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金磁酶联免疫法检测牛乳过敏原酪蛋白、α-乳白蛋白的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
主要符号表第13-14页
第1章 绪论第14-30页
   ·食品过敏与过敏危害第14-16页
     ·食品过敏现状第14页
     ·食品过敏原危害第14-15页
     ·过敏原相关法律法规第15-16页
   ·牛乳过敏与主要过敏原第16-18页
     ·牛乳过敏现象第16-17页
     ·牛乳主要过敏原第17-18页
   ·食品过敏原检测技术研究现状第18-24页
     ·体内检测技术分析第18-19页
       ·皮试第18-19页
       ·双盲对照食物激发实验第19页
       ·人血清特异性Ig E检测食品过敏原第19页
     ·体外检测分析技术第19-23页
       ·酶联免疫吸附试验第20页
       ·免疫层析技术第20-21页
       ·火箭免疫电泳第21页
       ·免疫荧光技术第21-22页
       ·免疫印迹第22页
       ·免疫传感器技术第22-23页
       ·聚合酶链式反应(PCR)扩增技术与实时荧光定量PCR技术第23页
       ·毛细管电泳技术第23页
     ·仪器检测分析技术第23-24页
       ·色谱法第23-24页
       ·质谱法第24页
   ·金磁纳米材料及在生物检测中的研究现状第24-26页
     ·金磁纳米材料及其结构第24页
     ·金磁微粒在生物检测中的应用第24-26页
       ·用于免疫学检测第24-25页
       ·用于核酸及其他生物分离纯化第25页
       ·用于生物医学诊断第25-26页
   ·酶标抗原在生物检测中的研究现状第26页
     ·酶标抗原简介第26页
     ·酶标抗原研究现状第26页
   ·本课题的研究目的和主要内容第26-30页
     ·研究目的第26-27页
     ·主要内容第27-30页
第2章 酪蛋白、α-乳白蛋白单克隆抗体的制备及鉴定第30-44页
   ·前言第30页
   ·实验材料、试剂及仪器第30-31页
     ·实验材料、试剂第30页
     ·仪器与设备第30-31页
   ·实验方法第31-38页
     ·主要溶液的配制第31-32页
     ·BALB/c小鼠的免疫第32页
     ·小鼠血清效价的测定第32-33页
     ·杂交瘤细胞株的建立第33-35页
       ·骨髓瘤细胞的复苏与培养第33页
       ·阴性血清及饲养细胞的制备第33-34页
       ·阳性脾细胞的制备第34页
       ·细胞融合,选择杂交瘤第34-35页
       ·筛选细胞上清阳性第35页
       ·杂交瘤细胞的冻存与复苏第35页
     ·单克隆抗体的大量生产第35页
     ·腹水纯化及效价的测定第35-36页
     ·单克隆抗体浓度的测定第36页
     ·单克隆抗体特异性鉴定第36-37页
     ·单抗亚类鉴定第37页
     ·单抗亲和力的鉴定第37-38页
   ·结果与讨论第38-43页
     ·小鼠血清效价、杂交瘤细胞阳性孔筛选及单抗效价的测定第38-40页
       ·BALB/c小鼠血清效价分析第38-39页
       ·杂交瘤细胞融合及阳性孔筛选第39页
       ·单抗效价的结果分析第39-40页
     ·腹水纯化及SDS-PAGE鉴定第40页
     ·单克隆抗体浓度的测定第40页
     ·单克隆抗体特异性鉴定第40-41页
     ·单克隆抗体亚类鉴定分析第41-42页
     ·单克隆抗体亲和力的分析第42-43页
   ·本章小结第43-44页
第3章 金磁(Fe_3O_4/Au)复合微粒与酶标抗原的制备第44-51页
   ·前言第44页
   ·实验材料及仪器第44-45页
     ·实验材料及试剂第44-45页
     ·仪器与设备第45页
   ·实验方法第45-47页
     ·金磁复合纳米粒子的制备第45-46页
       ·胶体金的制备第45页
       ·金磁复合纳米粒子的制备第45-46页
     ·酪蛋白、α-乳白蛋白酶标抗原的制备第46页
     ·酶标抗原蛋白浓度的测定第46页
     ·酶标抗原酶活力的检测第46页
     ·酶标抗原的酶活损失测定。第46-47页
   ·结果与讨论第47-50页
     ·胶体金的表征第47-48页
     ·金磁复合纳米粒子的表征第48-49页
     ·酶标抗原蛋白浓度的测定第49页
     ·酶标抗原的活性鉴定第49页
     ·酶标抗原的酶活损失测定第49-50页
   ·本章小结第50-51页
第4章 金磁酶联免疫法检测酪蛋白、α-乳白蛋白方法的建立第51-65页
   ·前言第51-52页
   ·实验材料、试剂及仪器第52页
     ·实验材料、试剂第52页
     ·实验仪器第52页
   ·实验方法第52-56页
     ·金磁探针的制备及优化第52-53页
       ·金磁复合纳米粒子偶联酪蛋白、α-乳白蛋白单克隆抗体检测探针的制备第52页
       ·金磁复合纳米粒子偶联酪蛋白、α-乳白蛋白单克隆抗体用量的优化第52-53页
       ·金磁复合纳米粒子偶联酪蛋白、α-乳白蛋白单克隆抗体偶联率的确定第53页
     ·金磁酶联免疫法检测牛乳中酪蛋白、α-乳白蛋白方法的建立第53-54页
     ·金磁酶联免疫法检测体系条件的优化第54页
       ·金磁探针浓度、酶标抗原稀释度的选择第54页
       ·免疫反应时间的选择第54页
     ·检测体系评价第54-56页
       ·检测范围及灵敏度第54-55页
       ·精密度第55页
       ·特异性第55页
       ·稳定性第55页
       ·牛乳中实际样品检测第55-56页
   ·结果与讨论第56-64页
     ·金磁探针的制备及优化第56-58页
       ·金磁复合纳米粒子偶联酪蛋白、α-乳白蛋白单克隆抗体稀释度的确定第56-57页
       ·金磁复合纳米粒子偶联酪蛋白、α-乳白蛋白单克隆抗体偶联率的确定第57-58页
     ·金磁酶联免疫法检测酪蛋白、α-乳白蛋白方法条件的优化第58-60页
       ·金磁探针浓度、酶标抗原稀释度的确定第58-59页
       ·免疫反应时间的确定第59-60页
     ·金磁酶联免疫法检测酪蛋白标准曲线的制作第60-61页
     ·金磁酶联免疫法检测 α-乳白蛋白标准曲线的制作第61页
     ·检测体系评价第61-64页
       ·检测范围及灵敏度第61-62页
       ·精密度第62页
       ·特异性第62-63页
       ·稳定性第63页
       ·牛乳中实际样品检测第63-64页
   ·本章小结第64-65页
第5章 结论与展望第65-67页
   ·结论第65-66页
   ·进一步工作的方向第66-67页
参考文献第67-73页
攻读学位期间取得的研究成果第73-74页
致谢第74页

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