| 致谢 | 第6-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 缩略语表 | 第14-19页 |
| 1 绪论 | 第19-32页 |
| 1.1 植物中的花青苷 | 第19-20页 |
| 1.2 花青苷的合成途径及其影响因子 | 第20-23页 |
| 1.2.1 花青苷生物合成的结构基因 | 第20-21页 |
| 1.2.2 花青苷生物合成途径相关转录因子 | 第21-23页 |
| 1.2.3 光对花青苷合成的影响 | 第23页 |
| 1.3 DNA甲基化对花青苷合成的调控 | 第23-25页 |
| 1.3.1 DNA甲基化的形成 | 第23-24页 |
| 1.3.2 DNA甲基化对植物生长发育及抗逆性的调控 | 第24-25页 |
| 1.3.3 DNA甲基化对花青苷合成的调控 | 第25页 |
| 1.4 MicroRNA调控花青苷合成 | 第25-29页 |
| 1.4.1 MicroRNA的生物合成及作用机制 | 第25-26页 |
| 1.4.2 mRNA对植物生长发育及抗逆性的调控 | 第26-28页 |
| 1.4.3 mRNA对花青苷合成的调控 | 第28-29页 |
| 1.5 梨果皮着色的研究进展 | 第29-31页 |
| 1.5.1 红梨花青苷的分布及着色模式 | 第29页 |
| 1.5.2 红梨花青苷合成的生理及分子基础 | 第29-30页 |
| 1.5.3 红梨着色与光相关的人工调控措施 | 第30-31页 |
| 1.6 立题依据及研究内容 | 第31-32页 |
| 2 DNA甲基化调控'早酥'梨红色芽变着色的机制研究 | 第32-53页 |
| 2.1 材料与方法 | 第33-39页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第33-34页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第34-39页 |
| 2.1.2.1 花青苷提取与测定 | 第34页 |
| 2.1.2.2 DNA和RNA的提取及逆转录 | 第34-35页 |
| 2.1.2.3 实时定量PCR | 第35页 |
| 2.1.2.4 系统聚类分析 | 第35-37页 |
| 2.1.2.5 PpUFGT2和PpMYB10基因的编码区和启动子克隆 | 第37页 |
| 2.1.2.6 酵母单杂交实验(Y1H) | 第37-38页 |
| 2.1.2.7 PpMYB10启动子区域的DNA甲基化水平检测 | 第38页 |
| 2.1.2.8 统计分析 | 第38-39页 |
| 2.2 结果和分析 | 第39-51页 |
| 2.2.1 不同组织/器官的花青苷含量 | 第39-40页 |
| 2.2.2 不同组织/器官中花青苷合成相关基因的表达 | 第40-41页 |
| 2.2.3 系统聚类分析 | 第41-42页 |
| 2.2.4 不同组织/器官中PpUFGT2和PpMYB10编码区和启动子序列比较 | 第42-49页 |
| 2.2.5 PpUFGT2启动子和PpMYB10互作分析 | 第49-50页 |
| 2.2.6 不同组织/器官中PpMYB10启动子的甲基化水平检测 | 第50-51页 |
| 2.3 讨论 | 第51-53页 |
| 3 光敏感型红梨材料的筛选 | 第53-66页 |
| 3.1 材料与方法 | 第53-57页 |
| 3.1.1 试验材料及处理 | 第53-54页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第54-57页 |
| 3.1.2.1 果实色差测定 | 第54-55页 |
| 3.1.2.2 花青苷的提取与测定 | 第55页 |
| 3.1.2.3 苯丙氨酸解氨酶(PAL)和二氢类黄酮还原酶(DFR)酶活测定 | 第55页 |
| 3.1.2.4 RNA提取及逆转录 | 第55页 |
| 3.1.2.5 实时定量PCR | 第55页 |
| 3.1.2.6 统计分析 | 第55-57页 |
| 3.2 结果与分析 | 第57-62页 |
| 3.2.1 套袋和采后紫外光/可见光处理对梨着色和花青苷含量的影响 | 第57-58页 |
| 3.2.2 套袋和采后紫外光/可见光处理对梨PAL和DFR酶活性的影响 | 第58页 |
| 3.2.3 套袋和采后紫外光/可见光处理对梨花青苷合成相关基因表达的影响 | 第58-60页 |
| 3.2.4 花青苷合成相关基因不同家族成员表达模式的比较 | 第60-62页 |
| 3.3 讨论 | 第62-66页 |
| 4 miR156及其靶基因SPL调控光诱导的红梨果皮花青苷合成的机制 | 第66-89页 |
| 4.1 材料与方法 | 第67-74页 |
| 4.1.1 试验材料及处理 | 第67页 |
| 4.1.2 试验方法 | 第67-74页 |
| 4.1.2.1 mRNA建库,测序及分析 | 第67-68页 |
| 4.1.2.2 降解组文库构建、数据分析及靶基因鉴定 | 第68页 |
| 4.1.2.3 降解组文库构建、数据分析及靶基因鉴定 | 第68页 |
| 4.1.2.4 利用5'RACE对miRNA剪切位点进行鉴定 | 第68-69页 |
| 4.1.2.5 Gene Ontology (GO)分析 | 第69页 |
| 4.1.2.6 梨SPL基因家族全基因组鉴定和分析 | 第69-70页 |
| 4.1.2.7 花青苷的提取与测定 | 第70页 |
| 4.1.2.8 RNA提取及逆转录 | 第70页 |
| 4.1.2.9 实时定量PCR | 第70-72页 |
| 4.1.2.10 miR156的实时荧光定量PCR技术分析 | 第72页 |
| 4.1.2.11 酵母双杂交 | 第72-74页 |
| 4.1.2.12 统计分析 | 第74页 |
| 4.2 结果与分析 | 第74-85页 |
| 4.2.1 梨上全基因组miRNA及其靶基因的鉴定、miR156前体启动子顺式作用元件的分析 | 第74-76页 |
| 4.2.2 梨全基因组SPL的鉴定 | 第76-81页 |
| 4.2.3 梨上全基因组miR156靶基因的鉴定 | 第81页 |
| 4.2.4 去袋后'美人酥'果皮花青苷积累、花青苷合成相关基因、PpSPL基因及miR156的表达 | 第81-84页 |
| 4.2.5 花青苷合成相关转录因子的互作分析 | 第84页 |
| 4.2.6 PpSPL蛋白与花青苷合成相关转录因子的互作分析 | 第84-85页 |
| 4.3 讨论 | 第85-89页 |
| 5 小结与展望 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-107页 |
| 附表1 梨上保守miRNA序列信息 | 第107-116页 |
| 附表2 梨中特异性miRNA序列信息 | 第116-118页 |
| 附表3 miRNA靶基因列表 | 第118-128页 |
| 附表4 靶基因GO注释 | 第128-133页 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第133-134页 |
