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谷维素抑制内毒素诱导巨噬细胞炎症因子表达及其分子机理

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
英文缩写注解第8-12页
1 前言第12-18页
    1.1 米糠活性成分第12页
    1.2 谷维素理化特性与生理功能第12-14页
    1.3 谷维素的抗炎生理作用及分子机理第14-15页
    1.4 核转录因子NFκB和AP-1调控机制第15-16页
    1.5 谷维素抗炎的潜在分子机理第16-18页
2 材料与方法第18-36页
    2.1 实验材料第18-21页
        2.1.1 细胞株第18页
        2.1.2 实验试剂第18-20页
        2.1.3 实验器材第20-21页
    2.2 实验方法第21-35页
        2.2.1 主要试剂的配制第21-23页
        2.2.2 RAW264.7细胞的培养第23页
        2.2.3 MTS细胞活性实验第23-25页
        2.2.4 Hoechst33342荧光染色第25页
        2.2.5 RT-qPCR测定基因表达水平第25-28页
        2.2.6 Western blot检测总蛋白表达水平第28-30页
        2.2.7 Western blot检测AP-1和NFκB蛋白核移位第30-31页
        2.2.8 凝胶迁移实验EMSA检测AP-1和NFκB结合位点第31-32页
        2.2.9 报道基因检测AP-1和NFκB第32-35页
    2.3 统计学分析第35-36页
3 实验结果第36-55页
    3.1 谷维素对LPS诱导的RAW264.7细胞增殖的影响第36-37页
    3.2 谷维素对LPS诱导的RAW264.7细胞凋亡的影响第37-38页
    3.3 谷维素对LPS诱导的RAW264.7炎症基因表达的影响第38-44页
        3.3.1 RNA完整性检测第38页
        3.3.2 Real-time PCR检测炎症相关基因mRNA表达第38-44页
    3.4 谷维素对LPS诱导的RAW264.7蛋白表达水平的影响第44-46页
    3.5 谷维素对AP-1和NFκB核移位的影响第46-50页
    3.6 谷维素对AP-1和NFκB结合位点的影响第50-51页
        3.6.1 谷维素对LPS诱导的RAW264.7细胞AP-1与DNA位点结合的影响第50-51页
        3.6.2 谷维素对LPS诱导的RAW264.7细胞NFκB与DNA位点结合的影响第51页
    3.7 谷维素对AP-1和NFκB转录活性的影响第51-55页
        3.7.1 质粒完整性纯度检验第51-52页
        3.7.2 报告基因检测转染后RAW264.7细胞AP-1和NFκB的转录活性第52-55页
4 讨论与分析第55-58页
5 结论第58-59页
6 创新点第59-60页
参考文献第60-70页
附录 发表论文第70-72页
致谢第72-73页

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