| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 综述 | 第10-21页 |
| 1.1 目前土壤盐渍化概况 | 第10页 |
| 1.2 作物近缘野生资源优势 | 第10-11页 |
| 1.3 野生大豆资源多样性 | 第11-13页 |
| 1.3.1 野生大豆区域分布多样性 | 第11页 |
| 1.3.2 野生大豆的环境适应性 | 第11-12页 |
| 1.3.3 野生大豆遗传多样性 | 第12-13页 |
| 1.3.4 野生大豆的相关研究进展 | 第13页 |
| 1.4 高通量测序挖掘耐盐相关基因方法 | 第13-15页 |
| 1.5 盐离子转运相关基因功能、耐盐能力分析 | 第15-18页 |
| 1.6 CRISPR/Cas9基因编辑技术原理 | 第18-19页 |
| 1.7 本研究目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 野生大豆种质资源农艺性状调查与SSR分析 | 第21-29页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21-23页 |
| 2.1.1 野生大豆种质资源农艺性状调查 | 第21-22页 |
| 2.1.2 SSR分析 | 第22-23页 |
| 2.2 结果与分析 | 第23-27页 |
| 2.3 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 野生大豆构建群体的多样性分析 | 第29-35页 |
| 3.1 材料与方法 | 第29-30页 |
| 3.2 结果与分析 | 第30-34页 |
| 3.3 讨论 | 第34-35页 |
| 第四章 耐盐和盐敏感野生大豆材料生理生化性状分析 | 第35-45页 |
| 4.1 材料与方法 | 第35-40页 |
| 4.1.1 叶片含水率测定 | 第35-36页 |
| 4.1.2 酶活性分析 | 第36-39页 |
| 4.1.2.1 过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第36-37页 |
| 4.1.2.2 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第37-39页 |
| 4.1.3 可溶性糖含量测定 | 第39-40页 |
| 4.1.4 Na~+/K~+含量测定 | 第40页 |
| 4.2 结果与分析 | 第40-44页 |
| 4.2.1 耐盐性鉴定评价 | 第40-41页 |
| 4.2.2 叶片含水率测定 | 第41-42页 |
| 4.2.3 酶活性分析 | 第42-43页 |
| 4.2.4 可溶性糖含量测定 | 第43页 |
| 4.2.5 Na~+/K~+含量测定 | 第43-44页 |
| 4.3 讨论 | 第44-45页 |
| 第五章 离子转运相关基因过表达及突变对野生大豆耐盐性影响 | 第45-60页 |
| 5.1 材料与方法 | 第45-53页 |
| 5.1.1 大豆DNA提取 | 第45页 |
| 5.1.2 大豆RNA提取 | 第45页 |
| 5.1.3 RNA反转录,cDNA的合成 | 第45-46页 |
| 5.1.4 普通琼脂糖凝胶DNA回收 | 第46-47页 |
| 5.1.5 pEASY-Blunt Cloning Vector连接 | 第47页 |
| 5.1.6 质粒提取 | 第47页 |
| 5.1.7 目的基因的克隆 | 第47-48页 |
| 5.1.8 RT-PCR与qRT-PCR分析 | 第48-49页 |
| 5.1.9 植物表达载体构建 | 第49-50页 |
| 5.1.10 农杆菌转化 | 第50页 |
| 5.1.11 转化大豆子叶节发状根 | 第50-51页 |
| 5.1.12 CRISPR/Cas9转化体系构建 | 第51-53页 |
| 5.2 结果与分析 | 第53-58页 |
| 5.2.1 离子转运相关基因在野生大豆材料中的表达量分析 | 第53-54页 |
| 5.2.2 离子转运相关基因过表达对野生大豆耐盐能力的影响 | 第54-55页 |
| 5.2.3 NSCC(Glyma18g49890)突变对野生大豆发状根离子含量的影响 | 第55-58页 |
| 5.3 讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 总结 | 第60-62页 |
| 第七章 参考文献 | 第62-71页 |
| 附表一: 多样性数据 | 第71-76页 |
| 附表二: SSR结果分析数据 | 第76-82页 |
| 附表三: 大豆DNA的提取步骤 | 第82-83页 |
| 附表四: 普通琼脂糖凝胶DNA回收具体实验步骤 | 第83页 |
| 附表五: 质粒提取步骤 | 第83-84页 |
| 已发表文章 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
