| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第14-23页 |
| 1.1 蛋白激酶与蛋白激酶磷酸化 | 第14页 |
| 1.2 蛋白激酶活性检测方法 | 第14-18页 |
| 1.2.1 比色传感器 | 第15页 |
| 1.2.2 荧光传感器 | 第15页 |
| 1.2.3 电化学传感器 | 第15页 |
| 1.2.4 电致化学发光传感器 | 第15-16页 |
| 1.2.5 共振光散射（RLS）传感器 | 第16-17页 |
| 1.2.6 表面增强拉曼光谱学（SERS）传感器 | 第17-18页 |
| 1.2.7 质谱学传感器 | 第18页 |
| 1.3 光电化学传感器 | 第18-19页 |
| 1.4 g-C_3N_4材料 | 第19-20页 |
| 1.5 本课题的提出以及主要研究内容 | 第20-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-41页 |
| 2.1 仪器与试剂 | 第23-27页 |
| 2.1.1 仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.2 试剂 | 第24-26页 |
| 2.1.3 实验中所需主要缓冲溶液的配制 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-41页 |
| 2.2.1 基于磷酸化的氮化碳光电化学检测蛋白激酶A活性 | 第27-30页 |
| 2.2.1.1 碳微球的制备及表征 | 第27页 |
| 2.2.1.2 金纳米颗粒的合成 | 第27-28页 |
| 2.2.1.3 g-C_3N_4和P-g-C_3N_4纳米颗粒的制备及表征 | 第28页 |
| 2.2.1.4 ITO电极预处理 | 第28页 |
| 2.2.1.5 生物传感器的构建 | 第28-29页 |
| 2.2.1.6 光电化学信号检测 | 第29-30页 |
| 2.2.1.7 光电化学传感器的特异性及稳定性检测 | 第30页 |
| 2.2.1.8 抑制活性检测 | 第30页 |
| 2.2.1.9 实际样品中蛋白激酶A表达量的检测 | 第30页 |
| 2.2.2 基于CdS量子点增强g-C_3N_4光电信号检测蛋白激酶A活性 | 第30-33页 |
| 2.2.2.1 g-C_3N_4的制备 | 第30页 |
| 2.2.2.2 Au/g-C_3N_4复合材料的制备 | 第30-31页 |
| 2.2.2.3 CdS量子点的制备 | 第31页 |
| 2.2.2.4 生物传感器的构建 | 第31-32页 |
| 2.2.2.5 光电化学信号检测 | 第32-33页 |
| 2.2.2.6 光电化学传感器的特异性及稳定性检测 | 第33页 |
| 2.2.2.7 抑制活性检测 | 第33页 |
| 2.2.2.8 实际样品中蛋白激酶A表达量的检测 | 第33页 |
| 2.2.3 基于Au-ZIF-8 增强g-C_3N_4光电信号检测蛋白激酶A活性 | 第33-36页 |
| 2.2.3.1 碳微球的制备及表征 | 第33页 |
| 2.2.3.2 g-C_3N_4和TiO_2/g-C_3N_4纳米颗粒的制备 | 第33-34页 |
| 2.2.3.3 Au-ZIF-8 的制备 | 第34页 |
| 2.2.3.4 生物传感器的构建 | 第34-35页 |
| 2.2.3.5 光电化学信号检测 | 第35-36页 |
| 2.2.3.6 光电化学传感器的特异性及稳定性检测 | 第36页 |
| 2.2.3.7 抑制活性检测 | 第36页 |
| 2.2.4 基于TiO_2/g-C_3N_4,PAMAM树状高分子和碱性磷酸酯酶灵敏检测蛋白激酶A活性的信号增强的光电化学方法 | 第36-41页 |
| 2.2.4.1 g-C_3N_4和TiO-_2/g-C_3N_4纳米颗粒的制备 | 第36页 |
