| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 专业词汇中英文对照表 | 第11-16页 |
| 引言 | 第16-20页 |
| 第1章 文献综述 | 第20-44页 |
| ·黑色素瘤的研究进展 | 第20-42页 |
| ·黑素瘤发病的分子基础 | 第20-24页 |
| ·肿瘤转移相关基因的研究进展 | 第24-30页 |
| ·上皮间质转化(EMT)及肿瘤干细胞在肿瘤转移中的作用 | 第30-37页 |
| ·低氧诱导因子(HIF)在黑素瘤中的作用研究 | 第37-39页 |
| ·黑素瘤治疗研究进展 | 第39-42页 |
| ·IGFBP5在肿瘤中的研究进展 | 第42-44页 |
| 第2章 材料和方法 | 第44-72页 |
| ·方法与技术流程图 | 第44-45页 |
| ·实验材料 | 第45-53页 |
| ·细胞系和临床样品 | 第45页 |
| ·实验动物 | 第45-46页 |
| ·质粒载体 | 第46-47页 |
| ·Western blot、免疫荧光及免疫组化所用抗体 | 第47页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第47-53页 |
| ·实验方法 | 第53-72页 |
| ·IGFBP5基因及蛋白表达水平的检测 | 第53-56页 |
| ·过表达IGFBP5和利用shRNA沉默IGFBP5稳定细胞系的建立 | 第56-61页 |
| ·细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡特性的探究 | 第61-64页 |
| ·细胞迁移侵袭实验的体外探究 | 第64-65页 |
| ·IGFBP5对上皮间质转化(EMT)进程和肿瘤干细胞的影响 | 第65-66页 |
| ·人肿瘤细胞SCID-beige小鼠原位成瘤移植模型的建立和统计 | 第66-67页 |
| ·人肿瘤细胞SCID-beige小鼠移植模型肺转移实验 | 第67页 |
| ·IGF1R受体及下游细胞信号通路的研究 | 第67-69页 |
| ·利用ION-Proton平台对IGFBP5稳定细胞系进行RNA-Seq文库的构建、模板的建立和上机测序 | 第69页 |
| ·利用生物信息学方法对IGFBP5过表达和基因敲低转录组数据进行基因功能聚类和信号通路分析 | 第69-72页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第72-98页 |
| ·IGFBP5表达在人恶性黑素瘤细胞和组织中的表达呈差异性 | 第72-74页 |
| ·IGFBP5抑制恶性黑素瘤的生长 | 第74-79页 |
| ·IGFBP5抑制细胞增殖和降低细胞克隆形成能力 | 第74-75页 |
| ·IGFBP5阻滞细胞周期在G1期和促进细胞凋亡 | 第75-78页 |
| ·IGFBP5降低在联合重症免疫缺陷小鼠(SCID-Beige mice)移植瘤模型中的细胞成瘤能力 | 第78-79页 |
| ·体内外的实验表明IGFBP5抑制了恶性黑素瘤细胞的转移能力 | 第79-82页 |
| ·IGFBP5能够抑制恶性黑素瘤细胞的迁移和侵袭 | 第79-81页 |
| ·IGFBP5能够抑制SCID-beige小鼠移植瘤模型肺转移的能力 | 第81-82页 |
| ·IGFBP5抑制黑素瘤细胞的上皮间质细胞转化(EMT) | 第82-86页 |
| ·过表达IGFBP5抑制黑素瘤细胞的上皮间质细胞转化并降低肿瘤细胞干细胞样特性 | 第83-84页 |
| ·敲低IGFBP5表达促进EMT发生并增强肿瘤细胞干细胞样特性 | 第84-86页 |
| ·IGFBP5蛋白通过抑制IGF1R-ERK信号通路和P38-MAPK信号通路来发挥作用 | 第86-87页 |
| ·IGFBP5蛋白过表达会降低低氧诱导因子HIF1α蛋白及下游因子的表达 | 第87-88页 |
| ·IGFBP5过表达和基因沉默的RNA-seq转录组分析 | 第88-95页 |
| ·转录组基因表达谱分析 | 第88-89页 |
| ·基因功能聚类 | 第89-92页 |
| ·IPA信号通路分析 | 第92-95页 |
| ·工作展望 | 第95-98页 |
| 第4章 结论 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-110页 |
| 附录A | 第110-120页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第120-121页 |
