致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
专业词汇中英文对照表 | 第10-14页 |
第一章 引言 | 第14-42页 |
·DNA损伤修复 | 第14-19页 |
·DNA损伤 | 第14页 |
·细胞核DNA修复与线粒体DNA修复 | 第14页 |
·细胞核中的DNA修复途径 | 第14-19页 |
·XPD蛋白 | 第19-30页 |
·XPD解旋酶 | 第19页 |
·XPD功能 | 第19页 |
·XPD表型 | 第19-22页 |
·XPD基因型和表型之间的联系 | 第22-24页 |
·XPD结构 | 第24-25页 |
·XPD复合物结构 | 第25-30页 |
·线粒体 | 第30-35页 |
·线粒体DNA | 第30-31页 |
·线粒体复合物 | 第31-32页 |
·ROS的产生及氧化性损伤 | 第32-33页 |
·线粒体修复 | 第33-35页 |
·NER因子在保护及修复氧化性DNA损伤中的作用 | 第35-37页 |
·转录伴随的修复:CSA,CSB及XPG | 第35页 |
·全基因组修复:XPC及XPA | 第35-37页 |
·XPD与氧化性损伤修复 | 第37页 |
·线粒体疾病 | 第37-38页 |
·线粒体蛋白质翻译及TUFM蛋白 | 第38-40页 |
·线粒体翻译 | 第38-40页 |
·TUFM蛋白 | 第40页 |
·本论文研究内容及目的 | 第40-42页 |
第二章 材料与方法 | 第42-64页 |
·实验材料 | 第42-48页 |
·所用细胞系的信息 | 第42-43页 |
·所用抗体信息 | 第43-44页 |
·所用质粒信息 | 第44页 |
·引物序列 | 第44-46页 |
·shRNA,siRNA序列 | 第46-47页 |
·所用化学试剂及试剂盒 | 第47-48页 |
·实验仪器 | 第48页 |
·实验方法 | 第48-64页 |
·RNA的提取及逆转录 | 第48-49页 |
·表达质粒的构建 | 第49页 |
·细胞培养 | 第49-50页 |
·细胞转染 | 第50-51页 |
·过表达及低表达细胞系的建立 | 第51页 |
·免疫荧光 | 第51-52页 |
·细胞组分分离,蛋白酶K处理及碱裂解提出的线粒体 | 第52-53页 |
·双氧水处理实验 | 第53-54页 |
·线粒体超氧化物的测定 | 第54页 |
·ATP水平及线粒体膜电位检测 | 第54-56页 |
·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第56-58页 |
·免疫印迹技术 | 第58-59页 |
·基因组提取及长片段PCR(QPCR) | 第59-60页 |
·检测common deletion | 第60-61页 |
·大规模线粒体提取及Co-IP(co-immunoprecipitation) | 第61-64页 |
第三章 研究结果 | 第64-93页 |
·免疫荧光试验证明XPD蛋白与线粒体具有共定位 | 第64-65页 |
·XPD蛋白定位于线粒体中 | 第65-67页 |
·XPD低表达提高了线粒体中ROS的产量 | 第67-69页 |
·XPD低表达导致细胞中ATP水平及线粒体膜电位的降低 | 第69-71页 |
·氧化性损伤压力下XPD在线粒体中的蛋白增加 | 第71-72页 |
·XPD缺陷导致线粒体DNA产生高水平的common deletion | 第72-73页 |
·XPD调控线粒体DNA修复 | 第73-76页 |
·XPD解旋酶活性在XPD调控的线粒体DNA的修复中有必不可少的作用 | 第76-78页 |
·纯化XPD蛋白在线粒体中的复合物 | 第78-81页 |
·TUFM在线粒体的氧化性损伤修复中与XPD起相似的作用 | 第81-84页 |
·XPD与线粒体BER修复的核苷酸切除修复蛋白CSA,CSB没有相互作用 | 第84-85页 |
·MMS19定位于线粒体中 | 第85-87页 |
·线粒体中MMS19与XPD形成独立于TUFM的复合物 | 第87-88页 |
·线粒体中MMS19低表达影响XPD的表达 | 第88-89页 |
·线粒体中MMS19低表达影响线粒体功能 | 第89-91页 |
·XPD在线粒体中形成两种复合物共同调控线粒体DNA修复 | 第91-93页 |
第四章 分析讨论 | 第93-97页 |
参考文献 | 第97-105页 |
作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第105页 |