| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 引言 | 第13-18页 |
| 1.1 青环海蛇药用价值 | 第13页 |
| 1.2 TNF/TNFR信号通路 | 第13-15页 |
| 1.3 IBD疾病模型 | 第15-16页 |
| 1.3.1 化学诱导模型 | 第15-16页 |
| 1.3.2 基因敲除模型 | 第16页 |
| 1.3.3 细胞移植模型 | 第16页 |
| 1.4 本课题研究意义 | 第16-18页 |
| 第2章 海蛇蛇毒抗炎活性肽Hydrostatin-SN10的体外抗炎效果 | 第18-33页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-21页 |
| 2.2.1 细胞株 | 第18页 |
| 2.2.2 实验动物 | 第18页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第18-19页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.5 溶液配制 | 第20-21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-27页 |
| 2.3.1 细胞的复苏 | 第21页 |
| 2.3.2 细胞的换液及传代 | 第21页 |
| 2.3.3 细胞的冻存 | 第21页 |
| 2.3.4 Hydrostatin-SN10对LPS刺激的RAW264.7增殖活性的影响 | 第21-22页 |
| 2.3.5 Hydrostatin-SN10对LPS刺激的RAW264.7一氧化氮(NO)产生的影响 | 第22页 |
| 2.3.6 Hydrostatin-SN10对LPS刺激的RAW264.7炎症因子表达的影响 | 第22-24页 |
| 2.3.7 骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)的诱导 | 第24-25页 |
| 2.3.8 骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.3.9 骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)炎症模型的诱导 | 第26页 |
| 2.3.10 Hydrostatin-SN10对LPS刺激的骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)一氧化氮释放的影响 | 第26页 |
| 2.3.11 Hydrostatin-SN10对LPS刺激的骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)炎症因子表达的影响 | 第26-27页 |
| 2.3.12 统计分析 | 第27页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第27-31页 |
| 2.4.1 Hydrostatin-SN10能抑制LPS诱导的RAW264.7增殖活性 | 第27-28页 |
| 2.4.2 Hydrostatin-SN10能抑制LPS诱导的RAW264.7一氧化氮(NO)的生成 | 第28-29页 |
| 2.4.3 Hydrostatin-SN10能抑制LPS刺激的RAW264.7炎症因子表达 | 第29-30页 |
| 2.4.4 骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)的纯度鉴定 | 第30页 |
| 2.4.5 骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)炎症模型的诱导条件 | 第30-31页 |
| 2.4.6 Hydrostatin-SN10能抑制LPS刺激的骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)一氧化氮的产生 | 第31页 |
| 2.4.7 Hydrostatin-SN10能抑制LPS刺激的骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)炎症因子的表达 | 第31页 |
| 2.5 本章小结 | 第31-33页 |
| 第3章 Hydrostatin-SN10抗炎作用机制的研究 | 第33-43页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 实验材料 | 第33-35页 |
| 3.2.1 细胞系 | 第33页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第33-34页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第34-35页 |
| 3.2.4 溶液配制 | 第35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-38页 |
| 3.3.1 Hydrostatin-SN10对TNF-α刺激的NF-κB信号通路的影响 | 第35-37页 |
| 3.3.2 荧光标记的Hydrostatin-SN10验证Hydrostatin-SN10与TNFR1的结合 | 第37-38页 |
| 3.3.3 统计分析 | 第38页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第38-41页 |
| 3.4.1 Hydrostatin-SN10抑制TNF-α刺激的IκB-α的降解 | 第38-39页 |
| 3.4.2 Hydrostatin-SN10抑制TNF-α刺激的NF-κB调控基因的表达 | 第39页 |
| 3.4.3 Hydrostatin-SN10抑制TNF-α刺激的NF-κB的核定位 | 第39-40页 |
| 3.4.4 荧光标记的Hydrostatin-SN10孵育条件 | 第40页 |
| 3.4.5 Free Hydrostatin-SN10竞争性结合 | 第40页 |
| 3.4.6 TNF-α竞争性结合 | 第40-41页 |
| 3.4.7 抗TNFR1单抗竞争性结合 | 第41页 |
| 3.5 本章小结 | 第41-43页 |
| 第4章 海蛇蛇毒抗炎活性肽Hydrostatin-SN10的体内抗炎效果 | 第43-57页 |
| 4.1 引言 | 第43页 |
| 4.2 实验材料 | 第43-45页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第43-44页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第44页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第44-45页 |
| 4.2.4 溶液配制 | 第45页 |
| 4.3 实验方法 | 第45-51页 |
| 4.3.1 IL-10-/-小鼠基因型的鉴定 | 第45-47页 |
| 4.3.2 IL-10-/-小鼠结肠炎的诱导 | 第47页 |
| 4.3.3 Hydrostatin-SN10的给药剂量 | 第47页 |
| 4.3.4 小鼠结肠外观及结肠长度的记录 | 第47-48页 |
| 4.3.5 小鼠脾重指数的记录 | 第48页 |
| 4.3.6 小鼠结肠组织的HE染色 | 第48-49页 |
| 4.3.7 免疫组化法检测小鼠结肠组织TNF-α | 第49-50页 |
| 4.3.8 免疫组化法检测小鼠结肠组织Foxp3 | 第50-51页 |
| 4.3.9 统计分析 | 第51页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第51-56页 |
| 4.4.1 IL-10-/-小鼠基因型鉴定结果 | 第51-52页 |
| 4.4.2 IL-10-/-小鼠结肠炎模型的建立 | 第52页 |
| 4.4.3 IL-10-/-小鼠体重变化 | 第52-53页 |
| 4.4.4 IL-10-/-小鼠结肠长度变化 | 第53-54页 |
| 4.4.5 IL-10-/-小鼠脾脏指数变化 | 第54页 |
| 4.4.6 IL-10-/-小鼠结肠组织病理变化 | 第54-55页 |
| 4.4.7 IL-10-/-小鼠结肠组织TNF-α水平变化 | 第55-56页 |
| 4.4.8 IL-10-/-小鼠结肠组织Treg细胞水平变化 | 第56页 |
| 4.5 本章小结 | 第56-57页 |
| 第5章 结论与展望 | 第57-58页 |
| 5.1 结论 | 第57页 |
| 5.2 展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 在校期间发表论文及专利 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
