| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词及符号说明表 | 第7-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-16页 |
| 1.1 鸭病毒性肝炎分布及分类概述 | 第10页 |
| 1.2 鸭肝炎病原特性概述 | 第10-11页 |
| 1.3 基因结构特点概述 | 第11-12页 |
| 1.4 鸭肝炎诊断方法概述 | 第12-14页 |
| 1.4.1 病毒分离 | 第12页 |
| 1.4.2 电镜观察 | 第12页 |
| 1.4.3 血清学诊断 | 第12-13页 |
| 1.4.4 PCR诊断技术 | 第13-14页 |
| 1.5 荧光定量PCR技术概述 | 第14-15页 |
| 1.5.1 荧光定量PCR技术的介绍 | 第14页 |
| 1.5.2 荧光定量PCR方法类型 | 第14页 |
| 1.5.3 荧光定量RT-PCR技术的应用 | 第14-15页 |
| 1.6 选题目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 试验研究 | 第16-28页 |
| 2.1 试验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 菌株与毒株 | 第16页 |
| 2.1.2 试验动物 | 第16页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第16页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.2 一步法荧光定量RT-PCR检测DHAV-1或DHAV-3方法的建立 | 第17-23页 |
| 2.2.1 TaqMan探针与引物的设计 | 第17-18页 |
| 2.2.2 RNA的提取 | 第18页 |
| 2.2.3 DNA的抽提 | 第18-19页 |
| 2.2.4 标准品质粒制备 | 第19-22页 |
| 2.2.5 DHAV-1及DHAV-3一步法荧光定量RT-PCR反应条件的优化 | 第22页 |
| 2.2.6 rRT-PCR标准曲线的制作 | 第22-23页 |
| 2.2.7 特异性 | 第23页 |
| 2.2.8 灵敏性 | 第23页 |
| 2.2.9 重复性试验 | 第23页 |
| 2.3 一步法双重荧光定量RT-PCR检测DHAV-1和DHAV-3方法的建立 | 第23-25页 |
| 2.3.1 DHAV-1和DHAV-3一步法双重荧光RT-PCR反应条件的优化 | 第23-24页 |
| 2.3.2 rRT-PCR标准曲线的制作 | 第24-25页 |
| 2.3.3 特异性 | 第25页 |
| 2.3.4 敏感性 | 第25页 |
| 2.3.5 重复性试验 | 第25页 |
| 2.3.6 干扰性实验 | 第25页 |
| 2.4 一步法荧光定量RT-PCR方法的应用 | 第25-28页 |
| 2.4.1 DHA-3在鸭胚体内的增殖及分布规律 | 第25-26页 |
| 2.4.2 检测临床样本 | 第26页 |
| 2.4.3 一步法双重荧光定量RT-PCR方法检测DHAV-1和DHAV-3人工感染鸭胚 | 第26-27页 |
| 2.4.4 鸭肝炎临床样本检测 | 第27页 |
| 2.4.5 人工混合感染鸭胚体内DHAV-1和DHAV-3的增殖及分布规律 | 第27页 |
| 2.4.6 混合感染死亡鸭胚尿囊液及胚体内DHAV-1和DHAV-3的增殖规律 | 第27-28页 |
| 3 试验结果 | 第28-51页 |
| 3.1 一步法荧光定量RT-PCR分别检测DHAV-1和DHAV-3方法的建立 | 第28-32页 |
| 3.1.1 一步法荧光定量RT-PCR检测DHAV-1和DHAV-3试验条件的优化 | 第28页 |
| 3.1.2 标准曲线建立 | 第28-29页 |
| 3.1.3 特异性 | 第29-30页 |
| 3.1.4 敏感性 | 第30-31页 |
| 3.1.5 重复性试验 | 第31-32页 |
| 3.2 一步法双重荧光定量RT-PCR检测DHAV-1和DHAV-3方法的建立与应用 | 第32-37页 |
| 3.2.1 一步法双重荧光定量RT-PCR检测DHAV-1和DHAV-3方法条件的优化 | 第32页 |
| 3.2.2 标准曲线建立 | 第32-33页 |
| 3.2.3 特异性 | 第33-34页 |
| 3.2.4 灵敏度 | 第34-35页 |
| 3.2.5 重复性试验 | 第35-36页 |
| 3.2.6 干扰性试验 | 第36-37页 |
| 3.3 荧光定量方法初步应用 | 第37-51页 |
| 3.3.1 DHAV-3在鸭胚组织中的增殖和分布 | 第37-38页 |
| 3.3.2 鸭肝炎临床样本检测 | 第38页 |
| 3.3.3 DHAV-1和DHAV-3混合感染鸭胚尿囊液 | 第38-39页 |
| 3.3.4 一步法双重荧光定量RT-PCR方法检测鸭肝炎临床病料 | 第39-41页 |
| 3.3.5 DHAV-1和DHAV-3混合感染在鸭胚体内的增殖和分布规律 | 第41-45页 |
| 3.3.6 一步法双重荧光定量RT-PCR方法检测DHAV-1和DHAV-3在鸭胚胚体及尿囊液中的增殖作用规律 | 第45-51页 |
| 4 讨论 | 第51-59页 |
| 4.1 一步法双重荧光定量RT-PCR检测DHAV-1和DHAV-3方法的建立 | 第51-53页 |
| 4.2 DHAV-3在鸭胚组织中的增殖及分布规律 | 第53-54页 |
| 4.3 DHAV-1和DHAV-3人工感染鸭胚中病毒的增殖分布 | 第54页 |
| 4.4 鸭肝炎临床样品检测 | 第54-55页 |
| 4.5 DHAV-1和DHAV-3混合感染在鸭胚各组织中的增殖作用规律 | 第55-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
