| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表（Abbreviation） | 第11-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-20页 |
| ·鸭坦布苏病毒（DTMUV）简介 | 第14-16页 |
| ·DTMUV的流行病学 | 第14页 |
| ·DTMUV的分子生物学特征 | 第14-15页 |
| ·DTMUV NS5蛋白简介 | 第15-16页 |
| ·天然免疫相关的信号通路简介 | 第16-18页 |
| ·TLRs介导的抗病毒天然免疫 | 第16-17页 |
| ·RLRs介导的抗病毒天然免疫 | 第17页 |
| ·TRAF6及其相关信号通路简介 | 第17-18页 |
| ·黄病毒属其它成员引起的天然免疫应答简介 | 第18-20页 |
| 2 研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 3 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·试验材料 | 第21-26页 |
| ·菌株、毒株与细胞 | 第21页 |
| ·质粒与载体 | 第21页 |
| ·引物和干扰分子 | 第21-24页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第24页 |
| ·培养基和抗生素的配制 | 第24-25页 |
| ·主要缓冲液和试剂及其配制 | 第25-26页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳试剂 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备相关试剂 | 第25页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）试剂及缓冲液 | 第25页 |
| ·Western Blot缓冲液及试剂 | 第25-26页 |
| ·主要实验仪器及设备 | 第26页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-32页 |
| ·细胞、病毒样品的总RNA的提取和cDNA的合成 | 第26-27页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第27页 |
| ·目的基因的引物设计 | 第27页 |
| ·PCR扩增 | 第27页 |
| ·PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第27页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备（氯化钙法） | 第27-28页 |
| ·质粒的制备与鉴定 | 第28-29页 |
| ·质粒的小量制备 | 第28-29页 |
| ·质粒的中量制备 | 第29页 |
| ·质粒转染（脂质体介导转染法） | 第29页 |
| ·双荧光素酶检测实验 | 第29-30页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第30页 |
| ·cDNA的合成 | 第30页 |
| ·SYBR Green I实时定量PCR | 第30页 |
| ·Western Blot样品准备 | 第30-31页 |
| ·双荧光素酶检测实验 | 第31页 |
| ·统计学分析 | 第31-32页 |
| 4 结果与分析 | 第32-45页 |
| ·鸭TRAF6基因的克隆与功能的研究 | 第32-37页 |
| ·TRAF6基因的克隆与序列比对分析 | 第32-33页 |
| ·TRAF6蛋白的组织差异表达情况及亚细胞定位分析 | 第33-34页 |
| ·duTRAF6的zinc fingers功能域和coiled-coil功能域对其激活NF-κB并诱导产生IFN-β 发挥重要的作用 | 第34-35页 |
| ·duTRAF6参与poly(I:C)或仙台病毒（SeV）诱导的NF-κB的激活 | 第35-37页 |
| ·DTMUV感染DEFs显著激活NF-κB和IRF1，诱导IFN-β 的产生 | 第37-39页 |
| ·DTMUV感染DEFs对细胞因子的mRNA表达水平的影响 | 第37-38页 |
| ·DTMUV感染DEFs对IRF1、NF-κB的激活及IFN-β 的诱导呈时间和剂量依赖性 | 第38-39页 |
| ·DTMUV感染DEFs通过RIG-I、MDA5、TLR3激活IRF1、NF-κB并诱导IFN-β的产生 | 第39-40页 |
| ·DTMUV编码的NS5蛋白在DEFs和DF1中能够激活NF-κB和IRF1并诱导IFN-β 的产生 | 第40-45页 |
| ·DTMUV编码的NS5蛋白在DEFs和DF1中能够激活NF-κB和IRF1并诱导IFN-β 的产生 | 第40-41页 |
| ·NS5蛋白的RdRp活性与其激活IRF1、NF-κB并诱导IFN-β 产生的作用相关 | 第41-42页 |
| ·NS5及其各突变体蛋白的亚细胞定位 | 第42-44页 |
| ·MDA5、MAVS、MyD88和TRIF参与NS5蛋白诱导IFN-β 产生的作用相关 | 第44-45页 |
| 5 讨论 | 第45-48页 |
| ·duTRAF6的克隆与激活NF-κB功能的研究 | 第45-46页 |
| ·DTMUV激活NF-κB和IRF1，诱导IFN-β 的产生的研究 | 第46-47页 |
| ·DTMUV激活NF-κB、IRF1并诱导IFN-β 产生的信号通路的研究 | 第47页 |
| ·DTMUV编码的蛋白在激活NF-κB、IRF1并诱导IFN-β 产生中的作用 | 第47-48页 |
| 6 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-59页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
