.6.1 谷维素对LPS诱导的RAW264.7细胞AP-1与DNA位点结合的影响 | 第50-51页 |
3.6.2 谷维素对LPS诱导的RAW264.7细胞NFκB与DNA位点结合的影响 | 第51页 |
3.7 谷维素对AP-1和NFκB转录活性的影响 | 第51-55页 |
3.7.1 质粒完整性纯度检验 | 第51-52页 |
3.7.2 报告基因检测转染后RAW264.7细胞AP-1和NFκB的转录活性 | 第52-55页 |
4 讨论与分析 | 第55-58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
6 创新点 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-70页 |
附录 发表论文 | 第70-72页 |
致谢 | 第72-73页 |