英文缩略表 | 第5-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 前言 | 第13-30页 |
1.1 奶牛乳腺发育及功能研究进展 | 第13-17页 |
1.1.1 奶牛泌乳周期中乳腺上皮细胞的周期性变化 | 第13-14页 |
1.1.2 奶牛乳腺上皮细胞增殖凋亡及功能调控机制研究进展 | 第14-17页 |
1.2 5-HT对乳腺功能的调控研究进展 | 第17-26页 |
1.2.1 5-HT的合成、代谢及失活途径 | 第18-23页 |
1.2.2 5-HT受体的研究进展 | 第23-25页 |
1.2.3 5-HT对乳产量及乳蛋白合成的调控 | 第25-26页 |
1.3 调控奶牛乳腺上皮细胞增殖的信号通路研究 | 第26-30页 |
1.3.1 mTOR信号通路 | 第26-28页 |
1.3.2 JAK-STAT信号通路 | 第28-30页 |
1.4 研究目的及内容 | 第30页 |
2 材料和方法 | 第30-47页 |
2.1 试验材料 | 第30-32页 |
2.1.1 MAC-T细胞与奶牛乳腺组织 | 第30页 |
2.1.2 主要仪器与试剂 | 第30-31页 |
2.1.3 主要试剂的配置 | 第31-32页 |
2.2 试验方法 | 第32-42页 |
2.2.1 体外培养奶牛乳腺上皮细胞系(MAC-T) | 第32-34页 |
2.2.2 反转录、普通PCR和荧光定量PCR | 第34-40页 |
2.2.3 Western blot印记分析 | 第40-42页 |
2.3 奶牛干奶期血清中 5-HT的测定 | 第42-44页 |
2.4 奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)形态功能鉴定、MAO、SERT的表达以及五羟色胺受体的表达 | 第44页 |
2.5 5-HT促进MAC-T细胞增殖的机制研究 | 第44-45页 |
2.5.1 验证 5-HT对乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
2.5.2 5-HT1B、4 亚型受体促进MAC-T细胞增殖的信号通路研究 | 第45页 |
2.6 5-HT与PRL相互作用对MAC-T细胞增殖的影响及其机制研究 | 第45-47页 |
2.6.1 5-HT及PRL对乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第45-47页 |
2.6.2 5-HT与PRL相互作用促进MAC-T细胞增殖的机制研究 | 第47页 |
2.7 统计分析 | 第47页 |
3 结果与分析 | 第47-64页 |
3.1 奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)的鉴定 | 第47-49页 |
3.1.1 MAC-T细胞形态学鉴定 | 第47-48页 |
3.1.2 MAC-T细胞生长曲线绘制 | 第48-49页 |
3.1.3 MAC-T细胞骨架蛋白—角蛋白 18 mRNA的检测 | 第49页 |
3.2 干奶期奶牛血清中 5-HT浓度测定 | 第49-50页 |
3.3 5-HT浓度与作用时间对奶牛乳腺上皮细胞MAC-T增殖的影响 | 第50-52页 |
3.4 5-HT调控MAC-T细胞增殖的机制研究 | 第52-60页 |
3.4.1 MAC-T细胞 5-HT转运、代谢相关基因表达鉴定 | 第52-53页 |
3.4.2 5-HT受体拮抗剂对MAC-T细胞的影响 | 第53-55页 |
3.4.3 5-HT通过 1B和4亚型受体调控细胞增殖的信号机制研究 | 第55-60页 |
3.5 5-HT与催乳素互作共同调控MAC-T细胞增殖 | 第60-64页 |
3.5.1 不同浓度 5-HT和PRL单独或共同处理对MAC-T细胞增殖的影响 | 第60-62页 |
3.5.2 不同浓度 5-HT与不同浓度PRL作用对m-TOR蛋白表达的影响 | 第62-64页 |
4 讨论 | 第64-68页 |
4.1 乳腺上皮细胞系培养的重要性 | 第64页 |
4.2 MAO、SERT基因的表达 | 第64-65页 |
4.3 5-HT对细胞增殖的影响 | 第65页 |
4.4 5-HT通过 1B、4 亚型受体促进细胞增殖 | 第65-66页 |
4.5 5-HT与催乳素互作共同调控MAC-T细胞增殖 | 第66-68页 |
5 结论、研究展望 | 第68-69页 |
5.1 结论 | 第68页 |
5.2 研究展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-81页 |
致谢 | 第81-82页 |