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小尾寒羊肠道正常菌群高通量测序分析及羊源微生态制剂的研制

符号说明第5-11页
中文摘要第11-13页
Abstract第13-15页
1. 引言第16-28页
    1.1 肠道菌群研究概述第16-19页
        1.1.1 肠道菌群的形成过程第16页
        1.1.2 肠道菌群的组成与分布第16-17页
        1.1.3 肠道微生物的类群第17-18页
        1.1.4 肠道菌群的功能第18-19页
            1.1.4.1 营养与代谢第18-19页
            1.1.4.2 免疫保护第19页
    1.2 肠道菌群研究方法概述第19-23页
        1.2.1 传统培养方法第19-20页
        1.2.2 以宏基因组学为基础的研究方法第20-23页
            1.2.2.1 荧光原位杂交技术第21页
            1.2.2.2 末端限制性片段长度多态性技术第21-22页
            1.2.2.3 变性/温度梯度凝胶电泳技术第22页
            1.2.2.4 高通量测序技术第22-23页
    1.3 微生态制剂研究概述第23-27页
        1.3.1 微生态制剂的研究现状第24页
        1.3.2 微生态制剂的分类第24-25页
        1.3.3 常用益生菌的种类第25-26页
        1.3.4 微生态制剂对反刍动物的影响第26-27页
            1.3.4.1 稳定瘤胃内环境,促进氮的代谢第26页
            1.3.4.2 增加瘤胃微生物的数量,提高机体对饲料的利用率第26页
            1.3.4.3 提高机体的免疫力和抗病力第26页
            1.3.4.4 对新生反刍动物的影响第26-27页
        1.3.5 微生态制剂在反刍动物方面的应用第27页
    1.4 本研究的目的及意义第27-28页
2. 材料与方法第28-40页
    2.1 菌(毒)株与试验动物第28页
    2.2 试剂和仪器第28-29页
    2.3 小尾寒羊肠道正常菌群群落分布高通量测序分析第29-34页
        2.3.1 肠道样本的采集第29页
        2.3.2 DNA的提取第29-30页
        2.3.3 Meta Vx?文库构建和Illumina Mi Seq测序第30-32页
        2.3.4 生物信息学和统计分析第32-34页
            2.3.4.1 测序数据初步统计第32页
            2.3.4.2 测序数据质量优化第32页
            2.3.4.3 OTU分析第32-33页
            2.3.4.4 物种分类分析第33页
            2.3.4.5 α 多样性分析第33页
            2.3.4.6 β 多样性分析第33页
            2.3.4.7 样本聚类分析第33-34页
    2.4 具有益生特性的小尾寒羊肠道正常菌群的分离鉴定第34-36页
        2.4.1 小尾寒羊肠道正常菌群的分离第34页
        2.4.2 革兰氏染色、镜检第34页
        2.4.3 生化鉴定第34页
        2.4.4 16SrDNA基因序列的测定与系统发育分析第34-35页
        2.4.5 生长曲线的测定第35页
        2.4.6 耐酸试验第35页
        2.4.7 耐胆盐试验第35页
        2.4.8 体外抑菌试验(牛津杯法)第35-36页
        2.4.9 药敏试验第36页
        2.4.10 安全性试验第36页
    2.5 微生态制剂对家兔生长性能、免疫功能的影响及对腹泻羊的调理作用第36-40页
        2.5.1 微生态制剂的制备第36页
        2.5.2 兔瘟组织灭活苗的制备第36-37页
        2.5.3 动物试验第37页
        2.5.4 微生态制剂对家兔生长性能的影响第37页
        2.5.5 微生态制剂对家兔免疫功能的影响第37-39页
            2.5.5.1 血清抗体效价的检测第37-38页
            2.5.5.2 血清IFN-γ 浓度和溶菌酶含量的检测第38-39页
        2.5.6 微生态制剂对腹泻羊的调理作用第39页
        2.5.7 数据分析第39-40页
3. 结果与分析第40-62页
    3.1 小尾寒羊肠道正常菌群群落分布的高通量测序分析第40-51页
        3.1.1 测序数据质量分析结果第40页
        3.1.2 样本菌群结构分析第40-46页
        3.1.3 小尾寒羊肠道菌群 α 多样性指数分析第46-48页
        3.1.4 小尾寒羊肠道菌群 β 多样性指数和样本聚类分析第48-51页
    3.2 具有益生特性的小尾寒羊肠道正常菌群的分离鉴定第51-58页
        3.2.1 分离菌菌落及镜检形态观察第51-52页
        3.2.2 分离菌生化鉴定结果第52-53页
        3.2.3 16S r DNA基因序列的测定与系统发育分析第53-54页
        3.2.4 生长曲线测定结果第54页
        3.2.5 耐酸试验结果第54-55页
        3.2.6 耐胆盐试验结果第55-56页
        3.2.7 体外抑菌试验结果第56页
        3.2.8 药敏试验结果第56-57页
        3.2.9 安全性试验结果第57-58页
    3.3 微生态制剂对家兔生长性能、免疫功能的影响及对腹泻羊的调理作用第58-62页
        3.3.1 微生态制剂对家兔生长性能的影响结果第58页
        3.3.2 血清抗体水平第58-59页
        3.3.3 血清IFN-γ 浓度第59-60页
        3.3.4 血清溶菌酶含量第60-61页
        3.3.5 微生态制剂对腹泻羊调理作用的结果第61-62页
4. 讨论第62-64页
5. 结论第64-65页
参考文献第65-74页
致谢第74-75页
攻读读硕士学位期间发表论文第75-77页
个人简介第77页

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