| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略语（Abbreviation） | 第14-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-24页 |
| ·肠上皮细胞 | 第15页 |
| ·模式识别分子 | 第15-18页 |
| ·PRRs | 第15-16页 |
| ·TLR的种类及功用 | 第16页 |
| ·肠道炎症与TLR4信号通路 | 第16-17页 |
| ·TLRs信号传导途径的负调节因子及其功能 | 第17-18页 |
| ·益生菌及其与机体免疫功能的关系 | 第18-23页 |
| ·益生菌定义及其应用 | 第18页 |
| ·益生菌对肠道健康的作用机制 | 第18-22页 |
| ·调节肠道菌群平衡 | 第19页 |
| ·调节肠上皮细胞功能 | 第19-20页 |
| ·调节肠黏膜免疫水平 | 第20-22页 |
| ·益生乳酸菌的免疫调节分子 | 第22-23页 |
| ·屎肠球菌的研究进展 | 第23页 |
| ·研究目的与意义 | 第23页 |
| ·主要研究内容 | 第23-24页 |
| 2 HDRsEf1对肠上皮细胞完整性及IL-8 表达的影响 | 第24-39页 |
| ·试验材料 | 第24-25页 |
| ·菌株和细胞 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·试剂配置 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-30页 |
| ·细胞复苏和培养 | 第25页 |
| ·细菌培养和处理 | 第25页 |
| ·HDRsEf1培养上清（S-Ef1）的制备 | 第25-26页 |
| ·S-Ef1中胞外多糖和蛋白的制备和处理 | 第26页 |
| ·细菌粘附IPEC-J2细胞试验 | 第26-27页 |
| ·HDRsEf1抑制K88ac粘附IPEC-J2细胞试验 | 第26-27页 |
| ·S-Ef1抑制K88ac粘附IPEC-J2细胞试验 | 第27页 |
| ·HDRsEf1和S-Ef1对IPEC-J2细胞IL-8 的调节作用试验 | 第27页 |
| ·热处理的HDRsEf1和S-Ef1对IPEC-J2细胞IL-8 调节作用试验 | 第27页 |
| ·S-Ef1蛋白和多糖对IPEC-J2细胞IL-8 的调节作用试验 | 第27-28页 |
| ·HDRsEf1和S-Ef1对IPEC-J2细胞TEER的影响试验 | 第28页 |
| ·RT-qPCR方法测定IL-8 mRNA水平 | 第28-30页 |
| ·细胞总RNA提取步骤 | 第28页 |
| ·RNA浓度的检测 | 第28-29页 |
| ·cDNA的合成 | 第29页 |
| ·实时荧光定量PCR反应 | 第29-30页 |
| ·荧光定量PCR数据处理 | 第30页 |
| ·ELISA检测IL-8 蛋白含量 | 第30页 |
| ·统计学分析 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-37页 |
| ·HDRsEf1和S-Ef1对K88ac粘附的影响 | 第30-31页 |
| ·HDRsEf1和S- Ef1对K88ac刺激IPEC-J2细胞的IL-8 mRNA水平影响 | 第31-32页 |
| ·HDRsEf1和S-Ef对IL-1β/TNF-ɑ 诱导IPEC-J2细胞IL-8 mRNA水平的影响 | 第32-33页 |
| ·HDRsEf1和S-Ef1对k88ac、IL-1β、TNF-ɑ 诱导IPEC-J2细胞IL-8 表达的影响 | 第33-35页 |
| ·HDRsEf1和S-Ef1对IPEC-J2细胞屏障功能的影响 | 第35页 |
| ·热处理对HDRsEf1菌体和S-Ef1的炎性调节能力影响 | 第35-36页 |
| ·HDRsEf1代谢物对IPEC-J2细胞IL-8 的调节作用 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| ·HDRsEf1和S-Ef1对K88ac粘附IPEC-J2细胞的影响 | 第37页 |
| ·HDRsEf1和S-Ef1对IPEC-J2细胞TEER的影响 | 第37页 |
| ·HDRsEf1和S- Ef1对IPEC-J2细胞IL-8 的影响 | 第37-38页 |
| ·S-Ef1中EPS和蛋白对IPEC-J2细胞IL-8 的影响 | 第38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 3 屎肠球菌HDRsEf1 EPS的分离纯化 | 第39-44页 |
| ·试验材料 | 第39页 |
| ·菌株 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·试剂配制及柱床填料的处理 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39-41页 |
| ·HDRsEf1 EPS的制备 | 第39-40页 |
| ·EPS含量的测定 | 第40页 |
| ·EPS的DEAE-Toyopearl 650M离子柱纯化 | 第40页 |
| ·EPS的凝胶柱纯化 | 第40-41页 |
| ·NPS的Sephadex G-100凝胶柱纯化 | 第40页 |
| ·APS的Sepharose CL-6B凝胶柱纯化 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-42页 |
| ·葡萄糖标准曲线 | 第41页 |
| ·EPS的DEAE-Toyopearl 650M离子柱纯化 | 第41-42页 |
| ·NPS的Sephadex G-100凝胶柱纯化 | 第42页 |
| ·APS的Sepharose CL-6B凝胶柱纯化 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 4 屎肠球菌HDRsEf1及其EPS炎性调节机制的研究 | 第44-63页 |
| ·试验材料 | 第44-45页 |
| ·菌株及EPS | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·试剂配制 | 第44-45页 |
| ·试验方法 | 第45-48页 |
| ·MTT法检测HDRsEf1和EPS对IPEC-J2细胞的毒性作用试验 | 第45页 |
| ·HDRsEf1及其EPS在不同时间点对IPEC-J2细胞炎性因子影响的试验 | 第45-46页 |
| ·LPS不同时间点对IPEC-J2细胞炎性因子的影响试验 | 第46页 |
| ·HDRs Ef1及其EPS抗炎试验 | 第46页 |
| ·TLR2和TLR4在HDRsEf1和EPS炎性调节作用的试验 | 第46页 |
| ·HDRsEf1及其EPS对TLR相关负调控分子影响的试验 | 第46页 |
| ·HDRsEf1及其EPS对核转录因子NF-κB和AP-1 活性影响的试验 | 第46-47页 |
| ·RT-qPCR方法测定细胞中mRNA相对表达量 | 第47页 |
| ·Western Blot检测细胞中目的蛋白表达 | 第47-48页 |
| ·IPEC-J2细胞总蛋白提取 | 第47-48页 |
| ·Western Blot检测方法 | 第48页 |
| ·数据分析 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-59页 |
| ·HDRsEf1、EPS的细胞毒性试验 | 第48-49页 |
| ·HDRsEf1、EPS对IPEC-J2细胞促炎因子的影响 | 第49-50页 |
| ·LPS对IPEC-J2细胞促炎因子的影响 | 第50页 |
| ·HDRsEf1、EPS对LPS诱导的IPEC-J2细胞mRNA炎性因子的影响 | 第50-51页 |
| ·TLR2和TLR4在HDRsEf1或EPS炎性调节节中的作用 | 第51-53页 |
| ·HDRsEf1、EPS对TLR相关负调控分子的影响 | 第53-55页 |
| ·HDRsEf1、EPS对NF-κB和AP-1 的影响 | 第55-58页 |
| ·图示HDRsEf1、EPS通过调节TLR4信号通路缓解炎症反应 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-62页 |
| ·HDRsEf1炎症调节机制的研究 | 第59-61页 |
| ·多糖炎症调节机制的研究 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-74页 |
| 在读期间发表（或待发）文章和申请专利目录 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
