| 符号及缩略词说明 | 第4-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 流行性腹泻的概述 | 第11-13页 |
| 1.1.1 PED的流行病学 | 第11-12页 |
| 1.1.2 PED的临床症状及剖检变化 | 第12页 |
| 1.1.3 PED的病理变化 | 第12-13页 |
| 1.2 流行性腹泻病毒 | 第13-14页 |
| 1.2.1 PEDV的分类 | 第13页 |
| 1.2.2 PEDV的形态结构 | 第13页 |
| 1.2.3 PEDV的理化特性 | 第13-14页 |
| 1.2.4 PEDV的培养特性 | 第14页 |
| 1.3 PEDV的分子生物学结构 | 第14-17页 |
| 1.3.1 PEDV的基因组结构 | 第14-15页 |
| 1.3.2 PEDV的主要基因及其产物 | 第15-17页 |
| 1.3.2.1 S基因 | 第15-16页 |
| 1.3.2.2 E基因 | 第16页 |
| 1.3.2.3 M基因 | 第16页 |
| 1.3.2.4 N基因 | 第16页 |
| 1.3.2.5 ORF3基因 | 第16-17页 |
| 1.4 PED检测诊断技术 | 第17-19页 |
| 1.4.1 RT-PCR方法 | 第17页 |
| 1.4.2 酶联免疫吸附试验 | 第17-18页 |
| 1.4.3 免疫荧光技术 | 第18页 |
| 1.4.4 胶体金技术 | 第18页 |
| 1.4.5 血清中和实验 | 第18-19页 |
| 1.5 PED疫苗研究进展 | 第19-21页 |
| 1.5.1 传统疫苗 | 第19-20页 |
| 1.5.2 基因工程疫苗 | 第20-21页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 样品及临床信息 | 第22页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第22页 |
| 2.1.3 质粒及受体细菌 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.5 主要设备及相关仪器 | 第23页 |
| 2.2 实验所用试剂配制方法 | 第23-26页 |
| 2.3 2014年-2015年山东省仔猪腹泻病毒感染状况调查方法 | 第26-28页 |
| 2.3.1 实验样品的处理 | 第26-27页 |
| 2.3.2 病料RNA的提取 | 第27页 |
| 2.3.3 腹泻病毒RT-PCR的检测方法 | 第27-28页 |
| 2.4 PEDV病理组织学检测 | 第28-30页 |
| 2.5 针对PEDV N蛋白多克隆抗体的制备 | 第30-39页 |
| 2.5.1 PEDV RNA的获取 | 第30页 |
| 2.5.2 目的基因（PEDV-N）的获取 | 第30-31页 |
| 2.5.3 PEDV N基因片段及PET-30a载体的双酶切、纯化回收及连接 | 第31-32页 |
| 2.5.4 重组质粒PET-30a-PEDVN的获取及鉴定 | 第32-34页 |
| 2.5.5 重组质粒PET-30a-PEDVN在大肠杆菌（BL21）中的表达 | 第34-35页 |
| 2.5.6 诱导产物的检测 | 第35-37页 |
| 2.5.7 蛋白质纯化 | 第37-39页 |
| 2.6 免疫组织化学检测 | 第39-40页 |
| 2.7 PEDV流行毒株S基因遗传变异分析 | 第40-45页 |
| 2.7.1 引物设计 | 第40-41页 |
| 2.7.2 样品处理 | 第41页 |
| 2.7.3 病料RNA的提取 | 第41页 |
| 2.7.4 PEDV S基因的扩增 | 第41-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-60页 |
| 3.1 2014年-2015年山东省仔猪腹泻病毒感染状况调查 | 第45-46页 |
| 3.1.1 仔猪腹泻病毒检测结果 | 第45-46页 |
| 3.2 腹泻仔猪组织病理学检测结果 | 第46-47页 |
| 3.3 多克隆抗体制备实验结果 | 第47-51页 |
| 3.3.1 PEDV N基因扩增结果 | 第47页 |
| 3.3.2 重组质粒的鉴定结果 | 第47-51页 |
| 3.4 免疫组织化学检测结果 | 第51-52页 |
| 3.5 PEDV流行毒株S基因遗传变异分析 | 第52-60页 |
| 3.5.1 PEDV S基因目的基因扩增结果 | 第52页 |
| 3.5.2 重组质粒鉴定结果 | 第52-53页 |
| 3.5.3 PEDV S基因序列分析 | 第53-55页 |
| 3.5.4 PEDV S1蛋白抗原表位域及抗原表位分析 | 第55-56页 |
| 3.5.5 PEDV S基因同源性比较 | 第56-58页 |
| 3.5.6 PEDV S基因遗传进化分析 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 4.1 山东省仔猪腹泻感染情况及流行规律 | 第60页 |
| 4.2 PEDV S1蛋白抗原表位域及抗原表位分析 | 第60-61页 |
| 4.3 PEDV S基因遗传进化分析 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 6 参考文献 | 第63-68页 |
| 7 附录 | 第68-69页 |
| 8 致谢 | 第69-71页 |
| 9 硕士期间发表论文情况 | 第71页 |
