| 符号说明 | 第5-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1. 引言 | 第15-30页 |
| 1.1 禽波氏杆菌病的研究进展 | 第15-21页 |
| 1.1.1 病原特征 | 第15页 |
| 1.1.2 生化特性 | 第15-16页 |
| 1.1.3 致病性 | 第16-18页 |
| 1.1.4 致病机理 | 第18页 |
| 1.1.5 临床症状 | 第18-19页 |
| 1.1.6 病理变化 | 第19页 |
| 1.1.7 流行病学 | 第19-20页 |
| 1.1.8 禽波氏杆菌病的诊断与防治 | 第20-21页 |
| 1.1.8.1 禽波氏杆菌病的鉴定 | 第20-21页 |
| 1.1.8.2 禽波氏杆菌病的防治 | 第21页 |
| 1.2 毕赤酵母表达系统概述 | 第21-26页 |
| 1.2.1 重组蛋白表达系统比较 | 第21-22页 |
| 1.2.2 毕赤酵母简介 | 第22-23页 |
| 1.2.3 常见的表达菌株 | 第23-24页 |
| 1.2.4 表达载体 | 第24-25页 |
| 1.2.4.1 信号肽 | 第24页 |
| 1.2.4.2 营养缺陷型 | 第24-25页 |
| 1.2.4.3 抗性基因 | 第25页 |
| 1.2.5 毕赤酵母的优势 | 第25-26页 |
| 1.2.6 毕赤酵母的诱导表达 | 第26页 |
| 1.3 泰山松花粉多糖研究概述 | 第26-29页 |
| 1.3.1 多糖的研究概述 | 第27-28页 |
| 1.3.2 多糖的生物活性 | 第28-29页 |
| 1.3.3 松花粉多糖研究进展 | 第29页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第29-30页 |
| 2. 材料与方法 | 第30-41页 |
| 2.1 菌株和细胞 | 第30页 |
| 2.2 试剂和仪器 | 第30-31页 |
| 2.3 禽波氏杆菌ompA毕赤酵母重组阳性转化子的构建 | 第31-36页 |
| 2.3.1 禽波氏杆菌ompA基因的PCR扩增 | 第31-32页 |
| 2.3.2 禽波氏杆菌ompA基因的克隆与测序 | 第32-33页 |
| 2.3.3 pPIC9-ompA重组表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 2.3.4 pPIC9-ompA质粒线性化 | 第34页 |
| 2.3.5 毕赤酵母阳性转化子的构建 | 第34-36页 |
| 2.4 禽波氏杆菌ompA诱导表达、鉴定及纯化 | 第36-38页 |
| 2.4.1 重组蛋白的表达与获取 | 第36页 |
| 2.4.2 重组蛋白的SDS-PAGE分析和Western blot鉴定 | 第36-37页 |
| 2.4.3 重组蛋白的纯化及含量测定 | 第37-38页 |
| 2.5 泰山松花粉多糖对禽波氏杆菌亚单位疫苗的免疫增强效果研究 | 第38-41页 |
| 2.5.1 疫苗制备 | 第38页 |
| 2.5.2 动物试验 | 第38-39页 |
| 2.5.3 泰山松花粉多糖对ompA亚单位疫苗在雏鸡体内免疫反应的影响 | 第39-41页 |
| 2.5.3.1 血清抗体效价的检测 | 第39-40页 |
| 2.5.3.2 血清IL-4 浓度的检测 | 第40-41页 |
| 2.5.3.3 外周血CD4+、CD8+ T淋巴细胞含量的检测 | 第41页 |
| 2.5.3.4 T淋巴细胞转化率的检测 | 第41页 |
| 2.5.4 数据分析 | 第41页 |
| 3. 结果与分析 | 第41-51页 |
| 3.1 禽波氏杆菌ompA毕赤酵母阳性转化子的构建 | 第41-43页 |
| 3.2 重组禽波氏杆菌ompA的分泌表达 | 第43-44页 |
| 3.3 血清抗体效价的变化 | 第44-45页 |
| 3.4 血清IL-4 浓度的变化 | 第45页 |
| 3.5 外周血CD4+、CD8+ T淋巴细胞含量的变化 | 第45-46页 |
| 3.6 外周血淋巴细胞转化率的变化 | 第46-50页 |
| 3.7 禽波氏杆菌ompA亚单位疫苗的保护效果 | 第50-51页 |
| 4. 讨论 | 第51-54页 |
| 5. 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第64-65页 |
| 个人简介 | 第65页 |