| 2.2.4.2 溶液状态下的PKA催化磷酸化作用 | 第36-37页 |
| 2.2.4.3 ITO电极预处理 | 第37页 |
| 2.2.4.4 生物传感器的构建 | 第37-39页 |
| 2.2.4.5 光电化学传感器的特异性及稳定性检测 | 第39页 |
| 2.2.4.6 抑制活性检测 | 第39-40页 |
| 2.2.4.7 细胞培养和总蛋白提取 | 第40-41页 |
| 3.结果与分析 | 第41-61页 |
| 3.1 基于磷酸化的氮化碳光电化学检测蛋白激酶A活性 | 第41-46页 |
| 3.1.1 碳微球、g-C_3N_4、P-g-C_3N_4和不同电极表征 | 第41-42页 |
| 3.1.2 实验的可行性分析 | 第42-43页 |
| 3.1.3 优化光信号分子P-g-C_3N_4的浓度和PKA孵育时间 | 第43-44页 |
| 3.1.4 PKA活性检测实验 | 第44-45页 |
| 3.1.5 PKA活性的抑制实验 | 第45-46页 |
| 3.1.6 实际样品中的PKA活性检测 | 第46页 |
| 3.2 基于CdS量子点增强g-C_3N_4光电信号检测蛋白激酶A活性 | 第46-50页 |
| 3.2.1 材料的表征 | 第46-47页 |
| 3.2.2 实验可行性分析 | 第47页 |
| 3.2.3 条件优化 | 第47-48页 |
| 3.2.4 PKA活性检测 | 第48-49页 |
| 3.2.5 PKA活性的抑制研究 | 第49-50页 |
| 3.2.6 实际样品检测 | 第50页 |
| 3.3 基于Au-ZIF-8 增强g-C_3N_4光电信号检测蛋白激酶A活性 | 第50-54页 |
| 3.3.1 材料的表征 | 第50-51页 |
| 3.3.2 电极表征以及可行性分析 | 第51-52页 |
| 3.3.3 实验条件优化 | 第52-53页 |
| 3.3.4 PKA活性检测 | 第53-54页 |
| 3.3.5 抑制剂活性研究 | 第54页 |
| 3.4 基于TiO-_2/g-C_3N_4,PAMAM树状高分子和碱性磷酸酯酶灵敏检测蛋白激酶A活性的信号增强的光电化学方法 | 第54-61页 |
| 3.4.1 TiO-_2/g-C_3N_4和NH_2-MBs的表征 | 第54-55页 |
| 3.4.2 传感器的表征和可行性实验 | 第55-57页 |
| 3.4.3 实验优化 | 第57页 |
| 3.4.4 PKA活性检测 | 第57-58页 |
| 3.4.5 抑制剂实验 | 第58-59页 |
| 3.4.6 实际样品中的PKA活性检测 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-65页 |
| 4.1 基于磷酸化的氮化碳光电化学检测蛋白激酶A活性 | 第61-62页 |
| 4.2 基于CdS量子点增强g-C_3N_4光电信号检测蛋白激酶A活性 | 第62-63页 |
| 4.3 基于Au-ZIF-8 增强g-C_3N_4光电信号检测蛋白激酶A活性 | 第63页 |
| 4.4 基于TiO-_2/g-C_3N_4,PAMAM树状高分子和碱性磷酸酯酶灵敏检测蛋白激酶A活性的信号增强的光电化学方法 | 第63-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 5.1 基于磷酸化的氮化碳光电化学检测蛋白激酶A活性 | 第65页 |
| 5.2 基于CdS量子点增强g-C_3N_4光电信号检测蛋白激酶A活性 | 第65页 |
| 5.3 基于Au-ZIF-8 增强g-C_3N_4光电信号检测蛋白激酶A活性 | 第65页 |
| 5.4 基于TiO-_2/g-C_3N_4,PAMAM树状高分子和碱性磷酸酯酶灵敏检测蛋白激酶A活性的信号增强的光电化学方法 | 第65-66页 |
| 6 创新之处 | 第66-67页 |
| 7 参考文献 | 第67-79页 |
| 8 致谢 | 第79-81页 |
| 9 攻读学位期间发表论文情况 | 第81页 |
