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XPD蛋白的线粒体定位及在线粒体DNA氧化性损伤修复中的功能研究

致谢第1-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
专业词汇中英文对照表第10-14页
第一章 引言第14-42页
   ·DNA损伤修复第14-19页
     ·DNA损伤第14页
     ·细胞核DNA修复与线粒体DNA修复第14页
     ·细胞核中的DNA修复途径第14-19页
   ·XPD蛋白第19-30页
     ·XPD解旋酶第19页
     ·XPD功能第19页
     ·XPD表型第19-22页
     ·XPD基因型和表型之间的联系第22-24页
     ·XPD结构第24-25页
     ·XPD复合物结构第25-30页
   ·线粒体第30-35页
     ·线粒体DNA第30-31页
     ·线粒体复合物第31-32页
     ·ROS的产生及氧化性损伤第32-33页
     ·线粒体修复第33-35页
   ·NER因子在保护及修复氧化性DNA损伤中的作用第35-37页
     ·转录伴随的修复:CSA,CSB及XPG第35页
     ·全基因组修复:XPC及XPA第35-37页
   ·XPD与氧化性损伤修复第37页
   ·线粒体疾病第37-38页
   ·线粒体蛋白质翻译及TUFM蛋白第38-40页
     ·线粒体翻译第38-40页
     ·TUFM蛋白第40页
   ·本论文研究内容及目的第40-42页
第二章 材料与方法第42-64页
   ·实验材料第42-48页
     ·所用细胞系的信息第42-43页
     ·所用抗体信息第43-44页
     ·所用质粒信息第44页
     ·引物序列第44-46页
     ·shRNA,siRNA序列第46-47页
     ·所用化学试剂及试剂盒第47-48页
     ·实验仪器第48页
   ·实验方法第48-64页
     ·RNA的提取及逆转录第48-49页
     ·表达质粒的构建第49页
     ·细胞培养第49-50页
     ·细胞转染第50-51页
     ·过表达及低表达细胞系的建立第51页
     ·免疫荧光第51-52页
     ·细胞组分分离,蛋白酶K处理及碱裂解提出的线粒体第52-53页
     ·双氧水处理实验第53-54页
     ·线粒体超氧化物的测定第54页
     ·ATP水平及线粒体膜电位检测第54-56页
     ·SDS-PAGE凝胶电泳第56-58页
     ·免疫印迹技术第58-59页
     ·基因组提取及长片段PCR(QPCR)第59-60页
     ·检测common deletion第60-61页
     ·大规模线粒体提取及Co-IP(co-immunoprecipitation)第61-64页
第三章 研究结果第64-93页
   ·免疫荧光试验证明XPD蛋白与线粒体具有共定位第64-65页
   ·XPD蛋白定位于线粒体中第65-67页
   ·XPD低表达提高了线粒体中ROS的产量第67-69页
   ·XPD低表达导致细胞中ATP水平及线粒体膜电位的降低第69-71页
   ·氧化性损伤压力下XPD在线粒体中的蛋白增加第71-72页
   ·XPD缺陷导致线粒体DNA产生高水平的common deletion第72-73页
   ·XPD调控线粒体DNA修复第73-76页
   ·XPD解旋酶活性在XPD调控的线粒体DNA的修复中有必不可少的作用第76-78页
   ·纯化XPD蛋白在线粒体中的复合物第78-81页
   ·TUFM在线粒体的氧化性损伤修复中与XPD起相似的作用第81-84页
   ·XPD与线粒体BER修复的核苷酸切除修复蛋白CSA,CSB没有相互作用第84-85页
   ·MMS19定位于线粒体中第85-87页
   ·线粒体中MMS19与XPD形成独立于TUFM的复合物第87-88页
   ·线粒体中MMS19低表达影响XPD的表达第88-89页
   ·线粒体中MMS19低表达影响线粒体功能第89-91页
   ·XPD在线粒体中形成两种复合物共同调控线粒体DNA修复第91-93页
第四章 分析讨论第93-97页
参考文献第97-105页
作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果第105页

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