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重组毕赤酵母合成S-腺苷甲硫氨酸的发酵过程优化及转录谱分析

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第1章 前言第10-21页
   ·S-腺苷甲硫氨酸简介第10-13页
     ·SAM的代谢与生理功能第10-12页
     ·SAM的医疗和保健应用第12-13页
   ·SAM的制备第13-16页
     ·发酵法制备SAM第13页
     ·代谢工程构建SAM高产菌株第13-15页
     ·SAM生产的发酵过程优化第15-16页
   ·转录组学在生物技术中的应用第16-19页
     ·系统生物学第16页
     ·转录组学简介第16-17页
     ·转录谱分析在生物技术领域的应用第17-18页
     ·巴斯德毕赤酵母及其转录谱分析第18-19页
   ·课题内容和意义第19-21页
第2章 材料与方法第21-28页
   ·实验材料第21-23页
     ·菌株第21页
     ·培养基配方第21-22页
     ·溶液第22页
     ·实验仪器第22-23页
     ·实验试剂和材料第23页
   ·实验方法第23-28页
     ·重组菌的摇瓶培养第23-24页
     ·重组毕赤酵母的发酵培养第24页
     ·分析方法第24-26页
     ·芯片杂交实验第26-28页
第3章 弱化SAM转化途径的重组菌发酵特性考察第28-34页
   ·摇瓶培养考察重组菌的特性第29-30页
     ·重组菌的生长第29-30页
     ·重组菌的SAM产量第30页
   ·重组菌的发酵培养考察第30-31页
   ·G12-CBS的代谢特性考察第31-33页
     ·G12-CBS的生长及SAM合成第31-32页
     ·G12-CBS的L-Met消耗第32-33页
   ·小结第33-34页
第4章 重组菌G12-CBS的发酵过程优化第34-42页
   ·摇瓶考察L-Met添加量对G12-CBS的影响第34-37页
     ·L-Met添加量对G12-CBS生长、SAM产量以及SAM合成酶酶活的影响第34-35页
     ·L-Met添加量对G12-CBS培养过程中L-Met消耗的影响第35-36页
     ·L-Met添加量对G12-CBS代谢的影响第36-37页
   ·15L罐中G12-CBS的L-Met的补料优化第37-41页
     ·L-Met补料速率对细胞生长,SAM产量以及SAM合成酶活的影响第37-38页
     ·L-Met补料速率对G12-CBS消耗L-Met的影响第38-39页
     ·L-Met补料速率对G12-CBS代谢的影响第39-41页
   ·小结第41-42页
第5章 重组菌的转录组分析第42-59页
   ·芯片取样点的确定第42-44页
     ·摇瓶中各重组菌的生长状态第42-43页
     ·重组菌的SAM合成比较第43页
     ·重组菌在L-Met添加前后的状态第43-44页
   ·毕赤酵母RNA抽提的优化第44-47页
     ·菌体处理对RNA抽提质量的影响第44-46页
     ·RNA样品保存条件的优化第46-47页
   ·转录谱初步分析第47-57页
     ·转录谱差异分析第47-48页
     ·实时定量PCR验证转录谱结果第48-49页
     ·SAM合成酶基因和甲醇代谢相关基因转录水平分析第49-51页
     ·SAM合成相关途径的基因转录差异分析第51-57页
   ·小结第57-59页
第6章 结论与展望第59-61页
   ·主要结论第59-60页
   ·展望第60-61页
参考文献第61-67页
致谢第67页

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